[發明專利]調節去泛素化酶和泛素化多肽的方法和材料

無效

• 申請號: 201080051581.1
• 申請日: 2010-09-09
• 公開（公告）號: CN102625711A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 樓振昆;袁健
• 申請（專利權）人: 梅約醫學教育與研究基金會
• 主分類號: A61K38/16
• 分類號: A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7105;A61P35/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

相關應用的交叉參考

本申請要求2009年11月12日提交的美國臨時申請系列號61/260,637以及2009年9月10日提交的美國臨時申請系列號61/241,152的權益。在先申請的公開被認為是本申請公開的部分(且通過引用納入本文)。

背景技術

1.技術領域

本文涉及參與調節去泛素化酶和泛素化多肽(例如腫瘤抑制物如野生型p53多肽)的方法和材料。例如，本文涉及增加或降低去泛素化酶表達或活性的方法和材料，穩定或去穩定泛素化多肽的方法和材料，以及治療癌癥的方法和材料。

2.背景信息

p53是在超過50％的人癌癥中突變的腫瘤抑制物，其主要作用是細胞應激后調控細胞命運和抑制受傷細胞的增殖(Lane，1992；Riley等，2008；Vogelstein等，2000)。p53作為轉錄因子行使功能，并通過其靶標基因調節各種細胞功能，從細胞衰老到能量代謝、DNA修復、細胞分化、細胞周期進展和凋亡。除了激活轉錄，p53還用作轉錄的抑制物，其在抑制涉及腫瘤發生的蛋白CD44中也作用(Godar等，2008)。最后，p53還具有不依賴轉錄的功能，如通過蛋白之間的相互作用調控凋亡(Moll等，2005)。

發明內容

本文涉及參與調控去泛素化酶(如USP10多肽)和/或泛素化多肽(如，腫瘤抑制多肽或腫瘤抑制多肽的突變型)的方法和材料。例如，本文提供增加去泛素化酶(如USP10多肽)表達或活性的方法和材料，降低去泛素化酶(如USP10多肽)表達或活性的方法和材料，穩定腫瘤抑制多肽(如野生型p53多肽)的方法和材料，去穩定腫瘤抑制多肽突變型(如突變型p53多肽)的方法和材料以及減少癌細胞增殖、增加癌細胞凋亡和/或治療癌癥(如野生型p53多肽水平下降的癌癥或突變型p53多肽水平上升的癌癥)的方法和材料。本文還提供鑒定介導p53多肽穩定化的USP10的激動劑或拮抗劑的方法和材料。

一些癌細胞能表達低水平的p53多肽，而其他癌細胞能表達平均或高水平的p53多肽突變型。如本文所述，USP10多肽能與野生型或突變p53多肽相互作用并使之去泛素化，因此增加其穩定性。具有低水平野生型p53多肽的癌細胞的情況中，本文提供的方法和材料可用于增加USP10多肽表達或活性，從而增加所述野生型p53多肽的穩定性。這可使癌細胞中的野生型p53多肽水平升高，從而使癌細胞增殖減少并增加癌細胞凋亡。表達突變型p53多肽的癌細胞的情況中，本文提供的方法和材料可用于降低USP10多肽的表達或活性，從而降低所述突變型p53多肽的穩定性。這可使癌細胞的突變型p53多肽水平下降，從而使癌細胞增殖減少并增加癌細胞凋亡。

一般，本文一方面涉及降低有癌細胞的哺乳動物中癌細胞增殖的方法。所述方法包括或主要包括，將組合物在其調控癌細胞內的USP10多肽表達或活性的條件下給予所述哺乳動物，從而減少癌細胞增殖。所述癌細胞可具有降低水平的野生型p53多肽表達，且所述組合物可增加USP10多肽的表達或活性。所述組合物可包括編碼USP10多肽的核酸。所述組合物可包括編碼具有SEQ?ID?NO：2所示氨基酸序列的多肽的核酸。所述癌細胞可表達突變型p53多肽，且所述組合物可降低USP10多肽的表達或活性。所述組合物可包括介導p53多肽穩定的USP10多肽的拮抗劑。所述拮抗劑可包含具有誘發針對所述USP10多肽表達的RNA干擾能力的核酸。所述USP10多肽可為人USP10多肽。

在另一方面，本文涉及在哺乳動物中治療癌癥的方法。所述方法包括或主要包括(a)鑒定哺乳動物具有表達降低水平的野生型p53多肽或表達突變型p53多肽的癌細胞，(b)若所述哺乳動物鑒定為具有表達降低水平的野生型p53多肽的癌細胞，則給予增加所述癌細胞內USP10多肽表達或活性的USP10多肽或組合物，和(c)若所述哺乳動物鑒定為具有表達突變型p53多肽的癌細胞，則給予降低所述癌細胞內USP10多肽表達或活性的組合物。

在其他方面，本文涉及鑒定介導p53多肽穩定的USP10多肽的拮抗劑的方法。所述方法包括或主要包括，確定存在檢測劑時與USP10多肽接觸的泛素化p53多肽的穩定水平是否低于無檢測劑時與USP10多肽接觸的泛素化p53多肽的穩定水平，其中存在檢測劑時與USP10多肽接觸的泛素化p53多肽的穩定水平低于無檢測劑時與USP10多肽接觸的泛素化p53多肽的穩定水平表明所述檢測劑是拮抗劑。