[發(fā)明專(zhuān)利]用于甲硫氨酸生產(chǎn)的菌株和方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201080064983.5
• 申請(qǐng)日: 2010-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102782137A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-11-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: C.波伊薩特;G.貝斯特爾-科爾;G.巴比爾;R.菲格
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 代謝探索者公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/52
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/52;C12P13/12
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所 11105
• 代理人: 謝夢(mèng)欣

1.一種用于在發(fā)酵工藝中生產(chǎn)甲硫氨酸、其前體或衍生物的方法，其包括如下步驟：

-在包含碳源、硫源和氮源的合適培養(yǎng)基中培養(yǎng)經(jīng)修飾的微生物，和

-從所述培養(yǎng)基中回收甲硫氨酸和/或其衍生物，

其中所述微生物是以減少蘇氨酸轉(zhuǎn)化為除甲硫氨酸外的其他化合物的方式修飾的。

2.權(quán)利要求1的方法，其中自蘇氨酸的甘氨酸產(chǎn)生是減少的。

3.權(quán)利要求2的方法，其中將蘇氨酸轉(zhuǎn)化為甘氨酸的酶的活性是減少的。

4.權(quán)利要求3的方法，其中至少一種下述基因的表達(dá)是減弱的：ltaE、kbl、glyA、tdh。

5.權(quán)利要求4的方法，其中表達(dá)突變型GlyA酶，其具有減弱的蘇氨酸醛縮酶活性，同時(shí)維持所述酶GlyA的絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶活性。

6.權(quán)利要求5的方法，其中所述GlyA酶具有在其多肽序列中的至少一種下述氨基酸變化：T128S、T224S、T225S、T226S、T227S、T230S、R235K。

7.根據(jù)權(quán)利要求4-6中任一項(xiàng)的方法，其中所述內(nèi)源基因glyA已從所述微生物中缺失。

8.權(quán)利要求1的方法，其中所述微生物是以減少自蘇氨酸的異亮氨酸產(chǎn)生的方式修飾的。

9.權(quán)利要求8的方法，其中蘇氨酸至α-酮丁酸的脫氨基和/或脫水是減少的。

10.權(quán)利要求9的方法，其中至少一種下述酶活性是減弱的：蘇氨酸脫氨酶、蘇氨酸脫水酶。

11.權(quán)利要求10的方法，其中至少一種下述基因的表達(dá)是減弱的：ilvA、tdcB、sdaA、sdaB、tdcG。

12.權(quán)利要求1-11的方法，其中所述微生物中的絲氨酸可用度是增加的。

13.權(quán)利要求12的方法，其中所述微生物中的絲氨酸產(chǎn)生是通過(guò)增加基因serA、serB、serC中的至少一種的表達(dá)增加的。

14.權(quán)利要求12或13的方法，其中絲氨酸降解是通過(guò)減弱基因sdaA或sdaB中的至少一種的活性減少的，所述基因編碼具有絲氨酸脫氨酶活性的酶。

15.權(quán)利要求11或14的方法，其中sdaA基因在其核酸序列中具有T158G核苷酸變化。

16.一種經(jīng)修飾的微生物，其包含：

-metJ基因的缺失，

-對(duì)于甲硫氨酸具有減少的反饋敏感性的等位基因metA的表達(dá)，和

-例如權(quán)利要求1–15中任一項(xiàng)中所述的至少一種修飾。