[發(fā)明專利]利用CTK7A抑制組蛋白乙酰轉移酶及其方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201080045291.6
• 申請日: 2010-09-06
• 公開（公告）號: CN102575236A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設計）人: 塔帕斯·庫馬爾·孔杜;穆罕默德·阿里夫;肯佩高拉·芒特蘭古;戈皮納特·科達加納·斯里尼瓦薩查爾
• 申請（專利權）人: 賈瓦哈拉爾尼赫魯高級科學研究中心
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;G01N33/53;A61K31/415;A61K38/45;A61P35/02
• 代理公司: 北京康信知識產(chǎn)權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 李丙林;張英

技術領域

本公開涉及通過姜黃素衍生物，特別是CTK7A用于抑制組蛋白乙酰轉移酶的方法。本公開也涉及p300自動乙?；T導的識別及其由CTK7A的抑制。本公開也涉及NPM1與GAPDH過度表達的誘導和相應的組蛋白高度乙?；捌浞椒?。

背景技術

口腔癌是人類癌癥的最常見類型之一，世界范圍內年發(fā)病率是274,000例¹。煙草使用和酒精攝入是口腔癌發(fā)生的主要危險因素。然而，煙草致癌物質和酒精誘導口腔癌中上皮細胞的轉化和惡性發(fā)展的確切機制未被很好理解²。過去的十年已經(jīng)看到顯示染色質結構-功能在一些疾病表現(xiàn)中的關鍵作用的快速增加的證據(jù)^3，4。從遺傳變異和/或一組更多樣化的基因外改變(后生變化，epigenetic?changes)可引起疾病發(fā)病機制的事實看，這是顯而易見的^{3，4，5-10}。染色質作為動態(tài)實體在像轉錄、修復和復制等所有細胞核相關的現(xiàn)象中起關鍵性作用^11-12。染色質的翻譯后修飾在保持染色質結構-功能中發(fā)揮重要作用，且因此調控基因表達、細胞生長和分化。已顯示細胞轉錄狀態(tài)的干擾能夠導致發(fā)育缺陷¹³。此外，也已經(jīng)顯示不同染色質組分的功能障礙和組蛋白的共價修飾能夠引起疾病發(fā)病機制^{3，4，13，14}。

可逆的組蛋白乙?；潜缓芎妹枋龅谋碛^遺傳修飾之一，且由組蛋白乙酰轉移酶(HAT)和組蛋白去乙?；?HDAC)催化，其影響組蛋白和非-組蛋白蛋白質的乙?；?，從而在下游生物學功能中起顯著作用^16，17。改變的HAT和HDAC活性現(xiàn)在已知在包括癌癥在內的一些疾病中發(fā)揮重要作用^{7-9，15，18，19}。該組蛋白乙酰轉移酶，p300是整體轉錄輔助激活因子且是細胞中主要HAT²⁰。高水平的p300已經(jīng)在一些腫瘤中被觀察到^21，22。此外，p300乙酰轉移酶中的突變在原發(fā)腫瘤和細胞系中被發(fā)現(xiàn)²³。相似地，p300位點異質性的喪失與結腸直腸、乳腺癌及與腦癌(成膠質細胞瘤)有關^19，23。雖然這些數(shù)據(jù)表明CBP、p300和PCAF基因的參與，但是這些乙酰轉移酶的HAT活性沒有作為惡性腫瘤的起因被確認¹⁹。最近，不同癌癥中組蛋白修飾的改變已經(jīng)被報道。H4的賴氨酸16乙?；瘑适Ш唾嚢彼?0甲基化被發(fā)現(xiàn)與原發(fā)腫瘤和腫瘤細胞系有關⁵。在另一項研究中，癌細胞組蛋白修飾的大量改變被發(fā)現(xiàn)可預測臨床出現(xiàn)前列腺癌⁷。然而，一個罕見的例外，組蛋白的高度乙?；呀?jīng)在肝細胞癌中被觀察²⁴。除了癌癥之外，賴氨酸乙酰轉移酶的功能障礙已經(jīng)在其它疾病中被涉及：炎癥過程、亨廷頓病、心臟病、糖尿病和AIDS^25-28。這些觀察顯示乙酰轉移酶的特定和相關的無毒抑制劑能夠被認為是新一代治療劑，特別地，用于癌癥。最近，一些HAT抑制劑已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)^15，29，其已經(jīng)顯示在癌癥、HIV和心臟病中具有潛在的臨床作用^26，30-32。然而，HAT抑制劑在癌癥表現(xiàn)中的效果仍未被測試。

癌癥以高增殖細胞為標記，其已經(jīng)避開了細胞的凋亡機制且因此具有抗凋亡細胞的過度表達。NPM1(也被稱為B23)³³和GAPDH^34，35是那些已知在很多癌癥中被頻繁上調的基因中的兩個。這兩種蛋白被認為是細胞增殖的正調節(jié)物。

發(fā)明內容

因此，本公開涉及一種通過4-(3，5-二(3-甲氧基-5-氧化苯乙烯)-4，5-二氫-1H-吡唑-1-基)苯甲酸鈉(CTK7A)抑制組蛋白乙酰轉移酶(HAT)的方法，所述方法包括用CTK7A孵育HAT的步驟；一種識別口腔鱗狀細胞癌中組蛋白高度乙?；姆椒?，所述方法包括步驟：(a)從KB細胞中分離組蛋白并用抗乙?；疕3抗體對該組蛋白進行免疫組織化學分析，以及(b)進行免疫印跡來識別口腔鱗狀細胞癌中組蛋白的高度乙?；?；一種治療癌癥的方法，所述方法包括將治療上可接受量的CTK7A，可選地連同藥學上可接受的賦形劑一起給予需要其的對象的步驟；