[發(fā)明專(zhuān)利]用于凝膠電泳、成像和分析的方法、裝置、系統(tǒng)和材料

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201080046350.1
• 申請(qǐng)日: 2010-08-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102656448A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-09-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蒂默斯·瓦勒·阿普蒂克;保羅·普瑞德基;伊萬(wàn)杰琳·高恩薩勒茲;蘭德?tīng)枴ぢ?/a>;塔德·地卡特·西蒙斯
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 生命技術(shù)公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N27/447
• 分類(lèi)號(hào): G01N27/447;C25B15/02
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11204
• 代理人: 王達(dá)佐;洪欣

引用的相關(guān)申請(qǐng)

本發(fā)明主張于2009年8月26日、2009年8月26日、2009年8月25日和2009年8月24日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/237,287、61/237,195、61/236,795和61/236,293的權(quán)益，其全部?jī)?nèi)容通過(guò)援引并入本申請(qǐng)。

發(fā)明領(lǐng)域

本公開(kāi)通常涉及用于進(jìn)行電泳的系統(tǒng)。本公開(kāi)還涉及能在電泳期間同時(shí)對(duì)凝膠成像的電泳系統(tǒng)。本公開(kāi)另外還涉及能在電泳期間或之后分析成像的凝膠的電泳系統(tǒng)。

發(fā)明背景

凝膠電泳是分離諸如DNA、RNA、多肽和蛋白質(zhì)等生物分子的一般步驟。在凝膠電泳中，根據(jù)施加電場(chǎng)引起的穿過(guò)過(guò)濾凝膠的遷移率將分子分成條帶。可使用裝入玻璃管或夾于玻璃板或塑料板之間作為平板的凝膠。凝膠具有開(kāi)放式分子網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，其界定充滿(mǎn)導(dǎo)電性緩沖鹽溶液的孔隙。這些孔隙大到足以容許遷移高分子穿過(guò)凝膠。

聚丙烯酰胺凝膠通常用于電泳。適合電泳的其他凝膠包括瓊脂糖凝膠和淀粉凝膠。聚丙烯酰胺凝膠電泳(或PAGE)較為普及，因?yàn)檫@些凝膠光學(xué)透明、電中性并且可制成具有一系列孔徑。眾所周知制備聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法。參見(jiàn)例如B.Hames?andD.Rickwood，Gel?Electrophoresis?of?Proteins(蛋白質(zhì)凝膠電泳)(第二版，Oxford?University?Press，1986)以及A.Andrews，Electrophoresis(電泳)(第二版，Oxford?University?Press，1986)。通常，制備含有丙烯酰胺單體、諸如雙丙烯酰胺的交聯(lián)劑、凝膠緩沖液以及諸如十二烷基硫酸鈉(SDS)的改性劑的儲(chǔ)備溶液。在需要凝膠前可貯存這些儲(chǔ)備溶液。為制備凝膠，按照所希望的各種成分的最終濃度，將儲(chǔ)備溶液與水成比例混合。將凝膠放置在與緩沖溶液接觸的槽(chamber)內(nèi)，所述緩沖溶液使凝膠與電源的陰極或陽(yáng)極之間形成電接觸。將含有高分子和示蹤染料的樣品放置于凝膠頂部。向凝膠施加電勢(shì)，使樣品高分子與示蹤染料向凝膠的底部遷移。在示蹤染料到達(dá)凝膠端部之前停止電泳。

通過(guò)將高分子在樣品染色裝置內(nèi)染色并在分離成像裝置內(nèi)將凝膠成像來(lái)測(cè)定分離的高分子條帶的位置。通常，為了檢查結(jié)果并確認(rèn)各條帶的位置，必須操控從成像設(shè)備所得的圖像。通過(guò)將具體條帶的移動(dòng)距離與示蹤染料與高分子的已知遷移率作對(duì)比，可測(cè)定其他高分子的遷移率。因此，可計(jì)算高分子的大小。現(xiàn)有電泳的方法需要多個(gè)費(fèi)時(shí)步驟以及多件大型設(shè)備來(lái)進(jìn)行電泳、凝膠染色、成像以及圖像處理與分析。在現(xiàn)有技術(shù)中需要更好的凝膠電泳方法、裝置、系統(tǒng)和材料。

發(fā)明概述

本申請(qǐng)所述的方法、裝置、系統(tǒng)和材料通過(guò)提供進(jìn)行凝膠處理、圖像捕獲和圖像分析中的至少之一的凝膠電泳裝置來(lái)滿(mǎn)足這些需要，從而與現(xiàn)有用于電泳的儀器與方法相比，除了其他方面，還減少了進(jìn)行電泳的時(shí)間，降低了儀器成本且減少了儀器足跡。

根據(jù)本教導(dǎo)的各種實(shí)施方案，提供的凝膠電泳裝置可包括凝膠處理系統(tǒng)、凝膠照射系統(tǒng)、圖像捕獲系統(tǒng)和圖像分析系統(tǒng)中的至少之一。本教導(dǎo)還提供一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立系統(tǒng)或其組合。在某些實(shí)施方案中，凝膠處理裝置可包括凝膠處理系統(tǒng)、凝膠照射系統(tǒng)、圖像捕獲系統(tǒng)和圖像分析系統(tǒng)。在某些實(shí)施方案中，凝膠處理裝置可包括一個(gè)或多個(gè)凝膠緩沖液池、兩個(gè)或更多個(gè)凝膠緩沖液池、一個(gè)或多個(gè)凝膠支架(gel?holder)或兩個(gè)或更多個(gè)凝膠支架。在某些實(shí)施方案中，凝膠處理裝置可包括一個(gè)或多個(gè)成像系統(tǒng)。在某些實(shí)施方案中，所述凝膠處理裝置可包括一個(gè)或多個(gè)圖像捕獲系統(tǒng)。在某些實(shí)施方案中，所述凝膠處理裝置可包括一個(gè)或多個(gè)圖像分析系統(tǒng)。在某些實(shí)施方案中，所述凝膠處理裝置可包括一個(gè)或多個(gè)處理器。在某些實(shí)施方案中，所述凝膠處理裝置可包括用于處理和/或分析凝膠，包括但不限于耦合、凈化和隔離的任何其他適合部件，或包括用于凝膠下游處理的任何其他部件。