[發明專利]丙型肝炎病毒疫苗組合物

無效

• 申請號: 201080045134.5
• 申請日: 2010-09-30
• 公開（公告）號: CN102596244A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 脅田隆字;森山正樹;赤澤大輔;中村紀子
• 申請（專利權）人: 東麗株式會社;日本國立感染癥研究所;財團法人東京都醫學綜合研究所
• 主分類號: A61K39/29
• 分類號: A61K39/29;A61K9/16;A61K39/39;A61K47/02;A61K47/34;A61P1/16;A61P31/12;A61P37/04;C07K14/18;C07K19/00;C12N7/04;C12N15/09
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 孔青;郭文潔

技術領域

本發明涉及丙型肝炎病毒疫苗組合物。

背景技術

丙型肝炎病毒(Hepatitis?C?virus；下文有時簡稱“HCV”)是作為非甲非乙型肝炎的主要致病病毒被發現的(非專利文獻1)。HCV是具有約9.6kb的單股正鏈RNA作為基因組的RNA病毒，該基因組編碼翻譯后由來自宿主的信號肽酶或來自HCV的蛋白酶切割為10種病毒蛋白(核心、E1、E2、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A及NS5B)的前體蛋白。其中，核心、E1、E2及p7蛋白被分類為結構蛋白，NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A及NS5B蛋白被分類為非結構蛋白。HCV還根據基因組核苷酸序列的不同，被分類為10種以上的基因型(例如1a、1b、2a、2b、3a及3b)(非專利文獻2～4)，可通過HCV抗體檢測、HCV核心抗原檢測或者核酸擴增檢測來判定基因型。

已知HCV通過血液由人傳染給人，感染者約60～80％引起慢性肝炎，在不實施適當治療置之不理的情況下，感染后約20～30年左右引起肝硬化或肝癌。因此，希望早期檢測出HCV的感染，以預防慢性肝炎的發病，同時希望發病后進行早期治療。

作為丙型肝炎的主要治療方法，干擾素的單獨給予或者干擾素與利巴韋林的聯合療法是很普遍的，但最近明確，干擾素的治療效果因HCV基因型的不同而有著較大的差異，對基因型為1a或1b的HCV難以發揮作用(非專利文獻5和6)。而且，即使在干擾素的效果被認為較好的基因型為2a的HCV與2b的HCV之間，也逐漸明確干擾素的抗病毒作用的強度存在差異，并且暗示與2b的HCV相比，對2a的HCV的作用更強(非專利文獻7)。

因此，希望開發出一種HCV疫苗，其能預防感染HCV后尚未發生慢性肝炎的病毒攜帶者發生慢性肝炎，或者在慢性肝炎發病后增強自身免疫而排除HCV。

然而，獲得具有感染性的HCV顆粒(下文有時簡稱“感染性HCV顆粒”)和測試HCV的感染抑制效果較為困難，同時，找出增強發揮感染抑制效果所必需的體液免疫和細胞免疫的佐劑與抗原的組合也較為困難，因此尚未開發出具有足夠感染抑制活性的HCV疫苗組合物。

一般來說，佐劑根據物理性質，可以分為粒狀佐劑和非粒狀佐劑。

粒狀佐劑可舉例如：鋁鹽、油包水型乳劑、水包油型乳劑、免疫刺激復合物、脂質體以及納米和微粒子，單獨與抗原混合使用的情況居多。其中，氫氧化鋁(下文有時簡稱“Alum”)作為炎性低的佐劑用于醫藥用途。然而，已知Alum在與抗原效價為中位至低位的抗原組合時，不能增強發揮感染抑制效果所必需的體液免疫和細胞免疫，不適合用作佐劑。

另一方面，非粒狀佐劑可舉例如：胞壁酰二肽(由分枝桿菌提取的肽聚糖的佐劑活性成分)、非離子性嵌段共聚物、皂角苷(從Quillaja?saponaria樹的樹皮提取的三萜系化合物的復合混合物)、脂質A(帶有長度一般為C12～C16的5個或6個脂肪酸鏈和2個磷酸根(phosphate?radicals)的葡糖胺的二糖類)、細胞因子、核酸、碳水化合物聚合體、衍生化多糖類以及細菌毒素(例如霍亂毒素和大腸桿菌熱不穩定毒素)，和粒狀佐劑并用的情況居多。

作為被用作佐劑的核酸，含有未經甲基化修飾的CpG二核苷酸基序(motif)的寡脫氧核苷酸(下文有時簡稱“CpG-ODN”)(非專利文獻8)和雙股RNA(下文有時簡稱“dsRNA”)是已知的。

據報導，在CpG-ODN中，含有由6堿基回文結構基序構成的CpG基序的CpG-ODN誘導強的細胞毒活性，其中5’-AACGTT-3’、5’-AGCGCT-3’以及5’-GACGTC-3’這三個序列特別強地誘導細胞毒活性(非專利文獻9)。現在，明確了CpG-ODN是TLR9的配體，并且判明了CpG-ODN通過活化TLR9來誘導免疫應答。

代表性的dsRNA可舉例如：多核糖肌苷酸(polyI)和多核糖胞苷酸(polyC)雜交而獲得的多核糖肌苷酸-多核糖胞苷酸(下稱“polyI:C”)，還已知polyI:C與聚L賴氨酸、羧甲基纖維素的復合體polyICLC(非專利文獻10)；以及polyI:C的C部分被U取代的polyI:PolyC12U(其中，每12個C被1個U取代)為毒性少的dsRNA(非專利文獻11)。已經明確polyI:C為I型干擾素的誘導劑，并且為TLR3的配體。