[實用新型]檢測β-內酰胺酶的試劑盒

有效

• 申請號: 201020579035.2
• 申請日: 2010-10-21
• 公開（公告）號: CN201852842U
• 公開（公告）日: 2011-06-01
• 發明（設計）人: 何方洋;萬宇平;馮才偉;馮靜;汪善良;羅曉琴;何麗霞;趙正苗;馮才茂;崔海峰;李勇;王建霞
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型涉及一種檢測β-內酰胺酶的試劑盒，特別是檢測牛奶中β-內酰胺酶的試劑盒。?

背景技術

隨著人們生活水平的提高，動物源食品中的藥物殘留日益受到國際社會的重視。β-內酰胺類抗生素作為發現最早、用量最多的一類抗生素，在牛乳及動物組織中殘留檢出報道最多。β-內酰胺類抗生素是指化學結構中含有β-內酰胺環的一類抗生素，主要包括青霉素類和頭孢菌素類，其作用特點是能夠抑制細菌黏肽轉肽酶的活性，從而阻止細菌細胞壁的合成，呈現殺菌活性。在動物生產中，β-內酰胺類抗生素廣泛用于控制奶牛的乳房炎，治療動物尿道、胃腸道和呼吸道感染等。但由于其使用方法不當或不遵守休藥期規定等原因，均可造成它在畜產品中的殘留，給人類健康帶來嚴重危害，如產生過敏反應、破壞胃腸道菌群平衡和增強細菌耐藥性等。更為重要的是，抗生素被過量食入健康人腸道，會破壞健康人的正常菌群環境，導致人體免疫力的降低，從而危害消費者的身體健康。?

目前市場上出現了“生鮮牛乳抗生素分解劑”，該分解劑的主要成分是β-內酰胺酶，在我國β-內酰胺酶是不允許使用的食品添加劑，嚴禁將β-內酰胺酶加入到有抗生素的奶中用于分解抗生素。目前對β-內酰胺酶常用的檢測方法主要有液相法及微生物法，但是液相法雖然準確度高，但是存在操作復雜，對檢測人員要求高，檢測時間長，成本高等缺點，微生物檢測方法成本低，但是檢測靈敏度低，容易出現假陽性，耗時長，不適合現場使用。因此，在實踐中有必要建立一種敏感度高、操作簡單、成本低、適合大規模推廣的檢測方法。?

實用新型內容

本實用新型的目的提供一種靈敏度高、成本低、操作簡單、檢測時間短的檢測β-內酰胺酶的試劑盒。?

本實用新型的試劑盒包括試劑盒盒體，具有12個孔的固定用具及放置其中的12個具塞試劑桶，試劑桶包括2個微孔試劑條、8個試紙條，微孔試劑條有8個反應孔，反應孔上具有微孔塞，試紙條由底板、附著在底板上依次緊密相連的樣品吸收墊、反應膜、吸水墊和保護膜等組成，與常規試紙條不同的是，其中的頭孢類藥物單克隆抗?體-膠體金標記物不在是包被在結合物釋放墊上，組裝入試紙條，而是凍干在微孔試劑條中。?

將金標抗體凍干在微孔試劑中，這樣做的好處是在檢測過程中，能夠使金標抗體與待檢樣品液充分接觸，充分反應，從而減少誤差，增加整個體系的反應靈敏度。?

所述反應膜上分別包被有頭孢類藥物-載體蛋白偶聯物構成的檢測線印跡“|”和包被羊抗鼠抗抗體構成的質控線印跡。在反應膜上檢測線印跡和質控線印跡組合排列為“||”。?

所述的檢測線位于距離樣品吸收墊一側5-8mm，優選6mm，所述質控線位于距離檢測線4-7mm，優選5mm。?

所述試紙條兩端貼有保護膜，覆蓋在吸水端上的為手柄端，覆蓋在樣品吸收墊上的為檢測端，檢測端保護膜上有MAX標記線。?

本實用新型試劑盒中試紙條底板可為PVC底板或其他硬質不吸水的材料；樣品吸收墊可為吸濾紙或濾油紙；吸水墊為吸水紙；反應膜可為硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜；保護膜為PE材質保護膜；試劑盒盒體為硬紙盒；試劑桶為塑料試劑桶；固定用具為硬質支撐材料。?

本實用新型試劑盒具有如下有益效果：?

1.靈敏度高。β-內酰胺酶檢測試劑盒以膠體金標記高親和力的單克隆抗體為基礎制備而成，金標抗體中金顆粒與抗體分子之間無價健形成，二者通過異性電荷間的范德華力相結合，膠體金對單克隆抗體特異性和親和力影響很小，且具有較高的標記率。因此，本實用新型試劑盒具有較高的特異性和靈敏度。本試劑盒對β-內酰胺酶檢測靈敏度達到1IU/L。?

2.操作簡便快速。使用試劑盒檢測時無需任何其它試劑，只要將待檢樣品溶液滴加于凍干有青霉素藥物的微孔試劑條，即酶測試劑中，40℃～50℃溫育25min，室溫回溫10min，將回溫后的酶測試劑滴加于凍干有頭孢類藥物單克隆抗體-膠體金標記物的微孔試劑條中，混勻，孵育5min，將標有MAX標記線端向下，插入孵育后的微孔試劑反應，5min后觀察結果。?

3.顯示檢測結果形象、直觀準確。檢測是試紙條以顯示紅線色“|”及“||”印跡作為陰性和陽性標記，即在硝酸纖維素膜上顯示一條紅線“|”印跡表示在被檢測樣本液中β-內酰胺酶的含量低于1IU/L，兩條紅線“||”印跡表示在被檢測樣本中β-內酰胺酶含量高于或等于1IU/L，結果判定形象、直觀、準確、簡單明了，不容易出現結果誤判。?

4.成本低，投資少。使用本實用新型試劑盒，不需另配儀器設備及其他試劑，使現場檢測一步到位，成本低廉，投資少，見效快。?