[實用新型]一種人體包蟲病膠體金免疫層析試尿液快速診斷試紙卡

有效

• 申請號: 201020280368.5
• 申請日: 2010-08-04
• 公開（公告）號: CN201852840U
• 公開（公告）日: 2011-06-01
• 發明（設計）人: 陳新華;莊杰;陳新梅;殷勝勇;蔣建文;謝海洋;周琳;鄭樹森
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

技術領域

本實用新型涉及醫藥生物技術領域，特別涉及一種快速診斷人體包蟲病的尿液試紙，能快速利用肉眼可觀察的顏色變化診斷是否感染包蟲病。

背景技術

包蟲病作為一種嚴重危害人類健康的人畜共患病，具有起病隱匿，發展緩慢，復發頻繁的特點，需要早期診斷和定期檢測。針對我國人畜共患病流行嚴重，衛生部2007年4月提出“對包蟲病流行病學調查任務中達到高發區60％人口覆蓋率”的目標。社區醫院、防疫站、醫學院校和科研機構需要特殊科研儀器對該病進行血清學，免疫學和影像學診斷、但流行區現場調查和基層單位缺乏專門的儀器設備人員，造成很多病例不能早發現早診斷早治療。

發明內容

本實用新型的目的是克服現有技術中的不足之處，本實用新型基于膠體金免疫層析檢測原理的免疫反應裝置，提供了一種人體包蟲病膠體金免疫層析試尿液快速診斷試紙卡。

本實用新型的一種人體包蟲病膠體金免疫層析試尿液快速診斷試紙卡，它包括塑料卡盒和卡盒內的檢測模塊；所述的塑料卡盒上有加樣孔和觀察窗；所述的檢測模塊包括濾樣紙、硝酸纖維膜和吸水紙；所述的吸水紙和硝酸纖維膜上吸附有膠體金標記的抗包蟲病囊液抗原人源單鏈可變區抗體；所述硝酸纖維膜上的膠體金標記有抗包蟲病囊液抗原人源單鏈可變區抗體上標記有一條質控線和一條檢測線；所述的濾樣紙對著加樣孔，所述的硝酸纖維素膜對著觀察窗。

所述的觀察窗為長方形。

所述的檢測線由鏈霉親和素標記。

所述的質控線由兔抗鼠IgG標記。

本實用新型具有如下優點：

利用分子生物學技術研制開發具有簡便(不用儀器設備，不需專業技術人員操作，可在病人家庭使用)、快速(1-5分鐘之內完成分析)、無創(在尿液中測試，不需要采集血液標本)，可靠(可定量判讀結果，診斷符合率達90％以上)、穩定(產品在規定保存條件下穩定一年以上)的人體包蟲病的體外快速診斷試劑盒。包蟲抗體的特異性和敏感性決定了這個診斷工具的靈敏度和特異度。采用針對包蟲病囊液抗原B的重組全蛋白的人源單鏈可變區抗體作為捕捉包蟲抗原的抗體，可以降低與其他疾病的交叉反應，從而提高了靈敏度和特異度，減少了漏診或誤診。

附圖說明

圖1是本實用新型的實施例的結構示意圖。

圖2是圖1的外部結構示意圖。

具體實施方式

以下通過實施例進一步對本實用新型進行描述：

參考圖1、圖2，檢測裝置：由外部的塑料卡盒和里面的檢測模塊組成，外部的塑料卡盒包括底座1和外殼2，外殼2上有加樣孔3和長方形觀察窗4；內部檢測模塊由濾樣紙5、硝酸纖維膜6、吸水紙7組成。將膠體金標記的抗包蟲病囊液抗原人源單鏈可變區抗體8吸附在吸水紙7和硝酸纖維膜6上，形成一條質控線9和一條檢測線10；濾樣紙5正對加樣孔3，硝酸纖維膜6正對觀察窗4；檢測線10由鏈霉親和素標記；質控線9由兔抗鼠IgG標記。

檢測過程：尿樣進入加樣孔后由于毛細管作用向吸水紙方向流動，中間經過預先包被了膠體金標記的抗包蟲病囊液抗原人源單鏈可變區抗體的區域，將金標記物完全復溶，抗原與金標記抗體形成金標記抗體-抗原復合物，繼續向前流動至硝酸纖維膜上，固定有捕捉抗原的檢測線處。當結果為陽性時，金標記抗體-抗原復合物上，就會形成金標記抗體-抗原-固相抗體復合物，呈現紅色陽性條帶；如樣品中無抗原，則不被捕獲，就不顯色，則結果為陰性。多余的游離金標記抗體繼續前移至固定有抗金標記體二抗處，被固定呈現紅色的質控線。

制作原料：氯金酸：北京化學試劑廠；鏈霉親和素：BNHS：Sigma；抗包蟲病囊液抗原人源單鏈可變區抗體：(GENE?BANK：AF407670)，由浙江大學提供，可購于浙江大學，或浙江大學提供；硝酸纖維膜：Sigma；兔抗鼠IgG，Sigma。

膠體金制備及標記(常規技術)：三蒸水溶解氯金酸，加熱至沸騰，至終濃度為0.01％，每100ml加入10％檸檬酸三鈉水溶液1.5ml。再煮沸10min呈橙紅色，冷卻后用0.2mol/LK₂CO₃調至pH8.5，快速攪拌下加入純化的抗包蟲病囊液抗原人源單鏈可變區抗體2mg，加入牛血清的蛋白250mg，快速攪拌10min，加入10％NaCl，使NaCl的濃度為1％，搖勻，分別以2000、4000、10000r/min梯度離心，10min/次，最后獲得沉淀物即為初步純化的金標記的抗體結合物，溶于儲存液。