[發明專利]微流體裝置的再生

有效

• 申請號: 201080060206.3
• 申請日: 2010-11-30
• 公開（公告）號: CN102686246A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 王菁;蒂莫西·M·沃登貝里
• 申請（專利權）人: 富魯達公司
• 主分類號: A61L2/00
• 分類號: A61L2/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 顧晉偉;鄭斌

相關申請的交叉引用

本申請要求2009年11月30日提交的美國臨時專利申請No.61/265,325的優先權，其通過引用全文并入本文。

背景技術

微流體裝置為核酸分析領域(尤其是包括核酸擴增的分析領域)帶來了一場革命。適當設計的裝置可用作分析工具來測定特定的目的靶核酸在樣品中是否存在、檢測或表征與疾病或遺傳異常相關聯的等位基因、進行基因分型分析和基因表達分析、用于核酸測序以及其他應用。在一個實施方案中，可以以制備性方式使用所述裝置，以擴增出足以用于進一步分析的核酸。

可通過設計可重復使用的微流體裝置尤其是可重復使用的基于彈性體的微流體裝置來降低分析成本。然而，重復使用這樣的裝置有許多障礙。局限性之一與核酸分析的靈敏度相關，其中單個核酸分子也可被檢測到。這樣，來自上一輪分析的即便微小量的污染也可使被重新使用的裝置不可靠。

附圖簡述

圖1是顯示可重復使用的微流體芯片中選定的室、通道和閥的示意圖。

圖2是概述再生的微流體芯片之應用的流程圖。“NAI溶液”是“核酸失活溶液(nucleic?acid?inactivating?solution)”。

圖3A～D顯示簡化的示意圖，其顯示本發明一個實施方案的操作過程中通過微流體裝置的流體流。

圖4顯示實驗結果，其中在兩個裝置的每一個中先后進行6個PCR擴增，在擴增之間再生所述裝置。在每次反應中，按照下文實施例中的描述用陽性對照和陰性對照對微流體裝置進行上樣。獲得實時PCR的熱圖，以評價在再生之后裝置的可靠性。顯示了Ct和Ct的標準差。第二列中顯示第一芯片的結果，且第三列中顯示第二芯片的結果。

圖5是從美國專利No.7,476,363修改而來的示意圖，顯示可重復使用的微流體芯片中選定的室、通道和閥。

圖6是從美國專利No.7,476,363修改而來的示意圖，顯示可重復使用的微流體芯片中選定的室、通道和閥。

圖7是從美國專利公開No.2008/0223721修改而來的示意圖，顯示可重復使用的微流體芯片中選定的室、通道和閥。

圖8是從美國專利No.7,476,363修改而來的示意圖，顯示可重復使用的微流體芯片中選定的室、通道和閥。

圖9是本發明一個實施方案的載體和微流體裝置的簡化透視圖。

圖10A～D圖示用于均勻計量泵送(uniform?meter?pumping)的方法。

圖10A：膨脹泵送（Dilation?Pumping)；圖10B：單側膨脹泵送(Single?Sided?Dilation?Pumping)；圖10CB：蠕動泵送(Peristaltic?Pumping)；圖10D：限流阻礙物泵送(Limiting?Resistor?pumping)。

這些圖表僅是代表性的，并不意在限制本發明的范圍。要理解的是，圖中所示的示例性流體回路不一定包括了工作裝置中所使用的所有閥。根據所選擇的具體構造，工作裝置所使用的閥可以比所示的更少。

發明內容

在一個方面中，本發明提供用于使微流體裝置適于在核酸分析中重復使用的方法，所述方法通過a)通過泵送使核酸失活溶液流入所述裝置的微流體通道；并且隨后b)通過泵送使清洗溶液流入所述通道從而置換所述通道中的所述核酸失活溶液，由此使來自之前使用所述裝置的任何殘留核酸失活。在一個實施方案中，所述微流體裝置包含多個微流體反應室，其各自與所述微流體通道流體連接。在一個實施方案中，所述微流體反應室包含來自之前使用所述裝置的殘留核酸。