[發明專利]包含蛋白酶變體的組合物和方法

有效

• 申請號: 201080063354.0
• 申請日: 2010-12-09
• 公開（公告）號: CN102762222A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發明（設計）人: J·R·巴斯勒;L·G·卡斯考-佩雷拉;D·A·埃斯特爾;J·T·凱利斯;A·比薩奇科;A·J·保羅斯;D·托雷斯-帕茲米諾
• 申請（專利權）人: 丹尼斯科美國公司
• 主分類號: A61K38/16
• 分類號: A61K38/16;C07K1/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

1.親本蛋白酶的一種分離的蛋白酶變體，所述變體包含具有三個選自X024G／R、X053G、X078N、X101N、X128A/S和X217L/Q的氨基酸置換的氨基酸序列，其中所述變體具有蛋白水解活性并且所述變體的每個氨基酸位置通過與SEQ?ID?NO:2的氨基酸序列中的氨基酸位置的對應關系進行編號，所述對應關系通過所述變體的氨基酸序列與SEQ?ID?NO:2比對來確定。

2.根據權利要求1所述的變體，其中所述變體氨基酸序列具有四個選自X024G／R、X053G、X078N、X101N、X128A/S和X217L/Q的氨基酸置換。

3.根據權利要求1所述的變體，其中所述變體氨基酸序列具有五個選自X024G／R、X053G、X078N、X101N、X128A/S和X217L/Q的氨基酸置換。

4.根據權利要求1所述的變體，其中所述變體氨基酸序列具有六個選自X024G／R、X053G、X078N、X101N、X128A/S和X217L/Q的氨基酸置換。

5.根據任何前述權利要求所述的變體，其中所述變體氨基酸序列還具有氨基酸置換X097A。

6.根據任何前述權利要求所述的變體，其中所述變體氨基酸序列具有氨基酸置換X024G／R+X053G+X078N+X101N+X128A/S+X217L/Q或X097A+X128A/S+X217L/Q。

7.根據任何前述權利要求所述的變體，其中所述變體氨基酸序列具有氨基酸置換S024G／R+S053G+S078N+S101N+G128A/S+Y217L/Q或G097A+G128A/S+Y217L/Q。

8.根據權利要求7所述的變體，其中所述變體氨基酸序列具有氨基酸置換S024G+S053G+S078N+S101N+G128S+Y217Q或S024G+S053G+S078N+S101N+G128A+Y217Q，并且任選還具有選自N109G、N076D、S033T、N243V、S248A、A088T和S063G的置換。

9.根據權利要求7所述的變體，其中所述變體氨基酸序列還具有一組選自如下的氨基酸置換：

A088T+N109G+A116T+G131H+N243V+L257G，

S033T+N076D，

S009T+N109G+K141R+N243V，

S162G+K256R，

N109G+A116T，

N109G+L257G，

S162G+L257G，

N061G+N109G+N243V，

N109G+N243V+S248A，

S033T+N076D+N109G+N218S+N243V+S248N+K256R，

N109G+A116T+N243V+K256R，

A088T+N109G+A116T+G131H+N243V，

A088T+N109G，

N109G+N243V，

T158S+L257G，

N061S+N109G+N243V，

P040A+N109G+N243V+S248N+K256R，

S009T+S018T+Y021N+N109G+K141R，

A088T+N109G+A116T+T158S+N243V+K256R，

A088T+N109G+A116T+T158S+N218S+L257G，

N109G+K256R，

N109G+N243V+K256R，

S063G+K256R，

S063G+N109G，

S063G，

S063G+N076D，

S033T+N076D+N218S，和

N076D+N218S。