[發明專利]改善色譜介質性能的接枝方法

無效

• 申請號: 201080068116.9
• 申請日: 2010-07-29
• 公開（公告）號: CN103108693A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: N·索伊斯;J·烏瑪納;Y·張
• 申請（專利權）人: EMD密理博公司
• 主分類號: B01J20/32
• 分類號: B01J20/32;B01J39/26;B01J20/28;B01J39/20;B01J41/20
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 彭麗丹;過曉東

1.改性具有擴散孔和表面反應性不飽和官能團的多孔基材的方法，所述方法包括：

a)提供多孔基材，所述多孔基材具有擴散孔以及與該基材的表面附著的表面反應性不飽和官能團；

b)提供包含接枝單體或接枝單體混合物的溶液以及可溶性自由基聚合引發劑；

c)使所述基材與所述溶液接觸；和

d)在所述溶液中加入所述自由基聚合引發劑，由此在所述基材的表面上的表面反應性不飽和官能團和所述接枝單體或接枝單體混合物之間引發自由基聚合，以形成與所述基材偶聯的聚合物鏈。

2.權利要求1的方法，其中所述基材選自多孔聚合物珠粒、多孔瓊脂糖珠粒和多孔陶瓷珠粒。

3.權利要求1的方法，所述方法在步驟(d)之后還包括：

e)洗滌所述基材以去除任何過量未反應的接枝單體、接枝單體混合物或未附著的聚合物鏈，得到蛋白質結合容量大于100g/L的多孔基材。

4.權利要求3的方法，所述方法在步驟(e)之后還包括：

f)將配體與附著在所述多孔基材表面上的聚合物鏈偶聯。

5.權利要求1的方法，其中所述自由基聚合引發劑選自過硫酸銨、過硫酸鉀、偶氮雙(4-氰基戊酸)、Irgacure2959、2,2′-偶氮雙(2-脒基-丙烷)鹽酸鹽及它們的組合。

6.權利要求1的方法，其中所述不飽和官能團由烯丙基構成。

7.權利要求6的方法，其中所述烯丙基由式R-O-CH₂-CH=CH₂構成，其中R是多孔基材表面或所述表面和烯丙基之間的連接基。

8.權利要求1的方法，其中約20-約400μmol/mL的表面反應性基團具有式R-O-CH₂-CH=CH₂，其中R是多孔基材表面或所述表面和烯丙基之間的連接基。

9.權利要求1的方法，其中所述接枝單體或接枝單體混合物選自甲基丙烯酸酯、丙烯酸酯、丙烯酰胺、丙烯酸、2-丙烯酰氨基-2-甲基-1-丙烷磺酸、[3-(甲基丙烯酰基氨基)丙基]三甲基氯化銨、2-丙烯酰氨基-乙醇酸、衣康酸或乙基乙烯基酮、甲基丙烯酸縮水甘油酯、N,N-二甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺、甲基丙烯酸羥丙酯、N-苯基丙烯酰胺、羥丙基丙烯酰胺及它們的組合。

10.權利要求1的方法，其中所述多孔基材上的擴散孔的孔徑為>約且<約1μ。

11.使用表面聚合物鏈延伸劑改性具有擴散孔的多孔色譜珠粒的方法，所述方法包括：

a)提供多孔色譜珠粒，所述多孔色譜珠粒具有擴散孔、表面以及與所述表面偶聯的表面反應性不飽和官能團；

b)提供包含接枝單體或接枝單體混合物的溶液以及可溶性自由基聚合引發劑；

c)使所述色譜珠粒與所述溶液接觸；和

d)在所述溶液中加入所述自由基聚合引發劑，由此在所述珠粒上的表面反應性不飽和官能團和所述接枝單體或接枝單體混合物之間引發自由基聚合，以形成與所述珠粒偶聯的聚合物鏈延伸劑；

e)洗滌所述珠粒以去除任何過量未反應的接枝單體、接枝單體混合物或未附著的聚合物鏈，得到蛋白質結合容量大于100g/L的多孔色譜珠粒；和

f)將配體與附著在所述色譜珠粒表面上的聚合物鏈偶聯。

12.權利要求11的方法，其中所述多孔色譜珠粒選自聚合物珠粒、瓊脂糖珠粒和陶瓷珠粒。

13.權利要求11的方法，其中所述自由基聚合引發劑選自過硫酸銨、過硫酸鉀、偶氮雙(4-氰基戊酸)、Irgacure2959、2,2′-偶氮雙(2-脒基-丙烷)鹽酸鹽及它們的組合。

14.權利要求11的方法，其中所述不飽和官能團由烯丙基構成。

15.權利要求14的方法，其中所述烯丙基由式R-O-CH₂-CH=CH₂構成，其中R是多孔基材表面或所述表面和烯丙基之間的連接基。

16.權利要求11的方法，其中約20-約400μmol/mL的表面反應性基團具有式R-O-CH₂-CH=CH₂，其中R是多孔色譜珠粒或所述珠粒表面和烯丙基之間的連接基。