[實用新型]一種快速定量檢測糖化血紅蛋白免疫層析試紙條

有效

• 申請號: 201020651495.1
• 申請日: 2010-12-10
• 公開（公告）號: CN201886026U
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發明（設計）人: 王保寧;劉東澤;唐涪嘉;劉廷勇;包德全
• 申請（專利權）人: 四川邁克生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/72
• 分類號: G01N33/72
• 代理公司: 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 51220
• 代理人: 梁田

技術領域

本實用新型屬于免疫化學檢測領域，具體來說，涉及一種快速定量檢測糖化血紅蛋白的免疫層析試紙條。

背景技術

全球糖尿病（DM）患病率很高，目前DM的發病率仍呈不斷的上升趨勢，是嚴重威脅人類健康的世界性公共衛生問題，DM的防治一直是醫學研究的熱點和難點。傳統的DM診斷和監測采用空腹血糖（FBG），餐后血糖（PBG）和口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）等，但是血糖儀的監測數據僅代表抽血時的瞬間糖水平，而糖化血紅蛋白（GHb）作為反映長期血糖水平的金標準，也是監測DM的重要指標。

GHb是指由血紅蛋白和葡萄糖通過非酶促的緩慢不可逆結合而成的一種Hb組分。GHb的合成率與血液中的葡萄糖濃度呈直接比例。紅細胞的平均壽命是120天左右，所以血液中的GHb的水平代表了120天來的平均水平。HBAlc作為GHb的一種亞型，是GHb各組分中最具有代表性的，同時也是目前研究最為廣泛的。

1980年，HBAlc已經成為DM常規臨床監測項目，一直作為反映長期血糖水平的金標準和DM并發癥的風險監測指標，應用于臨床和科研工作中。

臨床實驗室常用的HBAlc分析方法分為兩大類：

⑴基于HBAlc和非HBAlc所帶電荷不同，包括陽離子交換層析法、電泳法和等電位聚焦法：陽離子交換層析法利用能交換離子的材料為固定相來分離離子型化合物。該方法批內和批間變異系數（CV）均小于3%，檢測結果不受所存在的變異性Hb及其衍生物和各種共存干擾物的影響，精密度好，性能穩定，并且檢測快速。缺點是需要昂貴的設備和專業的技術人員，不能實現現場檢測。

⑵基于GHb基團結構不同，包括親和層析法和免疫學方法:親和層析法中應用最多的是硼酸親和層析法。使用一種水溶性藍色硼酸衍生物，總Hb包括與硼酸結合的Hb沉淀，并被據記載過濾層，通過雙波長發射比色分析系統進行測定，結果直接以HBAlc百分數表示。這種方法簡便、快捷、其CV僅3％，線性范圍可達20％，與其他已確認的分析方法相比具有良好的相關性。其缺點依然是不能實現現場檢測。

最近，國際臨床化學聯盟（IFCC）建立了一種通過質譜分析特異性檢測HBAlc分子濃度的新方法。首先用生理鹽水清洗紅細胞，然后去除醛亞胺，用水使紅細胞溶解，其溶血產物經內蛋白酶作用獲得HBAlc和HBAO的N端6肽，經反相液相色譜分離，最后用電噴霧電離質譜法測定。這種方法操作復雜、費時、花費大、不能用于臨床常規檢測，僅限于HBAlc測定的標準化。

目前糖化血紅蛋白的定量檢測的有膠體金定量、放射性免疫和化學發光定量試劑，而采用免疫層析技術定量檢測糖化血紅蛋白的裝置，卻未見報道。

基于光電效應的膠體金定量免疫層析技術，由于只能檢測硝酸纖維素膜表面的膠體金顆粒的光線，不能真實反應檢測線上免疫顆粒的總量，硝酸纖維素膜表面也因其本身材質具有不均勻性，因此用膠體金實現定量檢測具有一定的局限性。放射性免疫具有對環境和人體的輻射危害，目前已經逐漸淡出歷史舞臺。而化學發光試劑盒由于設備昂貴、不能現場快速的實現檢測。

實用新型內容

本實用新型所要解決的技術問題是提供一種快速定量檢測糖化血紅蛋白免疫層析試紙條，使用這種試紙條時，只需要微量的全血樣本，即可在15分鐘內實現定量檢測糖化血紅蛋白的含量，大大提高了篩查的速度，靈敏度高、特異性好；并且該試紙條結構簡單，易于標準化生產。

本實用新型解決上述問題所采用的技術方案是：一種快速定量檢測糖化血紅蛋白免疫層析試紙條，包括底板、樣品墊、示蹤粒子結合墊、固相反應膜和吸水墊，所述樣品墊、示蹤粒子結合墊、固相反應膜和吸水墊以水平方向順序相接方式依次固定在底板上，并且所述示蹤粒子結合墊設有超順磁顆粒或熒光顆粒標記的糖化血紅蛋白單克隆抗體吸附層；所述固相反應膜上設有糖化血紅蛋白單克隆抗體構成的第一檢測線和羊抗鼠IgG多克隆抗體構成的質控線。

所述固相反應膜上還設有血紅蛋白單克隆抗體構成的第二檢測線。

進一步的技術方案，本實用新型還包括盒體，所述底板置于盒體內，并且所述盒體盒面上對應于固相反應膜的位置設有觀察窗，對應于樣品墊的位置設有加樣孔。

所述底板材料為不吸水的硬質塑料或硬紙片。

所述樣品墊為玻璃纖維膜材質或者聚酯膜材質。

所述超順磁顆粒為氨基化超順磁顆粒、羧基化超順磁納米顆粒和羥基化順磁納米顆粒中的一種。

所述熒光顆粒為異硫氰酸熒光素、藻紅蛋白、多甲藻黃素葉綠素蛋白、碘化丙啶和別藻青蛋白中的一種。