[實用新型]一種免疫熒光試紙條

有效

• 申請號: 201020650783.5
• 申請日: 2010-12-09
• 公開（公告）號: CN202049158U
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: 尹煥才;唐玉國;王弼陡
• 申請（專利權）人: 蘇州生物醫學工程技術研究所
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/52
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

技術領域

本實用新型主要涉及熒光免疫層析檢測領域，屬于干化學檢測方法的一種，具體的涉及一種免疫熒光試紙條。

背景技術

熒光免疫分析技術是在標記免疫技術中逐漸發展起來的一種基于抗原-抗體反應的分析技術。其誕生的早期，一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。終于由Coons等，于1941年首次將熒光素進行用于抗體的標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescent?antibody?technique)。

使用熒光免疫分析技術可以用來檢測抗原，也可用來檢測抗體。其中用于檢測抗原的方法較為常用，通常稱為熒光抗體法。將抗體進行熒光標記后用于檢查細胞或組織內抗原或半抗原物質等方法稱為免疫熒光細胞(或組織)化學技術。

與傳統的酶聯免疫吸附(ELISA)法不同，應用熒光免疫分析技術進行檢測時，其信號特異性強、敏感性高、速度較快，特別適合于體外快速診斷領域。雖然也存在非特異性染色等方面的不足。但隨著優質抗體的制備成功，特別是特異性更高的基因工程抗體、單鏈抗體等的出現，其不足方面得到了良好的改善。并且，試劑安全無毒，對環境和操作者損傷小等，因此，受到越來越多臨床檢驗工作者的青睞。

干化學分析法是指與傳統溶液分析相對而言的，即將所需分析試劑全部固化在多層復合膜上，分析時只需要將少量待檢樣品(幾微升)加在膜上即可進行定性或定量分析。

免疫層析技術在廣義上講，也屬于干化學的一種。使用硝酸纖維素膜等作為反應物支撐的載體，利用膜的孔隙效應進行反應。該技術可分為縱向擴散和橫向擴散兩種。早期誕生的是縱向擴散的斑點金雜交法，但終因其操作復雜未能成為主流試劑推廣使用。隨著膜技術的發展，側向流橫向擴散試紙條顯示出良好的優勢，并得到極大的推廣。側向流免疫層析技術中應用最廣泛的膠體金快速診斷試紙，用于早早孕(HCG)的檢測。由于其方便、快捷、特異性高，特別適合即時診斷，因此，其應用十分廣泛，成為側向流免疫層析技術中的代表性產品。然而，該類產品往往僅能用于樣品的初篩，其主要缺點是檢測靈敏度較低，只能用于定性測量或者半定量測量，雖然通過一定的儀器也可以對顯色條帶的深淺進行判讀，但仍然無法進行定量測量。并且檢測的結果不易記錄和保存。

實用新型內容

為了克服現有技術中的不足，本實用新型的目的在于提供一種免疫熒光試紙條，使用本實用新型可以實現對各種血清標志物、微生物抗原、病毒顆粒、違禁藥品等生物大分子或小分子的定量檢測，并且可以實現單一項目或多個項目的聯合檢測。本實用新型的另一個目的在于提供一種免疫熒光試紙條的定量檢測方法。

為了解決上述技術問題，實現上述目的，本實用新型通過如下技術方案實現：

一種免疫熒光試紙條，由依次設置在外殼上相互搭接的樣品墊、反應膜和吸收墊組成，所述反應膜上固定有一條內部質控帶，至少一條的檢測帶和一條過量抗原檢測帶，其中內部質控帶固定有定量的抗原或抗體物質，檢測帶固定有可與待測物質特異性結合的抗體，過量抗原檢測帶固定有二抗。

優選地，所述外殼的材料可以是ABS、PS、PE、PVC或PC中的任意一種。

優選地，所述樣品墊的材料可以是纖維素、玻璃纖維或紡織聚合物中的任意一種。

優選地，所述反應膜的材料可以是硝酸纖維素膜、醋酸纖維素膜、尼龍膜或聚四氟乙烯膜中的任意一種。

優選地，吸收墊可以是纖維素、玻璃纖維素或纖維素玻璃纖維素混合體中的任意一種。

一種免疫熒光試紙條定量檢測方法，包括以下步驟：

步驟1.將含有目標檢測物的液體加入到熒光反應試劑中，并反應1min；

步驟2.取定量已反應試劑滴加于本實用新型的免疫熒光試紙條的樣品墊(2)上，進行免疫反應，所述定量已反應試劑的取值夠參加免疫反應即可；

步驟3.反應3min后，將其置于一熒光分析檢測器上，對熒光信號的強度進行讀取。

進一步的，所述熒光反應試劑的內部包含兩種或多種用于定量的標記抗體，標記抗體的熒光物質可以為直接熒光染料、乳膠顆粒、量子點或磁性納米顆粒中的任意一種可以產生熒光的物質。

本實用新型在檢測試紙條時，可使用激光、鹵鎢燈+單色器或高功率LED作為光源，激發試紙條上的熒光物質發出熒光。

本實用新型中熒光信號的讀取裝置可使用光電二極管、CCD或光電倍增管對信號進行讀取。