[發明專利]病毒細胞嗜性的識別

有效

• 申請號: 201080050205.0
• 申請日: 2010-09-01
• 公開（公告）號: CN102812131A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 查爾斯-亨利·勒塞利耶;瓦萊麗·庫爾尼奧;曼努埃拉·布捷;迪亞娜·德康;吉勒·科蘭
• 申請（專利權）人: 國立科學研究中心;法國公立援助醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 李丙林;張英

1.一種用于識別微RNA或其靶mRNA的體外方法，在病毒為了進入細胞而利用細胞受體和至少一種細胞共受體感染所述細胞的過程中，根據病毒為了進入細胞所利用的細胞共受體對所述微RNA或其靶mRNA的表達進行特異性改變，所述方法包括：

i）在第一病毒利用第一共受體和至少一種其他病毒利用另一種共受體分別感染后，測定表達受體、第一共受體和至少一種其他共受體的待測細胞中的微RNA的表達水平；

ii）識別所述微RNA，相對于未感染細胞中的表達水平，在感染過程中所述微RNA的表達水平受到每種病毒的調節；

iii）比較由此識別的微RNA；

iv）選擇微RNA，其表達水平的改變對于共受體的利用是特異性的；

v）可選地識別由此選擇的微RNA的靶mRNA。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述待測細胞表達第一共受體和第二共受體，并且感染了為進入所述細胞而利用所述第一共受體的第一病毒和利用所述第二共受體的第二病毒。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述病毒為逆轉錄病毒。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其中，所述病毒為HIV病毒。

5.根據權利要求4所述的方法，其中，所述HIV病毒之一所利用的所述共受體選自由CXCR4、CCR5、CCR3、CCR2、CCR1、CCR4、CCR8、CCR9、CXCR2、STRL33、V28、gpr1、gpr15和ChemR23組成的組。

6.根據權利要求5所述的方法，其中，第一HIV病毒所利用的共受體為CXCR4，而第二HIV病毒所利用的共受體為CCR5。

7.根據權利要求4至6中任一項所述的方法，其中，所述待測細胞為Jurkat-CCR5細胞。

8.一種用于識別感染病毒的患者中的病毒所利用的細胞共受體的體外方法，所述病毒利用細胞受體和至少一種細胞共受體進入細胞，所述方法包括：

i）使可能包含病毒的患者樣本與待測細胞接觸，所述待測細胞表達所述病毒的細胞受體和所述病毒的至少一種細胞共受體；

ii）測定所述待測細胞中至少一種miRNA和/或miRNA的至少一種靶mRNA的表達水平；

iii）將所述表達水平與預定值進行比較；

iv）由此推斷所述病毒是否利用了由待測細胞表達的細胞共受體。

9.根據權利要求8所述的方法，其中，所述預定值為未感染的待測細胞中的miRNA或mRNA的表達水平。

10.根據權利要求8或9所述的方法，其中，所述病毒為HIV病毒，并且其中所述待測細胞表達細胞受體CD4。

11.根據權利要求10所述的方法，其中，所述待測細胞表達細胞共受體，所述細胞共受體選自由CXCR4、CCR5、CCR3、CCR2、CCR1、CCR4、CCR8、CCR9、CXCR2、STRL33、V28、gpr1、gpr15和ChemR23組成的組。

12.根據權利要求10所述的方法，其中，所述待測細胞表達CXCR4。

13.根據權利要求10至12中任一項所述的方法，其中，所述微RNA選自由hsa-miR574-5p、hsa-miR-663、hsa-miR-149*、hsa-miR-575、hsa-miR-638、hsa-miR-181b、hsa-let-7g、hsa-miR-30a、hsa-miR-148a和hsa-miR-9*組成的組。

14.根據權利要求13所述的方法，其中，選自包括hsa-miR574-5p、hsa-miR-663、hsa-miR-149*、hsa-miR-575、hsa-miR-638的組中的至少一種微RNA的表達升高或選自包括hsa-miR-181b、hsa-let-7g、hsa-miR-30a、hsa-miR-148a和hsa-miR-9*的組中的至少一種微RNA的表達降低表明CXCR4是HIV病毒所利用的共受體。

15.根據權利要求8至14中任一項所述的方法，其中，通過RT-PCR或借助于微芯片來測量微RNA的表達水平或mRNA的量。

16.根據權利要求10至15中任一項所述的方法，其中，所述待測細胞選自由Jurkat細胞和Jurkat-CCR5細胞組成的組。