[實用新型]用于免疫印跡法檢測多種抗原或抗體的裝置

有效

• 申請號: 201020254566.4
• 申請日: 2010-07-09
• 公開（公告）號: CN201765230U
• 公開（公告）日: 2011-03-16
• 發明（設計）人: 朱紹榮
• 申請（專利權）人: 上海榮盛生物藥業有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/558;G01N33/53
• 代理公司: 上海衡方知識產權代理有限公司 31234
• 代理人: 包文超

技術領域

本實用新型涉及一種檢測裝置，尤其涉及一種檢測抗原或抗體的裝置，通過單組或多組裝置的聯合，應用免疫印跡法對單人份和多人份血清樣品中的多種抗原或抗體進行檢測。

背景技術

自體免疫性疾病(Autoimmune?disease)，如：胰島素依賴型糖尿病、系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎和混合性結締組織病等，是指機體對自身抗原發生免疫反應而導致自身組織損害所引起的疾病。這類疾病通常由自身免疫系統產生的自身抗體引發。自身抗體是一種抗體類型，主要針對個體自身的染色體、蛋白質、核酸和提取性核抗原(Extractable?Nuclear?Antigens，ENA)等抗原的抗體，其中抗ENA抗體是引發自身免疫性疾病最主要的自身抗體。

就自身抗體與自體免疫性疾病的關系而言，一種自身抗體可能形成多種不同的病癥，如：抗SS-A/Ro抗體可能導致干燥性綜合癥(Sjogren′s?Syndrome，SS)。一種病癥也可能是由各種不同的自身抗體所導致，如：系統性紅斑狼瘡(Systemic?LupusErythematosus，SLE)除了抗SS-A/Ro抗體外，抗Sm抗體和抗SS-B/La抗體等自身抗體也會導致該疾病的發生。由于導致自身免疫性疾病的復雜性，要確診某一病癥通常需要同時檢測多種自身抗體。以免疫學實驗室檢測為例，主要涉及6種ENA抗原：Ro，La，Sm，RNP，Scl-70和Jo1(J.Clin.Lab.Anal.1998，12，320-4)。

抗原或抗體的檢測屬于免疫學檢測技術，根據檢測方式不同，可以分為：免疫酶標板、免疫印跡、免疫側向層析試紙和免疫滲濾等方法。在這些方法中，酶聯免疫吸附(Enzyme-linked?immunosorbent?assay，ELISA)技術是當前檢測自身抗體應用最廣泛的技術，其具有靈敏度高、重復性好和操作自動化程度高等特點。中國實用新型專利ZL01207812.3公開了一種免疫檢測板，能一次對多種抗原(或抗體)等致病因素同時進行檢測分析。檢測板包括板體、微孔和微槽。微孔設置于板體上，各個微孔之間設有微槽，微孔呈高密度分布。當沒有微槽時，板體上配有蓋，蓋與板體之間形成微隙的密閉空間。微孔的排列為分組式，每組微孔的上平面低于板體的上平面而形成反應池。該種檢測板與目前使用的48孔或96孔酶標板類似，檢測過程需要依賴專用設備。

ELISA技術通常采用疏水性材質，如：聚苯乙烯為載體，每個檢測孔中包被的抗原或抗體量不均勻，這對檢測結果的準確性造成一定的影響。雖然通過各種技術，如：親和素和生物素的特異結合(CN200810201149.0)，以解決這一問題，但是這同時也增加了檢測載體的生產加工步驟，以及抗原或抗體由于需要額外連接生物素而對包被分子的制備增加了難度。

免疫印跡技術(Western?blotting)是根據抗原和抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。此項技術具有SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，已經在生化和細胞實驗室的日常試驗操作中得到普遍應用，但在商業化醫學檢測領域卻應用較少。

中國發明專利申請200710135675.7公開了一種風濕病自身抗體免疫印跡試劑盒，包括印跡膜條、酶聯試劑、顯色劑、終止液和標準區帶。檢測時，需要先將ENA抗原用SDS-PAGE進行分離，然后再轉移到印跡膜上，把含有不同分子量的印跡膜條放入反應槽與待測血清反應，反應后加入酶聯和顯色試劑，通過與標準區帶上的顯色條帶進行對比就可以判斷抗Sm抗體、抗U1RNP抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗Scl-70抗體、抗Jo-1抗體、抗Ro抗體和抗Rib抗體等8種自身抗體。此試劑盒僅能適用于單人份血樣的檢測，對于多人份的血樣難以實現同時操作。雖然在其商業化的試劑盒中提供了5個帶有8條反應槽的檢測裝置，但是裝置不僅體積較大，而且洗板、孵育和染色過程均操作不便。此外，檢測前還需要經由SDS-PAGE分離，增加了檢測時間。

中國發明專利申請200810132304.8公開了一種檢測自身免疫疾病相關抗核抗體譜的試劑盒及其制備方法，檢測試劑盒包括反應卡、酶聯試劑、顯色劑、終止液和濃縮洗滌液等裝置或試劑。反應卡包括檢測膜和載片，檢測膜上預先平行的固定15種抗原，每條抗原檢測線置于載片上一個獨立的反應槽中，從而減少了樣品消耗量，簡便了操作過程。同樣的，此試劑盒也僅能適用于單人份血樣的檢測，對于多人份的血樣難以實現同時操作，不僅操作的平行性難以控制，而且還使工作量有所增加。