[發明專利]人血清淀粉樣蛋白A3抗體及其應用

無效

• 申請號: 201080045530.8
• 申請日: 2010-08-16
• 公開（公告）號: CN102549014A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 丸義朗;田中建志;寺井清美
• 申請（專利權）人: 學校法人東京女子醫科大學
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/04;C07K16/46;G01N33/53;C12N15/09;C12P21/08
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 丁香蘭;龐東成

技術領域

本發明涉及人血清淀粉樣蛋白A3抗體及其應用，更詳細而言，涉及人血清淀粉樣蛋白A3抗體、上述抗體的制造方法、利用上述抗體檢測和測定人血清淀粉樣蛋白A3的方法、癌治療方法、癌診斷方法等。

背景技術

已知血清淀粉樣蛋白A(SAA)是因繼發性淀粉樣變性而在組織中沉積的淀粉樣蛋白A蛋白在血中的前體。

在小鼠、兔、馬等中，已知該SAA具有SAA1、SAA2、SAA3和SAA4這4種同型。

這些SAA中，SAA1和SAA2是與白細胞介素(IL)-1、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)等炎性細胞因子應答的急性時相反應物質，SAA4是高比重脂蛋白(HDL)的構成蛋白。

另一方面，已知SAA3被Toll樣受體4(TLR4)識別，介由核因子κB(NFκB)活化免疫應答信號，結果促進了癌的轉移；并且確認到，若對皮下移植了癌細胞的荷瘤小鼠給予抗SAA3抗體，則該一系列的信號轉導通路(S100A8-SAA3-TLR4)被截斷，抑制了癌的轉移。TLR4識別作為自然免疫體系的受體的脂多糖(LPS)等毒素，負責感染的防御。這暗示了由本來負責感染防御的自然免疫體系所形成的炎癥樣的環境促進了癌細胞的遷移(非專利文獻1)。如此，暗示了在小鼠中SAA3與癌的轉移有關。

另外，由與小鼠等的SAA3的氨基酸序列的同源性等推測，人的SAA3由序列號1表示的氨基酸序列構成(專利文獻1)。但是，現實中僅以mRNA水平確認了人SAA3的存在，實際上并沒有確認到人生物體內的蛋白表達。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特表2006-516194號公報

非專利文獻

非專利文獻1：Sachie?Hiratsuka，Akira?Watanabe，Yoshiko?Sakurai，Sachiko?Akashi-Takamura，Sachie?Ishibashi，Kensuke?Miyake，Masabumi?Shibuya，Shizuo?Akira，Hiroyuki?Aburatani?and?Yoshiro?Maru.Nature?Cell?Bioll?101349-1355(2008).

發明內容

發明要解決的課題

因此，本發明的課題在于制作尚未確認在人生物體內存在的人SAA3的抗體，解明在人生物體內存在人SAA3，同時解明人SAA3與疾病的關系，提供該疾病的治療方法。

用于解決課題的方案

基于上述見解，本發明人試圖根據常規方法在大腸桿菌中表達人SAA3的重組蛋白，以此作為抗原來制作抗體，并從人樣本中檢測人SAA3，從而解明人SAA3的存在。但是，人SAA3的重組蛋白的表達量極少，沒能以此作為抗原進行免疫。并且，本發明人根據抗體制作的常規方法，在將由人SAA3的特征性氨基酸序列(序列號1表示的人SAA3的氨基酸序列的第49～60位)構成的肽與生物體高分子的結合物為抗原的情況下，即使免疫幾個月，抗體效價也幾乎不上升，無法得到令人滿意的抗體。

于是本發明人發現，通過將包含比人SAA3的特征性氨基酸序列稍長的人SAA3的部分氨基酸序列的肽與生物體高分子的結合物作為抗原，所免疫的動物的抗體產生能力提高，從而首次得到了針對人SAA3的抗體。

并且使用該人SAA3抗體對健康者和癌癥患者的樣本進行了蛋白質印跡，結果僅在癌癥患者的樣品中檢測到與人SAA3抗體的反應物。另外，上述反應物在凝膠上的位置跟上述人SAA3的重組蛋白與人SAA3抗體的反應物的位置相同，因此可知在人生物體內存在人SAA3。

由此發現，在人生物體內確實存在人SAA3，能夠用針對人SAA3的抗體對其進行檢測，并且人SAA3與癌有關，基于該發現完成了本發明。

即，本發明如下所述。

(1)一種針對人血清淀粉樣蛋白A3的人血清淀粉樣蛋白A3抗體。

(2)一種人血清淀粉樣蛋白A3抗體的制造方法，其特征在于，作為部分氨基酸序列，使包含序列號1表示的人血清淀粉樣蛋白A3的氨基酸序列的第48～60位的肽與生物體高分子化合物結合，用該結合物使動物免疫，從該動物采集抗體。

(3)一種人血清淀粉樣蛋白A3的檢測和測定方法，其特征在于，使人血清淀粉樣蛋白A3抗體作用于人樣本，檢測和測定人樣本中的人血清淀粉樣蛋白A3。

(4)一種癌診斷方法，其特征在于，使人血清淀粉樣蛋白A3抗體作用于人樣本，檢測和測定人樣本中的人血清淀粉樣蛋白A3。