[發明專利]新型溶血磷脂酰基轉移酶

有效

• 申請號: 201080015945.0
• 申請日: 2010-03-25
• 公開（公告）號: CN102388137A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 落合美佐
• 申請（專利權）人: 三得利控股株式會社
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;A23L1/30;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/10;C12N15/09
• 代理公司: 上海市華誠律師事務所 31210
• 代理人: 徐申民;侯莉

技術領域

本發明涉及新型溶血磷脂酰基轉移酶。

背景技術

高不飽和脂肪酸的生物合成

脂肪酸是構成磷脂質、三酰基甘油等脂質的重要成分，含有2個以上不飽和鍵的脂肪酸總稱為高不飽和脂肪酸(PUFA)，已知有花生四烯酸、二高γ-亞麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等，并已報道了各種生理活性(非專利文獻1)。

雖然期待該高不飽和脂肪酸在各種領域中的應用，其中也包括了在動物體內不能合成的物質。因此，開發出了通過培養各種微生物來獲得高不飽和脂肪酸的方法。并且，也進行了用植物生產高不飽和脂肪酸的嘗試。在這種情況下，已知高不飽和脂肪酸例如作為三酰基甘油等儲存脂質的構成成分，可在微生物的菌體內或植物種子中積累。

花生四烯酸是高不飽和脂肪酸中的一種，其作為形成前列腺素、白三烯等的中間代謝物受到關注，已進行了大量將其應用于功能性食品、醫藥品的原料的嘗試。進而因為花生四烯酸在母乳中含有，對嬰兒的發育，特別是胎兒的身高、腦的發育很重要，所以作為嬰兒發育的必要成分，從營養學的觀點來看與DHA(二十二碳六烯酸)共同受到關注。

花生四烯酸用圖1所示的路徑進行生物合成。具體來說，由通過新型脂肪酸合成而生成的棕櫚酸經過數次鏈延長反應和去飽和反應而生成花生四烯酸。已知在該路徑中，鏈延長酶及Δ9去飽和酶對酰基輔酶A進行作用。此外，Δ12去飽和酶、Δ6去飽和酶、Δ5去飽和酶對卵磷脂等磷脂質的酰基進行作用(非專利文獻2)。因此，在花生四烯酸等的PUFA的生物合成中，酰基必須可在酰基輔酶A與磷脂質之間轉移。并不限于PUFA的生物合成，將在生物合成磷脂質后僅改變脂肪酸稱為磷脂質的“改制(remodeling)”，已知溶血磷脂酰基轉移酶(以下記為“LPLAT”)參與了該反應(非專利文獻3)。

三酰基甘油的生物合成

作為儲存脂質的三酰基甘油在生物體內如下述方式合成。即：甘油-3-磷酸在甘油-3-磷酸酰基轉移酶(以下有時記為“GPAT”)的作用下，1位(α位)的羥基發生酰化從而生成溶血磷脂酸(以下有時記為“LPA”)。LPA是僅具有1個酰基的溶血磷脂質，其被溶血磷脂酸酰基轉移酶(以下有時記為“LPAAT”)酰化從而生成磷脂酸(以下有時記為“PA”)。該PA被磷脂酸磷酸酯酶脫磷酸化生成二酰基甘油，該二酰基甘油被二酰基甘油酰基轉移酶(以下有時記為“DGAT”)酰化生成三酰基甘油。此外，已知酰基輔酶A：膽固醇酰基轉移酶(以下有時記為“ACAT”)、溶血卵磷脂酰基轉移酶(以下有時記為“LPCAT”)等間接參與三酰基甘油的生物合成。

磷脂質的生物合成

如上所述在LPAAT的作用下由LPA生成的PA成為各種磷脂質生物合成的前體。例如由PA可以生物合成磷脂酰乙醇胺(PE)、卵磷脂(PC)、磷脂酰絲氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰甘油(PG)等重要的磷脂質。PA不僅是這樣生物合成脂質的中間體，而且是具有細胞增殖、血小板凝聚效果、平滑肌收縮效果、促進癌浸潤效果等非常多的生物學、藥理學的作用的脂質性細胞內及細胞間的介質。

溶血磷脂酰基轉移酶

如上所述，認為LPLAT參與PUFA的生物合成。該LPLAT是具有將酰基導入溶血磷脂質上的活性的酶的總稱，根據對于底物的特異性的不同，也就是說根據作為底物的溶血磷脂質的分子種類的不同，存在各種稱呼的LPLAT。其中1個是以LPA為底物的參與三酰基甘油、磷脂質的合成的LPAAT。LPLAT所作用的溶血磷脂質中此外還包括溶血卵磷脂(LPC)、溶血磷脂酰絲氨酸(LPS)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、溶血磷脂酰肌醇(LPI)等。因此，從各種酶所作用的磷脂質的分子種類的不同來看，稱為LPAAT、LPCAT、溶血磷脂酰絲氨酸酰基轉移酶(LPSAT)、溶血磷脂酰肌醇酰基轉移酶(LPIAT)等。有時各種酶對1種溶血磷脂質進行特異性作用，但有時也對多種特異性溶血磷脂質進行作用。例如在被稱為LPAAT的LPLAT中，不僅對LPA，也包括對LPC、LPE等進行作用的酶。

根據序列特征對溶血磷脂酰基轉移酶的分類