[發明專利]通過抑制針對腫瘤壞死因子受體2(TNFR2)的天然反義轉錄物來治療TNFR2相關的疾病

有效

• 申請號: 201080038294.7
• 申請日: 2010-06-24
• 公開（公告）號: CN102597238A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: J·科拉德;O·霍爾科瓦謝爾曼
• 申請（專利權）人: 歐科庫爾納有限責任公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;C12N15/12;C07K14/715;A61K48/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李進;劉健

發明領域

本申請要求保護提交于2009年6月24日的美國臨時專利申請第61/219,911號的優先權，所述申請通過引用以其整體結合于本文中。

本發明的實施方案包括調節TNFR2和相關分子的表達和/或功能的寡核苷酸。

發明背景

DNA-RNA和RNA-RNA雜交對于核酸功能的許多方面(包括DNA復制、轉錄和翻譯)而言為重要的。雜交對于探測特定核酸或者改變其表達的各種技術而言亦為主要的。反義核苷酸例如通過與靶RNA雜交來擾亂基因表達，從而干擾RNA剪接、轉錄、翻譯和復制。反義DNA具有附加的特征，該特征為DNA-RNA雜合體充當核糖核酸酶H消化的底物，該活性存在于大多數細胞類型中。可將反義分子遞送到細胞中，這與寡脫氧核苷酸(ODN)的情況一樣，或者它們如RNA分子一樣可由內源基因表達。FDA最近批準了一種反義藥物，VITRAVENE^TM(用于治療巨細胞病毒視網膜炎)，這反映了反義物具有治療應用。

發明概述

提供本概述以呈現本發明的概述，從而簡要地指出本發明的性質和實質。在理解以下的情況下提出本概述：其不會用于解釋或限制權利要求的范圍或含義。

在一個實施方案中，本發明提供通過使用靶定天然反義轉錄物的任何區域的反義寡核苷酸來抑制天然反義轉錄物的作用，引起相應有義基因的增量調節的方法。本文也考慮天然反義轉錄物的抑制可通過siRNA、核酶和小分子來達到，認為所述siRNA、核酶和小分子在本發明的范圍之內。

一個實施方案提供在體內或體外調節患者細胞或組織中的TNFR2多核苷酸的功能和/或表達的方法，所述方法包括使所述細胞或組織與長度為5-30個核苷酸的反義寡核苷酸接觸，其中所述寡核苷酸與以下多核苷酸的反向互補序列具有至少50％的序列同一性，所述多核苷酸包含在SEQ?ID?NO：2的核苷酸1-413和SEQ?ID?NO：3的核苷酸1-413之內的5-30個連續核苷酸；從而在體內或體外調節患者細胞或組織中TNFR2多核苷酸的功能和/或表達。

在另一個優選的實施方案中，寡核苷酸靶定TNFR2多核苷酸的天然反義序列，例如SEQ?ID?NO：2和3所述的核苷酸，以及其任何變體、等位基因、同源物、突變體、衍生物、片段和互補序列。反義寡核苷酸的實例如SEQ?ID?NO：4-10所述。

另一個實施方案提供在體內或體外調節患者細胞或組織中TNFR2多核苷酸的功能和/或表達的方法，所述方法包括使所述細胞或組織長度為5-30個核苷酸的反義寡核苷酸接觸，其中所述寡核苷酸與TNFR2多核苷酸的反義物的反向互補序列具有至少50％的序列同一性；從而在體內或體外調節患者細胞或組織中TNFR2多核苷酸的功能和/或表達。

另一個實施方案提供在體內或體外調節患者細胞或組織中TNFR2多核苷酸的功能和/或表達的方法，所述方法包括使所述細胞或組織與長度為5-30個核苷酸的反義寡核苷酸接觸，其中所述寡核苷酸與TNFR2反義多核苷酸的反義寡核苷酸具有至少50％的序列同一性；從而在體內或體外調節患者細胞或組織中TNFR2多核苷酸的功能和/或表達。

在優選的實施方案中，組合物包含一種或多種與有義和/或反義TNFR2多核苷酸結合的反義寡核苷酸。

在另一個優選的實施方案中，所述寡核苷酸包含一個或多個經修飾或取代的核苷酸。

在另一個優選的實施方案中，所述寡核苷酸包含一個或多個經修飾的鍵。

在又一個實施方案中，所述修飾核苷酸包含經修飾的堿基，其包括硫代磷酸酯、甲基膦酸酯、肽核酸、2’-O-甲基、氟-或碳、亞甲基或其他鎖定核酸(LNA)分子。優選地，所述修飾核苷酸為鎖定核酸分子，包括α-L-LNA。

在另一個優選的實施方案中，將所述寡核苷酸經皮下、肌內、靜脈內或腹膜內施用給患者。

在另一個優選的實施方案中，將所述寡核苷酸在藥物組合物中施用。治療方案包括至少一次給患者施用反義化合物；然而，可將此治療修改成在一段時間內包含多個劑量。所述治療可與一種或多種其它類型的療法組合。

在另一個優選的實施方案中，將所述寡核苷酸封裝到脂質體中或附著于載體分子(例如膽固醇、TAT肽)。

其它方面描述于下文。

附圖簡述