[發明專利]腎病相關的生物標記

有效

• 申請號: 201080005754.6
• 申請日: 2010-01-27
• 公開（公告）號: CN102300875A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 曾錙翎;呂靜芳;林微雅;徐采薇;葉亞平;陳怡婷;楊垂勛
• 申請（專利權）人: 財團法人工業技術研究院
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;G01N33/493;G01N33/53;G01N33/543;G01N33/566;G01N33/68;C07K14/705;C40B30/00;G01N27/00
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 封新琴

相關申請

本申請要求2009年1月28日提交的美國臨時申請No.61/147785的優先權，將其內容通過提述以其整體并入本文。

發明背景

腎病(nephropathy)，一般已知為糖尿病、高血壓、藥物毒性，與發炎所引起之腎損傷(kidney?damage)。

腎病通常藉由測定蛋白尿(proteinuria)(例如尿白蛋白(urine?albumin)的水平)的水平或藉由檢查腎功能指標-腎小球過濾率(glomerular?filtration?rate，GFR)，來進行診斷。但目前早期腎病無法顯示癥狀供此兩種方法偵測早期腎病。雖然可根據腎組織切片來偵測腎病，但此侵入式方法并非理想的診斷方式。

研發偵測早期腎病的方法非常重要。達成此目標之關鍵點在于鑒定出與初期腎病相關的可靠生物標記。

發明內容

本發明為根據意想不到地發現白細胞相關免疫球蛋白樣受體-2(leukocyte-associated?Ig-like?receptor-2)、α-1酸性醣蛋白(alpha-1acid?glycoprotein)和這兩種蛋白質的片段在尿液內的水平，在腎病(nephropathy)患者中顯著高于無腎病的患者。這些蛋白質分子因而為早期腎病的診斷的可靠生物標記。

因此，本發明特征之一為腎病診斷的方法。此方法至少包括下列步驟：(a)自被懷疑具有腎病的個體取得尿液樣本，(b)測定該尿液樣本中生物標記的水平，與(c)根據該生物標記的水平評估是否該個體具有腎病。于先前所敘述的方法中使用的生物標記為下列之一：(i)白細胞相關免疫球蛋白樣受體-2或其具有至少十個氨基酸的片段，如DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP(SEQ?ID?NO：1)，(ii)具有至少十個氨基酸的α-1酸性醣蛋白的片段，如GQEHFAHLLILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGL?S(SEQ?ID?NO：2)，(iii)(i)與(ii)的組合，或(iv)(i)與α-1酸性醣蛋白的組合。當四個生物標記之一的水平高于無腎病個體，則可指出該個體具有腎病。在一實施例中，生物標記水平透過質譜分析(例如，基質輔助激光解吸電離質譜(Matrix-assisted?laser?desorption/ionization-mass?spectrometry，MALDI-MS)、液相層析質譜(liquid?chromatography-mass?spectrometry，LC-MS)，與液相層析串聯質譜(liquid?chromatography-mass?spectrometry/mass?spectrometry，LC-MS/MS))來測定。在另一實施例中，透過免疫分析(例如，酶聯免疫吸附分析(enzyme-link?immunosorbent?assay，ELISA)、Western印跡(Westernblot)、放射免疫分析(radioimmunoassay，RIA)、熒光免疫分析(fluorescence?immunoassay，FIA)與冷光免疫分析(luminescence?immunoassay，LIA))來測定。

上述腎病診斷方法可應用于人與實驗動物兩者，例如沒有蛋白尿(proteinuria)的那些。此使用之術語“實驗動物”意指一般使用于動物測試的脊椎動物，例如，小鼠、大鼠、兔、貓、狗、豬，與非人靈長類動物。

本發明之另一特征為一種可于個體中監測腎病的發展的方法。此方法包括(a)自罹患腎病的個體(例如，人或實驗動物)取得第一尿液樣本，(b)測定于該第一尿液樣本中上列四個生物標記之一的水平，(c)在取得該第一尿液樣本后2周至12個月自該個體取得第二尿液樣本，(d)測定于該第二尿液樣本中該生物標記的水平，與(e)評估該個體中腎病的發展。該第二尿液樣本中該生物標記的水平較該第一尿液樣本中增加，可指出該個體中的腎病惡化。當個體為患有早期腎病的人，該第二尿液樣本在該第一尿液樣本后6至12個月取得。對于晚期腎病的人類個體，該第二尿液樣本在該第一尿液樣本后3至6個月取得。當此方法應用于實驗動物時，該第二尿液樣本在該第一尿液樣本后2至24周取得。

于又另一特征中，本發明提供一種監測腎病患者中腎病治療的功效的方法，包括(a)測定在治療前于來自該腎病患者的尿液樣本中上列生物標記之一的水平，(b)測定在治療后于來自該患者的尿液樣本中該生物標記的水平，與(c)根據在治療后該生物標記的水平的變化評估該治療的功效。與治療前之生物標記水平相較，當生物標記于治療后之水平維持相同或下降時，判定該治療為有效的。