[發明專利]用于哺乳動物來源的神經膠質限制性祖細胞的擴增、鑒定、表征和效能增強的方法和組合物

有效

• 申請號: 201080051269.2
• 申請日: 2010-11-09
• 公開（公告）號: CN102686721A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 羅伯特·桑德羅克;詹姆斯·T·坎帕內利;德波拉·A·埃普斯泰因
• 申請（專利權）人: Q醫療公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N13/00
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 張穎;樊衛民

1.一種用于制造哺乳動物神經膠質限制性祖細胞（GRP）的方法，所述方法包括：

（a）從能夠產生A2B5陽性細胞的哺乳動物組織源分離A2B5抗體反應性細胞；

（b）A2B5陽性細胞在基質上體外培養的天數（DIV）大于6天；以及

（c）收獲培養的細胞。

2.權利要求1的方法，其中A2B5抗體反應性細胞使用磁性活化細胞分選來分離。

3.權利要求2的方法，其中將細胞兩次以上通過包含磁珠的柱，以分離A2B5抗體反應性細胞。

4.權利要求1的方法，其中A2B5抗體反應性細胞使用熒光活化細胞分選或免疫淘選來分離。

5.權利要求4的方法，其中將細胞兩次以上通過熒光活化細胞分選或免疫淘選皿。

6.權利要求1的方法，其中將細胞培養10-20-DIV。

7.權利要求1的方法，其中將細胞培養15-20DIV。

8.權利要求1的方法，其中將細胞培養至少20DIV。

9.權利要求1的方法，其中將細胞培養100DIV以上。

10.一種用于制造哺乳動物神經膠質限制性祖細胞（GRP）的方法，所述方法包括：

（a）將哺乳動物神經組織解離成細胞懸液；

（b）分離A2B5抗體反應性細胞；

（c）A2B5陽性細胞在基質上體外培養的天數（DIV）大于6天；以及

（d）收獲培養的細胞。

11.權利要求10的方法，其中哺乳動物神經組織從神經管閉合后的哺乳動物中獲得。

12.權利要求10的方法，其中哺乳動物神經組織是胎兒尸體前腦組織、胎兒尸體脊髓組織、或哺乳動物活檢腦或脊髓組織。

13.權利要求10的方法，其中哺乳動物是人，并且神經組織是妊娠14至24周的胎兒尸體前腦組織。

14.權利要求10的方法，其中解離神經組織通過酶法進行。

15.權利要求10的方法，其中解離神經組織通過機械法進行。

16.權利要求10的方法，其中解離神經組織通過機械法和酶法進行。

17.權利要求10的方法，其中A2B5抗體反應性細胞使用磁性活化細胞分選來分離。

18.權利要求17的方法，其中將細胞兩次以上通過包含磁珠的柱來分離A2B5抗體反應性細胞。

19.權利要求10的方法，其中A2B5抗體反應性細胞使用熒光活化細胞分選或免疫淘選來分離。

20.權利要求19的方法，其中將細胞兩次以上通過熒光活化細胞分選或免疫淘選皿。

21.權利要求10的方法，其中將細胞培養10-20-DIV。

22.權利要求10的方法，其中將細胞培養15-20DIV。

23.權利要求10的方法，其中將細胞培養至少20DIV。

24.權利要求10的方法，其中將細胞培養100DIV以上。

25.一種用于減少GRP細胞群中可能不想要的細胞表型和/或降低GRP細胞群細胞中的標準偏差的方法，所述方法包括：

（a）從能夠產生A2B5陽性細胞的哺乳動物組織源中分離A2B5抗體反應性細胞，以及

（b）A2B5陽性細胞在基質上體外培養的天數（DIV）大于6天。

26.權利要求25的方法，其還包括將收獲的細胞冷凍和融化。

27.一種用于減少GRP細胞群中可能不想要的細胞表型和/或降低GRP細胞群細胞中的標準偏差的方法，所述方法包括：

（a）將哺乳動物神經組織解離成細胞懸液；

（b）分離A2B5抗體反應性細胞；

（c）A2B5陽性細胞在基質上體外培養的天數（DIV）大于6天；以及

（d）收獲培養的細胞。

28.權利要求25的方法，其還包括將收獲的細胞冷凍和融化。