[發(fā)明專利]一項鐵線蓮阿拉貝拉組織培養(yǎng)快繁技術(shù)

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110000713.4
• 申請日: 2011-01-05
• 公開（公告）號: CN102144543A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 季孔庶;仵丹丹
• 申請（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及鐵線蓮‘阿拉貝拉’組織培養(yǎng)快繁技術(shù)。

二、背景技術(shù)

鐵線蓮‘阿拉貝拉’(Clematis‘Arabella’)隸屬于毛茛科(Ranunculaceae)鐵線蓮屬(Clematis?L.)，是鐵線蓮Clematis‘Integrifolia’與Clematis‘Lanujinosa’的雜交品種，原產(chǎn)自英國。該品種植物花型、花序多樣，花色豐富，花期長，園藝用途廣泛，觀賞價值頗高。‘阿拉貝拉’作為垂直綠化材料，不僅應(yīng)用于園林領(lǐng)域，而且廣泛用于盆栽，切花等。

鐵線蓮‘阿拉貝拉’觀賞價值較高，應(yīng)用前景廣，但卻因其種子繁殖困難，推廣速度慢。目前我國還沒有研究出它的快繁技術(shù)，該品種仍需從國外大量進(jìn)口，限制了‘阿拉貝拉’在我國的推廣和應(yīng)用，同時也消耗掉我國大量外匯。所以，研究‘阿拉貝拉’快繁技術(shù)極其必要。

鐵線蓮品種豐富，但至今對于鐵線蓮的組織培養(yǎng)研究并不多，澤仁旺姆利用甘青鐵線蓮的種子長出的幼苗進(jìn)行了不定芽和不定根的生成；張啟香找出了‘Multi-Blue’的最佳外植體為莖尖；而張濤誘導(dǎo)出重瓣鐵線蓮的愈傷，但沒有誘導(dǎo)不定芽。本技術(shù)利用鐵線蓮‘阿拉貝拉’當(dāng)年新生枝條帶芽莖段，進(jìn)行組織培養(yǎng)，誘導(dǎo)腋芽的發(fā)生，促進(jìn)不定芽的生成，再誘導(dǎo)其生根。通過人工配制不同營養(yǎng)成分和激素調(diào)控，在保留‘阿拉貝拉’母體花色艷麗，花型大等特點的基礎(chǔ)上，形成成千上萬小植株，短時間內(nèi)獲得大量試管苗，獲得的幼苗存可放在人工控制的培養(yǎng)室內(nèi)，可實現(xiàn)一年四季工廠化無性系育苗。因此利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖鐵線蓮‘阿拉貝拉’，不僅為推廣鐵線蓮‘阿拉貝拉’提供了一個快速的途徑，也為其工廠化生產(chǎn)提供幫助，應(yīng)用前景遠(yuǎn)大。

三、發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種可以實現(xiàn)快速和大量繁殖鐵線蓮‘阿拉貝拉’的組織培養(yǎng)技術(shù)。

本發(fā)明提供的鐵線蓮‘阿拉貝拉’組織培養(yǎng)快繁技術(shù)，包括以下幾個步驟：

1、腋芽誘導(dǎo)：

將當(dāng)年新生枝條帶芽莖段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基含有1/4MS、1/2MS、MS常規(guī)基本培養(yǎng)基、2，4-二氯苯氧乙酸1.0毫克/升、吲哚丁酸0.1毫克/升、蔗糖30克/升。培養(yǎng)20?天后，待培養(yǎng)物誘導(dǎo)出芽原基后，進(jìn)入以下第2步。

2、不定芽增殖：

將第1步所得的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到增殖培養(yǎng)基上，增殖培養(yǎng)基含有MS常規(guī)基本培養(yǎng)基、6-芐基嘌呤0.5-1.5毫克/升、吲哚丁酸0.05-0.15毫克/升、蔗糖20-40克/升。培養(yǎng)20天左右，待小苗長到常規(guī)生根程序所需高度時，進(jìn)入以下第3步。

3、生根：

將第2步所得的無根小苗齊根取下，轉(zhuǎn)至常規(guī)生根培養(yǎng)基中，生根基本培養(yǎng)基含有1/4MS，1/2MS，MS常規(guī)基本培養(yǎng)基、萘乙酸0.05毫克/升，培養(yǎng)20天左右，待小苗根部長出短根，即可進(jìn)行根的伸長，根伸長培養(yǎng)基含有1/2MS常規(guī)基本培養(yǎng)基、萘乙酸0-1.0毫克/升或吲哚丁酸0.03-1.0毫克/升、蔗糖30克/升。35天左右，小苗長出4-5根主根時，進(jìn)入以下第4步。

4、移栽與煉苗：

先把封口膜打開，在培養(yǎng)室內(nèi)煉苗1周左右，取出小苗，洗凈小苗根部的瓊脂，移栽到珍珠巖與泥炭以1∶3混合的基質(zhì)內(nèi)，放入溫室大棚進(jìn)一步煉苗10-15天。其間需要噴灑1/10MS大量元素營養(yǎng)液以利于緩解蒸騰失水，并補(bǔ)充植物營養(yǎng)。

本發(fā)明利用帶腋芽的莖段做外植體進(jìn)行直接器官的發(fā)生，大大提高了組織培養(yǎng)的快繁速率，同時用基本培養(yǎng)基添加微量激素進(jìn)行腋芽的誘導(dǎo)，能夠快速誘導(dǎo)腋芽，并促使其伸長。腋芽誘導(dǎo)后，不宜在原培養(yǎng)基上長期培養(yǎng)，否則誘導(dǎo)出的芽容易伸長生長，因此要轉(zhuǎn)接MS+6-芐基嘌呤0.5毫克/升+吲哚丁酸0.1毫克/升+蔗糖30克/升培養(yǎng)基上，以利于不定芽的分化和伸長。生根階段，本發(fā)明采用了先誘導(dǎo)再促進(jìn)伸長的方法，首先，把伸長到適合常規(guī)生根高度的小苗，轉(zhuǎn)移到1/2MS+萘乙酸0.03毫克/升培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)不定根的生成，再轉(zhuǎn)移到促進(jìn)根伸長1/2MS+萘乙酸0.04毫克/升培養(yǎng)基中，此方法大大提高了根誘導(dǎo)和伸長的速率。

因此采用此發(fā)明的培養(yǎng)基有如下優(yōu)點：腋芽誘導(dǎo)啟動快，芽分化系數(shù)高，苗伸長快、生長一致且健壯，生根率高、根長且壯，生長周期短，基本無畸形苗。

四、附圖說明

圖12，4-D和IBA誘導(dǎo)產(chǎn)生的腋芽

圖26-BA和IBA激素處理后的增殖芽

圖3NAA誘導(dǎo)產(chǎn)生的根

五、具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。

實施例