[發明專利]用于預防或治療宮頸癌的、包含人乳頭瘤病毒變形體及免疫增強劑的組合物

有效

• 申請號: 201080068626.6
• 申請日: 2010-08-13
• 公開（公告）號: CN103180343A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 成英哲;徐尚煥;徐有石
• 申請（專利權）人: 株式會社吉耐森;株式會社拜德
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;A61P15/02;A61P35/00
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 黎艷;萬志香

技術領域

本發明涉及用于預防或治療宮頸癌的、包含人乳頭瘤病毒（human?papillomavirus;?HPV）變形體及免疫增強劑的組合物。更具體地，融合蛋白通過誘導HPV16和18型抗原特異性免疫應答治療由HPV引起的腫瘤。所述融合蛋白包括融合多肽（Polypeptide）、信號肽及免疫增強肽，所述融合多肽被重組，以使作為人乳頭瘤病毒16和18型的抗原E6、E7的三維結構變形。

背景技術

眾所周知，宮頸癌（cervical?cancer）是由于受人乳頭瘤病毒16和18型等的高危型人乳頭瘤病毒的感染而引起的疾?。?i>zur?Hausen,?H?et?al.?Biochem?Biophys?Acta?1996,?1288;?F55-F78,?Mark?H?et?al.?J?Natl?Cancer?Inst?1993,?85;?958-964）。在HPV蛋白中E6、E7蛋白對宮頸癌的發病起主要作用，而且已確認在宮頸癌患者的腫瘤組織中表達99%，從而成為制備用于治療和預防宮頸癌的疫苗的主要靶物質（von?Knebel?Doeberitz?et?al.?Int.?J.?Cancer?1992,?51;?831-834）。E6與已知用作腫瘤抑制蛋白p53結合，通過促進p53的分解，用細胞凋亡(apoptosis)途徑阻止細胞周期的進行。E7與作為腫瘤抑制因子的視網膜母細胞瘤蛋白pRb（retinoblastoma?protein）結合，通過使之失活并促進其分解，誘導細胞周期進入S期(Cobrinik?et?al.,?Trends?Biochem?Sci?1992,?17:312-5)。

然而，為治療宮頸癌，在使用通過同時表達HPV16的?E6、E7蛋白的核酸序列的組合物的臨床試驗中，其療效并不顯著(Garcia?F?et?al.?Obstet?Gynecol?2004,?103;?317-326)。此結果表明，僅施用HPV抗原是無法發生足以治療或抑制宮頸癌的抗原特異性免疫應答的。

因此，為治療子宮癌，需增強E6、E7的免疫原性（immunogenicity），并且需消除所述蛋白的致癌能力。

發明內容

技術問題

本發明的目的在于，提供用于預防或治療由HPV引起的疾病的新型融合蛋白及編碼所述融合蛋白的多核苷酸（polynucleotide）。所述融合蛋白可抑制HPV?E6、E7蛋白的致癌能力并展現增強的免疫原性。

本發明的另一個目的在于，提供表達所述融合蛋白的重組載體（recombinant?vector）、包含所述載體的宿主細胞以及用所述宿主細胞表達融合蛋白的方法。

本發明的另一個目的在于，提供用所述融合蛋白的、用于預防或治療由HPV引起的疾病的組合物。

本發明的另一個目的在于，提供用所述組合物的、用于預防或治療由HPV引起的疾病的方法。

技術方案

為達到上述目的，一方面，本發明提供融合蛋白，該融合蛋白包括：融合多肽，即三維結構變形的、源于人乳頭瘤病毒16和18型并包含SEQ?ID?NO：1氨基酸序列的E6、E7；用于分泌所述融合多肽的信號肽；和免疫增強肽。

另一方面，本發明提供多核苷酸，該多核苷酸用于編碼本發明的融合蛋白。

另一方面，本發明提供重組載體，該重組載體包括本發明的多核苷酸。

另一方面，本發明提供宿主細胞，該宿主細胞由本發明的重組載體轉化而成。

另一方面，本發明提供用于表達本發明的融合蛋白的方法，該方法是通過培養本發明的經轉化的宿主細胞完成的。

另一方面，本發明提供用于預防或治療由人乳頭瘤病毒引起的疾病的組合物，該組合物包括作為活性成分的、選自本發明的融合蛋白、由表達所述融合蛋白的重組載體轉化而成的宿主細胞及其均漿（homogenate）中的一種或多種的物質。

另一方面，本發明提供用于預防或治療由人乳頭瘤病毒引起的疾病的方法，該方法包括向需要者施用有效劑量的本發明的組合物的步驟。

有益效果