[發明專利]用于表征關節炎疾患的組合物和方法

有效

• 申請號: 201080017586.2
• 申請日: 2010-03-11
• 公開（公告）號: CN102414563A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發明（設計）人: A·馬羅塔
• 申請（專利權）人: 奧古雷克斯生命科學公司
• 主分類號: G01N33/564
• 分類號: G01N33/564;G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李程達

領域

本文描述了針對14-3-3的自身抗體和利用所述物質來評價關節炎疾患的方法。

背景

關節炎，或關節痛，一般是指人體關節的炎癥性疾病，通常伴有疼痛、腫脹和僵硬。關節炎可由多種原因的任何原因造成，包括感染、創傷、退行性疾病、代謝紊亂或干擾或其它未知病因。骨關節炎(OA)是一種非炎癥性關節炎的常見形式，可能在關節創傷后發生，在關節感染后發生，或僅僅是衰老的結果。骨關節炎也稱為退行性關節病。類風濕性關節炎(RA)傳統上被認為是一種導致免疫系統攻擊關節的慢性、炎癥性自身免疫性疾病。它是一種使人傷殘和痛苦的炎癥狀態，由于疼痛和關節破壞，可導致基本喪失活動性。強直性脊柱炎(AS)是一種慢性、痛苦的、退行性炎癥性關節炎，主要影響脊椎及骶髂關節，從而引起脊柱的最終融合。

人體以關節連接的關節稱為滑膜關節，每個滑膜關節通常包括兩個相鄰骨的相對末端。骨骼的兩端包裹在軟骨組織中，而整個關節區域被包裹在稱為滑膜的保護性軟組織中，其包括滑液膜。滑液膜產生并釋放入關節腔內的潤滑滑液。在正常關節中，滑液的體積相當小。除了潤滑功能以外，滑液還充當溶質和幾種駐留單核細胞和滑膜細胞的儲庫。

滑液可響應于認為促進關節炎的許多刺激而變得被刺激和增厚，所述刺激包括關節創傷和/或人體免疫系統故障。這種刺激的結果包括過量產生和釋放滑液入關節，從而導致關節區域內和周圍腫脹。體積增加通常伴隨著滑液中以下物質的濃度增加：成纖維細胞樣滑膜細胞(FLS細胞)、促炎性細胞因子諸如白介素-1(IL-1)和腫瘤壞死因子(TNF-α)、組胺蛋白和肽、以及降解性酶諸如基質金屬蛋白酶(MMP)。FLS細胞構成正常滑液中滑膜細胞的約三分之二，具有明確定義的分泌系統，在創傷或炎癥條件下通常分泌大量MMP入滑液，特別是MMP-1、3、8、9、10、11和13。認為MMP-1和MMP-3在軟骨和包含關節的其下的骨組織的進行性結構損傷中具有顯著的作用。活化FLS細胞產生MMP-1和MMP-3的已知因子包括IL-1和TNF-α。

RA、AS和OA的引發因素目前是未明確定義的。然而，已知與疾病進展相關的生理事件，從關節中過量滑液積累引起的長期腫脹和炎癥，到經由降解性酶活性對軟骨和其下的骨組織的降解和劣化，以及伴隨的FLS細胞增殖到骨中(這導致永久性結構損傷)。如果足夠早地檢測，可以適當的物理和醫學治療逆轉或至少最小化疾病的潛在長期有害作用。因此，相當多的努力放在對用于早期鑒定關節炎的適當的生物標志物的鑒定。為此目的，Kilani等(2007，J.Rheum.34：1650-1657；WO?2007/128132)已經報道，14-3-3蛋白家族的兩個成員，尤其是14-3-3η和14-3-3γ，存在于關節炎患者的滑液和血清中，且這些同種型與滑液和血清中MMP-1和MMP-3的水平直接相關。

概述

本發明涉及以下發現：生物樣品中針對14-3-3蛋白的自身抗體的存在與關節炎疾患的診斷和/或預后有關聯。這種自身抗體與關節炎疾患之間強的關聯允許通過測定來自受治療者的生物樣品中針對至少一種14-3-3蛋白或其片段的自身抗體或與至少一種14-3-3蛋白或其片段的免疫復合體來診斷和/或預后關節炎疾患。在優選實施方案中，14-3-3蛋白包含η和/或γ同種型。

因此，本文描述了用于評價和/或表征哺乳動物受治療者的關節炎疾患的方法，包括將來自受治療者的生物樣品與至少一種14-3-3蛋白或其片段接觸，并檢測針對14-3-3蛋白或其片段的自身抗體，其中針對所述至少一種14-3-3蛋白或其片段的自身抗體的存在/量指示受治療者中關節炎疾患的存在和/或狀態。本文還提供了用于評價和/或表征哺乳動物受治療者的關節炎疾患的方法，包括檢測來自受治療者的生物樣品中自身抗體與至少一種14-3-3蛋白的循環免疫復合體，其中樣品中現存免疫復合體的存在/量指示受治療者中關節炎疾患的存在和/或狀態。

14-3-3蛋白或其片段可包含多個14-3-3蛋白同種型共有的表位，或可包含一個或一組14-3-3蛋白同種型特有的表位。在優選實施方案中，14-3-3蛋白或其片段包含14-3-3η和/或γ表位。在一個實施方案中，14-3-3蛋白或其片段包含至少一種其它14-3-3同種型如14-3-3γ共有的14-3-3η表位。在另一個實施方案中，14-3-3η表位是14-3-3η特有的。