[發明專利]用于診斷阿茲海默氏病的過程和方法

無效

• 申請號: 201080034150.4
• 申請日: 2010-07-30
• 公開（公告）號: CN102597260A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 里奇·愛因斯坦;周魏因;帕斯卡·伯德萊
• 申請（專利權）人: 埃克森海特股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 張穎;樊衛民

本申請涉及用于在哺乳動物、特別是人類中檢測阿茲海默氏病的方法和組合物。最值得注意的是，本申請描述了阿茲海默氏病的血清標志物及其在診斷方法中的應用。本申請還涉及用于實施所述方法的工具和/或試劑盒（試劑、探針、引物、抗體、陣列或芯片、細胞等）及其制備和應用。本發明可用于在哺乳動物中、包括在疾病的早期階段中（包括在出現癥狀前或AD前階段時）檢測阿茲海默氏病的存在或進展。?

阿茲海默氏病是癡呆的主要原因，并且是最常見的神經變性疾病。這種漸進性發展的疾病，以記憶喪失和語言、定向和判斷能力的降低為特征。通常與衰老相關的生理問題相混淆的癥狀的性質、它們的嚴重性以及它們出現的年齡，因人而異。這造成了這種疾病早期階段診斷的困難。?

對患有這種疾病的患者的腦進行的檢查，揭示了在記憶的重要區域海馬中，以及參與推理、語言和記憶的大腦皮層中神經元的喪失。膽堿能神經元尤其受到這種減少的影響。?

在阿茲海默氏病患者的腦中觀察到的另一個主要異常是細胞內和細胞外蛋白質聚集體的積累。細胞內τ蛋白的神經原纖維聚集體似乎與癡呆的嚴重性極為相關。由β-淀粉樣肽的細胞內和細胞外聚集所形成的老年性斑塊，是神經元和神經膠質細胞受到影響的區域的特征。?

然而，值得注意的是，這些聚集區域并不對應于認知功能降低特征性的突觸減少的位點。?

對家族性疾病形式進行的遺傳學研究顯示，4個基因與疾病的發生相關：APP（淀粉樣前體蛋白；β-淀粉樣肽的前體）、早老蛋白1和2（PS?1和PS2）以及載脂蛋白E（ApoE）。盡管這些基因中的每個的突變或多態性能夠引起β-淀粉樣肽生產的增加，但對控制突觸和神經元喪失的機制仍然了解得很少。就此而言，幾種假說和機制似乎并存，由此暗示了各種現象：?

1涉及神經元和神經膠質細胞的純粹腦現象：?

-氧化脅迫，其最引人注目的是可以由β-淀粉樣肽誘導并受到膽甾醇代謝的調節；?

-鈣流的變化和興奮毒性。?

2炎性和免疫反應現象；?

3性激素的變化；?

4甲狀腺機能減退和胰島素信號傳導調控中的缺陷。?

因此，阿茲海默氏病以整合體內平衡控制的各種系統的變化以及引起涉及免疫系統的炎性反應和內分泌調節的變化兩者的對某些神經元的攻擊為特征。后者反過來對其他神經元的活性和生存力以及免疫功能有影響，這些級聯反應強調了不僅神經變性、而且激素調節和免疫應答也在阿茲海默氏病的發展中發揮作用。?

目前，沒有阿茲海默氏病的強有力和特異性的特征物、尤其是來自血樣的特征物可用于建立這種疾病、尤其是疾病的各種不同階段的診斷。提供特別是疾病早期階段的有效的診斷測試，將能使患者從疾病發作時進行治療，從而獲益于更有效和更定制的治療，特別是在最佳條件下通過乙酰膽堿酯酶抑制劑例如加蘭他敏、多奈哌齊和利伐斯的明進行治療。?

本發明提供了對這種需求的響應。具體來說，本發明描述了用于阿茲海默氏病的血清標志物的鑒定，所述標志物能夠開發這種疾病的存在、嚴重性或發展或者發生這種疾病的風險的有效和預測性的診斷?方法。因此，本發明描述了在患有阿茲海默氏病的患者的血液中鑒定特異性或偏好性表達的分子特征物，尤其是從經歷了可選剪接的某些基因的復合表達產生的分子特征物。最引人注目的是，本發明描述了序列SEQ?ID?NOS.:1-1754的鑒定，所述序列存在于來自人類對象的血細胞的基因或RNA中，并且其單獨或組合時是阿茲海默氏病所特有的。因此，本發明提供了根據在對象血液中測量一種或多種基因的表達來診斷、預測和/或監測阿茲海默氏病的進展的工具和方法。這些基因表達中解調控的存在，被用于在對象中確立（或證實）阿茲海默氏病的存在。?

因此，本發明的一個目的在于（體外或離體）檢測或證實哺乳動物中阿茲海默氏病的存在的方法，所述方法包含在來自哺乳動物的生物樣品、優選在血液（源于血液的）樣品中確定一個或多個基因或RNA的表達變化的存在，所述基因或RNA包含選自SEQ?ID?NOS.:1-1754的序列，其中這種變化的存在指示了該哺乳動物中阿茲海默氏病的存在或發生阿茲海默氏病的風險。?

本發明的另一個目的涉及評估或監測對阿茲海默氏病治療的響應的方法，所述方法包含在治療前和/或治療期間測量包含選自SEQ?ID?NOS.:1至1754的序列的一個或優選幾個基因或RNA的表達，以及將如此測量到的表達與治療前或治療較早階段時測量到的表達進行比較的步驟，其中所述表達的變化指示了對治療的響應。?