[發明專利]抗革蘭氏陰性菌劑

無效

• 申請號: 201080026464.X
• 申請日: 2010-06-16
• 公開（公告）號: CN102481369A
• 公開（公告）日: 2012-05-30
• 發明（設計）人: 良原榮策;光永滋樹;豬子英俊
• 申請（專利權）人: 東海大學
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K38/00;A61K45/06;A61P31/04
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 熊玉蘭;高旭軼

技術領域

本發明涉及對革蘭氏陰性菌感染病的預防/治療有效的藥劑。更具體而言，涉及可以通過抑制存在于革蘭氏陰性菌的外膜中的YaeT復合體的形成，對革蘭氏陰性菌發揮殺菌作用、增殖抑制作用和/或藥劑排出抑制作用的藥劑。

背景技術

多藥耐性的綠膿桿菌（Pseudomonas　aeruginosa）和鮑氏不動桿菌（Acinetobacter　baumannii）等革蘭氏陰性菌是醫院內感染病的主要病原菌，有時對免疫力低下的患者引起嚴重的病態。由于這些細菌表現出多藥耐性，其感染病難以治療，并成為大的問題。革蘭氏陰性菌具備內膜和外膜這2層膜，抗生素為了有效作用，必須通過革蘭氏陰性菌的復雜的膜結構到達細胞內部。然而，考慮由于藥劑修飾酶、外膜的通透性低下、靶的變化、藥劑排出泵對藥劑的排出，抗生素的效果低下，獲得多藥耐性。

多藥排出泵對綠膿桿菌獲得多藥耐性具有重大貢獻。該泵利用能量將進入細菌內部的藥劑主動運輸、排出到細胞外。多藥排出泵分為幾個家族，其中，已知排出多種抗生素的RND（耐藥結節分化）家族的泵由3種亞基組成。綠膿桿菌中存在多數的RND型泵，其中主要的泵是MexAB-OprM泵。

本發明人著眼于綠膿桿菌的MexAB-OprM泵，開發出通過改變構成該多藥排出泵的亞基OprM的氨基酸序列而抑制綠膿桿菌的藥劑排出泵功能并增強抗生素藥效的方法，并提出了發揮所述效果的藥劑和篩選所述藥劑的方法（專利文獻1）。然而，靶序列中一旦發生突變，則所述方法可能失效。

另一方面，對包括綠膿桿菌和大腸桿菌等的革蘭氏陰性菌的研究正在進展中，已知YaeT復合體是β-桶狀蛋白（形成外膜的孔的蛋白質）生物合成所必需的（非專利文獻1），并且也闡明了所述YaeT復合體的立體結構（非專利文獻2）。YaeT通過與YfgL、YfiO、NlpB和SmpA的4個蛋白質形成復合體而負責外膜蛋白質（OMP）的生物合成。換言之，認為如果抑制YaeT復合體的形成，則可以阻止包括藥劑排出泵的OMP向外膜的運輸。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：國際公開第WO2007/091395號小冊子。

非專利文獻

非專利文獻1：Seokhee?Kim等，Science，第317卷，第961-964頁（2007）

非專利文獻2：Rajeev?Misra，ACS?Chemical?Biology，第2卷，第649-651頁（2007）。

發明內容

發明要解決的課題

考慮到上述情況，本發明提供了通過抑制革蘭氏陰性菌的外膜中的YaeT復合體的形成，阻斷對細菌生存必需的外膜蛋白質（OMP）的運輸的方法，及用于該方法的藥劑，其目的是從根本上解決革蘭氏陰性菌的多藥耐性的問題。

解決課題的手段

因此，本發明提供了抗革蘭氏陰性菌劑，其特征是通過抑制YaeT復合體的形成，對革蘭氏陰性菌發揮殺菌作用、增殖抑制作用和/或藥劑排出抑制作用。

發明的效果

根據本發明，由于在存在和/或不存在傳統的抗生素的情況下抑制革蘭氏陰性菌的YaeT復合體形成并由此對革蘭氏陰性菌發揮殺菌作用、增殖抑制作用和/或藥劑排出抑制作用，因此從根本上解決了外膜蛋白質突變引起的多藥耐性的問題。

附圖說明

圖1：說明革蘭氏陰性菌的外膜和內膜以及YaeT復合體與外膜蛋白質之間的關系的模式圖（引用自非專利文獻1）。

圖2：比較各種革蘭氏陰性菌的YfgL與YaeT的結合部位的氨基酸序列的圖。

圖3：比較各種革蘭氏陰性菌的YfiO的保守區域的氨基酸序列的圖。

圖4：顯示LTLR和LTLR-NH₂對PAO1株的殺菌作用的濃度依賴性的圖。

圖5：在存在及不存在LTLR-NH₂（5?mM）的情況下，nalB株對OFLX的易感性變化的圖。

圖6：在存在及不存在LTLR-NH₂（5?mM）的情況下，nalB株對AZT的易感性變化的圖。

圖7：在存在及不存在FIRL-NH₂（1.5?mM）的情況下，nalB株對OFLX的易感性變化的圖。

圖8：顯示在角膜潰瘍模型（實施例7）中細菌數變化的圖。

圖9：顯示在角膜潰瘍模型（實施例7）中12小時后角膜外觀的照片。

圖10：顯示在角膜潰瘍模型（實施例7）中24小時后角膜外觀的照片。