[實用新型]一種新型的牛結核分枝桿菌雙相培養基無效
| 申請號: | 201020174964.5 | 申請日: | 2010-04-04 |
| 公開(公告)號: | CN201648404U | 公開(公告)日: | 2010-11-24 |
| 發明(設計)人: | 劉亞芹;吳長剛;楊振斌;馮冬霞;張法國;隋振亞 | 申請(專利權)人: | 劉亞芹;吳長剛 |
| 主分類號: | C12Q1/04 | 分類號: | C12Q1/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 252000 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 新型 結核 分枝桿菌 培養基 | ||
技術領域
這種新型的牛結核分枝桿菌雙相培養基屬于一種醫療用品。解決了原有培養基只為單一固體培養基即丙酮酸鈉培養基,培養周期長,不能快速發現污染菌的缺陷。?
背景技術
在臨床上,痰菌檢查是診斷肺結核病以及判斷肺結核病傳染性強弱的最直接、最主要的依據,只有培養出分枝桿菌,才能進一步做藥敏試驗找到對分枝桿菌有效的藥物。分枝桿菌包括結核分枝桿菌復合群和非結核分枝桿菌。結核分枝桿菌復合群中包括牛結核分枝桿菌。牛結核分枝桿菌分離培養采用丙酮酸鈉固體培養基。?
丙酮酸鈉固體培養基:?
基礎液谷氨酸鈉(純度99%以上)7.2克?
磷酸二氫鉀2.4克?
硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.24克?
檸檬酸鎂0.6克?
丙酮酸鈉1.6克?
葡萄糖4.0克?
蒸餾水600毫升?
無機鹽和有機物試劑均應采用化學純(CP)試劑?
新鮮雞卵液1000毫升?
2%孔雀綠水溶液20毫升?
制備方法:?
量取蒸餾水600毫升。加入各無機鹽成份、谷氨酸鈉和丙三醇,100℃加熱30分鐘,冷卻后加入葡萄糖。洗凈新鮮雞卵表面,浸泡在70%乙醇或其它稀釋消毒液中20~30分鐘。取出,擦干,開口,收集雞卵液,攪勻。通過消毒的紗布過濾成雞卵液。將600毫升基礎液和1000毫升新鮮雞卵液混勻。加2%孔雀綠水溶液20毫升,混勻,靜置1小時后,分裝7毫升至標準螺旋蓋培養管經培養基蒸汽凝固滅菌器,85℃滅菌50分鐘。?
丙酮酸鈉液體培養基制備:?
天門冬氨酸0.2g,MgSO40.05g,丙酮酸鈉0.27g,KH2PO40.5g,,葡萄糖0.67g枸櫞酸鈉0.5g,水100ml,PH?7.2,加入2%孔雀綠水溶液4ml,121℃,20分鐘高壓冷卻后加25ml無菌血漿。?
沙氏培養基制備:?
蛋白胨10g,葡萄糖40g,瓊脂粉13g,水1000ml,121℃,20分鐘高壓后無菌灌裝。?
做痰、體液等標本的牛結核分枝桿菌的培養時,需要對其進行前處理,即在離心管內加入標本后,再加入標本體積1-2倍的4%的NaOH液漩渦振蕩10秒后,靜置20分鐘。?
臨床上要求提高牛結核分枝桿菌培養的效率,適宜牛結核分枝桿菌生長的是丙酮酸鈉固體培養基,在固體培養基中,牛結核分枝桿菌長成菌落需要三周以上的時間,而在丙酮酸鈉液體培養基中生長速度快兩周即可。前處理雖能盡量除去雜菌,但同時也應盡可能減少對分枝桿菌的損害,因此,前處理不能完全除去雜菌。在培養過程中,也就不可避免的存在污染菌,污染菌大多數是真菌,為了快速鑒別污染菌,在裝有丙酮酸鈉培養基的瓶中再加入沙保羅氏培養基,沙氏培養基是專用于真菌培養分離的培養基,真菌在其上生長速度較快,所以能快速發現和鑒別污染菌,從而提高了培養效率。?
發明內容
本培養基的目的是克服上述的問題,提供一種適用于牛結核分枝桿菌培養基,在原有丙酮酸鈉固體培養基的基礎上,管內同時配置丙酮酸鈉液體培養基和沙保羅氏培養基,丙酮酸鈉液體培養基加快牛結核分枝桿菌的生長,沙氏培養基能快速發現污染菌,在牛結核分枝桿菌培養的檢查中縮短時間,提高效率。本培養基制備過程是先無菌加入10ml丙酮酸鈉固體培養基,放斜面冷卻后再加入10ml沙氏培養基,放斜面冷卻,此時注意兩種培養基不要混合,最后加入10ml丙酮酸鈉液體培養基。?
本實用新型的技術方案:一種新型的牛結核分枝桿菌雙相培養基,其特征是:外瓶為塑料瓶,瓶高7cm,瓶體厚1mm,瓶體外徑4cm,瓶蓋高12mm,蓋厚1mm,瓶蓋內有防漏液膠墊。瓶內為丙酮酸鈉固體培養基斜面、沙保羅氏固體培養基斜面、10ml丙酮酸鈉液體培養基。丙酮酸鈉固體培養基斜面高45mm,在瓶底的部分寬15mm,丙酮酸鈉固體培養基的正對面為沙保羅氏固體培養基,沙保羅氏固體培養基斜面高45mm,在瓶底的部分寬15mm。進一步的技術方案:?
所述的裝置內有沙氏培養基斜面。?
所述的裝置內裝丙酮酸鈉液體培養基和丙酮酸鈉固體培養基。?
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