[發明專利]用于治療急性骨髓性白血病的方法

無效

• 申請號: 201080017701.6
• 申請日: 2010-04-22
• 公開（公告）號: CN102421899A
• 公開（公告）日: 2012-04-18
• 發明（設計）人: 鮑伯·洛溫伯格;莫耶卡·拉夫倫契奇;彼得·雅各布斯·馬里亞·瓦爾克;孫旭明
• 申請（專利權）人: 鹿特丹伊拉斯姆斯大學醫療中心
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;A61K31/7088;A61P35/02
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 張穎;樊衛民

發明領域

本發明屬于分子醫學領域，并提供了用于治療急性骨髓性白血病的方法。這些方法是基于microRNA-9和/或microRNA-9*(microRNA-9/9*)參與疾病的發病機理這一觀察，因為microRNA-9/9*的過表達在體外阻斷髓系分化。更具體來說，發現在急性骨髓性白血病中，microRNA-9/9*在白血病轉化中發揮作用。

發明背景

急性骨髓性白血病(AML)是顯著非均質的惡性腫瘤疾病，其特征為被阻斷在不同發育階段的造血祖細胞不受控制的克隆增生。變化的臨床生物學和預后主要由體細胞遺傳學畸變例如t(15；17)、t(8；21)、inv(16)、11q23、3q26畸變和單染色體核型(1-3)以及各種基因突變所決定。突出的實例是核仁磷酸蛋白-1(NPM1)、fms樣酪氨酸激酶受體(FLT3內部串聯復制(ITD))和CCAAT結合性轉錄因子CEBPA中的突變(4-7)。這些獲得性遺傳畸變可能共存，并被認為在白血病的發生中協同合作。

AML的發病機理是影響細胞分化、增殖和凋亡的多步驟過程，其最終導致造血祖細胞的惡性轉化。發病機理的概念認為，白血病轉化需要至少兩個、在大多數情況下可能需要多個事件存在。一類遺傳畸變(1類)導致增殖性信號傳導的組成性活化，并包括信號傳導分子例如RAS、FLT3和c-KIT。第二種類型的病變(2類)，例如作為染色體病變t(8；21)或inv(16)的結果而形成涉及轉錄因子的融合基因，導致阻斷了髓系分化。在小鼠模型中進行的各項研究確定了兩種類型的遺傳去調控在AML發生中的協同作用。

關于AML中異常表達的基因存在大量信息。通常，AML及其臨床亞類的診斷是基于被合稱為分類物的基因表達情況分布圖。

最近已經證實，AML中的microRNA表達情況分析也揭示出非常獨特的microRNA表達情況分布圖(8)。

MicroRNA是一類小的非編碼RNA，其在轉錄后水平上調控基因表達(9)。它們通過與mRNA的3’非翻譯區(3’UTR)中的序列形成堿基對，從而抑制翻譯或誘導它們的靶mRNA轉錄本的降解，來調控基因表達。到目前為止，在人類中已描述了超過400種microRNA；然而，這些調控性非編碼RNA的確切功能仍有許多不明之處。

差異表達的microRNA似乎確定了特定AML基因型的特征。幾種已確定的致瘤和腫瘤抑制性microRNA例如microRNA-155、microRNA-21和let-7，似乎與AML的特定遺傳亞型相關(8)。

Lu等(10)顯示了microRNA基因活性模式可以辨別幾種類型的人類癌癥。他們在一種新的、基于珠子的流式細胞術microRNA表達情況分析方法中，測量了217個編碼microRNA的基因的活性。因此，microRNA特征能夠對癌癥進行分類。該發現可以允許確定產生癌癥的原始組織類型，并根據原始組織類型靶向治療過程。Lu等觀察到在腫瘤中與正常組織相比，microRNA普遍下調。

此外，他們能夠使用microRNA表達情況分布圖成功分類分化不良的腫瘤，而信使RNA表達情況分布圖在應用于相同樣品時極不準確。這些發現突出了microRNA表達情況分析在癌癥診斷中的潛力。

最近的研究顯示出microRNA表達特征與AML的(細胞)遺傳學子集之間的關聯(8，11，12)。此外，已證實，包含microRNA-233、-128a、-128b和let7b的microRNA表達特征能夠準確地將AML與急性成淋巴細胞白血病ALL區分開(13)。

在一項AML研究中，microRNA-191和-199a的表達增加與不良的存活率相關(12)。

鑒定到了對不利預后具有預測性的細胞遺傳學正常的AML的microRNA特征(14)。

另一項研究顯示，在實體和血液腫瘤兩者中，let-7/miR-98簇通常被下調，而microRNA-21、microRNA-155、microRNA-181b、microRNA-221和microRNA-222經常被上調(15)。

Chen及其同事(16)首先從正常小鼠的骨髓中克隆了microRNA，并發現microRNA-223、-142和-181優選表達在造血組織中。發現microRNA-233以低水平表達在CD34+造血祖細胞(HPC)中，并且在朝向粒細胞的髓系分化過程中，該表達增加。