[發明專利]通過對隨機序列聚合物的組合物基于血清蛋白的檢測，改進含隨機序列聚合物的組合物的設計、生物利用度和效能的方法

無效

• 申請號: 201080052757.5
• 申請日: 2010-11-17
• 公開（公告）號: CN102869989A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: E·扎內利;J·克里格;J·康諾利;K·H·柯林斯
• 申請（專利權）人: 阿雷斯貿易股份有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;C07K4/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

相關申請

本申請要求2009年11月17日遞交的美國臨時申請No.61/281,470和2010年9月27日遞交的美國臨時申請No.61/386,909的優先權益。

背景技術

現有技術中已有檢測簡單多肽的方法。然而，由于受檢多肽的異質性，檢測一組多肽混合物而非具有明確氨基酸序列的一種多肽的有效血漿濃度方法很復雜。例如，含隨機序列聚合物(RSP)的組合物包括隨機摻入多肽鏈的氨基酸的復雜混合物。RSP組合物由氨基酸的特性和比例而不是特定序列決定。鑒于多肽的多樣性，需要對多種制造方法制備的這些RSP組合物的均一性和組成進行評估的改進方法。確定RSP組合物在體內的狀態具有重要的免疫學意義，因為取決于給藥途徑和/或給藥頻率及血清蛋白與RSP組合物的結合，這種肽混合物可能激發初級炎癥反應(TH1型)或初級調控反應(TH2型)，導致其在受試對象中的藥代動力學和藥效學改變。更加嚴謹的設計和堅持給予RSP組合物可能提高治療效果或者減少潛在的不良炎癥應答反應。

因此，為了治療目的，需要定量分析RSP組合物的方法，例如有助于評估這種肽混合物在體內的狀況和確定合適的劑量及給藥方式。

發明概述

本申請提供檢測和評價RSP組合物的改進的方法。本發明提供檢測和定量分析RSP組合物的方法。本發明提供基于肽亞組與特定捕獲多肽相互作用的測定，和富集RSP組合物中多肽亞組亞組的方法。本發明進一步提供對需要接受治療的患者給予RSP組合物的方法，其中可根據上述檢測和定量方法來確定或評估給藥方案和劑量。

本申請還提供檢測RSP組合物的方法，包括以下步驟：(a)將所述RSP組合物附著于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物與含蛋白質生物液體接觸；(c)鑒定特異性結合于(a)所述固相支持物的(b)所述的蛋白質；(d)獲得基本純的(c)所述結合蛋白產物；(e)將(c)所述蛋白質附著于定量檢測所述RSP組合物用的工具上；和(f)測定所述RSP組合物與(e)所述蛋白每一種的結合。

本說明書也提供一種改進RSP組合物設計的方法，包括以下步驟：(a)將所述RSP組合物附著于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物與含蛋白的生物液體接觸；(c)鑒定特異性結合于(a)所述固相支持物的(b)所述的蛋白質；(d)獲得基本純的(c)所述的結合蛋白產物；(e)使(c)所述蛋白質附著于定量檢測RSP組合物用的工具上；(f)測定所述RSP組合物與(e)所述蛋白質結合的每一種肽；(g)調整所述RSP組合物的設計以增加或減少與(e)所述一種或多種蛋白質的結合；(h)重復步驟(f)；(i)任選地重復步驟(f-h)，其中調整所述RSP組合物的設計可導致一種或多種效果：提高生物利用度、減少毒性和提高效能。

此外，本申請提供一種檢測RSP組合物中肽種類的方法，包括以下步驟：(a)將所述RSP組合物附著于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物與含蛋白的生物液體接觸；(c)鑒定特異性結合于(a)所述固相支持物的(b)所述的蛋白質；(d)獲得基本純的(c)所述結合蛋白制品；(e)使(c)所述蛋白質附著于固相支持物上；(f)使(e)所述固相支持物與所述RSP組合物接觸；(g)測定所述RSP組合物中每種肽與(f)所述固相支持物的結合。

另外，本申請提供一種改進RSP組合物中肽種類設計的方法，包括以下步驟：(a)使所述RSP組合物附著于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物與含蛋白的生物液體接觸；(c)鑒定特異性結合于(a)所述固相支持物的(b)所述蛋白質；(d)獲得基本純的(c)所述結合蛋白制品；(e)使(c)所述蛋白質附著于固相支持物上；(f)使(e)所述固相支持物與所述RSP組合物接觸；(g)測定所述RSP組合物中與(f)所述固相支持物結合的每一種肽；(h)調整所述RSP組合物的設計以增加或減少與(f)所述一種或多種蛋白質的結合；(i)重復步驟(g)；(j)任選地重復步驟(g-j)，其中調整所述RSP組合物肽種類的設計可導致一種或多種效果：提高生物利用度、減少毒性，和提高效能。

通過應用本申請所述方法，研究者不僅可以更可靠地檢測RSP組合物中的低含量組分，而且可以特異性地檢測RSP組合物中與生物活性如毒性或效力有關或對其有貢獻的肽種類。