[發明專利]一種轉Bt作物生境中昆蟲體內痕量Bt毒蛋白的檢測方法無效
| 申請號： | 201110001722.5 | 申請日： | 2011-01-06 |
| 公開（公告）號： | CN102590523A | 公開（公告）日： | 2012-07-18 |
| 發明（設計）人： | 宋敦倫;高希武;肖達;薛麗;盧延 | 申請（專利權）人： | 宋敦倫 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京市盛峰律師事務所 11337 | 代理人： | 李賀香 |
| 地址： | 100193 北京市海淀區圓*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 bt 作物 生境 昆蟲 體內 痕量 蛋白 檢測 方法 | ||
1.一種轉Bt作物生境中昆蟲體內痕量Bt毒蛋白的檢測方法，其特征在于，包括步驟如下：
第一步，采集在轉Bt作物田間生長的待測昆蟲，制作待測蟲液；
第二步，取在實驗室中非轉Bt基因植物中生長的與所述待測昆蟲同種或同類昆蟲，制作對照蟲液；
第三步，用所述對照蟲液配置系列濃度的標準Bt毒蛋白；
第四步，利用酶聯免疫方法測得標準Bt毒蛋白和待測蟲液在波長為650納米處的光密度值；
第五步，根據標準Bt毒蛋白的濃度和相對應的光密度值得到一個標準方程，根據所述標準方程計算待測蟲液的Bt毒蛋白濃度。
2.根據權利要求1所述的轉Bt作物生境中昆蟲體內痕量Bt毒蛋白的檢測方法，其特征在于：在所述第一步中，首先用1倍PBST沖洗緩沖液研磨蟲體獲得研磨液，然后離心所述研磨液取其上清液作為所述待測蟲液。
3.根據權利要求2所述的轉Bt作物生境中昆蟲體內痕量Bt毒蛋白的檢測方法，其特征在于：在所述第一步中，所述1倍PBST沖洗緩沖液按蟲體(克)比沖洗緩沖液(毫升)為1∶10的比例使用，在10000rpm的情況下離心所述研磨液5min，取其上清液作為所述待測蟲液。
4.根據權利要求1所述的轉Bt作物生境中昆蟲體內痕量Bt毒蛋白的檢測方法，其特征在于：在所述第二步中，制作所述對照蟲液的方法與所述第一步中制作所述待測蟲液的方法相同。
5.根據權利要求1所述的轉Bt作物生境中昆蟲體內痕量Bt毒蛋白的檢測方法，其特征在于：所述系列濃度的標準Bt毒蛋白的濃度系列為2.5納克/毫升、1.25納克/毫升，0.625納克/毫升、0.3125納克/毫升、0.15625納克/毫升和0納克/毫升。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于宋敦倫，未經宋敦倫許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201110001722.5/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
