[實(shí)用新型]一種雜交瘤細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)裝置

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201020133727.4
• 申請(qǐng)日: 2010-03-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN201634682U
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-11-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張少華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張少華
• 主分類號(hào): C12M3/00
• 分類號(hào): C12M3/00;C12M1/36
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 37221
• 代理人: 楊琪

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種雜交瘤細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)裝置。

背景技術(shù)

采用細(xì)胞融合技術(shù)獲得雜交瘤株、通過(guò)培養(yǎng)雜交瘤株是生產(chǎn)單克隆抗體常用的生物學(xué)方法，將雜交瘤注射于小鼠體內(nèi)獲得腹水是生產(chǎn)高效價(jià)抗體的基本方法，該方法成本高，需要養(yǎng)殖批量小鼠。現(xiàn)有技術(shù)中，有人采用微囊固定化細(xì)胞培養(yǎng)方法，可連續(xù)獲得細(xì)胞培養(yǎng)液，然后從培養(yǎng)液中提取抗體。該方法效率高，不需要養(yǎng)殖動(dòng)物，但是對(duì)無(wú)菌條件要求高，技術(shù)含量高，步驟繁多，不易掌握，同時(shí)，微囊中的細(xì)胞容易老化，壽命有限。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本實(shí)用新型提供了一種雜交瘤細(xì)胞相對(duì)固定、連續(xù)化化培養(yǎng)裝置，本實(shí)用新型的裝置專用于包括雜交瘤細(xì)胞株在內(nèi)的懸浮細(xì)胞系的不同規(guī)模的培養(yǎng)，使不同規(guī)模的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)方法操作簡(jiǎn)單化、且容易控制并能減低成本，適用于多數(shù)實(shí)驗(yàn)室普及應(yīng)用。

本實(shí)用新型是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種雜交瘤細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)裝置，包括供給瓶、臨時(shí)儲(chǔ)液瓶、培養(yǎng)室、收集瓶、金屬桿、細(xì)胞培養(yǎng)床，其中，培養(yǎng)室上部設(shè)計(jì)為玻璃圓柱狀，培養(yǎng)室下部收縮為尖嘴狀(類似于滴定管的下部)，培養(yǎng)室下部設(shè)有控制開(kāi)關(guān)，收集瓶通過(guò)硅膠管與培養(yǎng)室的尖嘴下部連通；臨時(shí)儲(chǔ)液瓶位于培養(yǎng)室上方，與培養(yǎng)室頂端連通；臨時(shí)儲(chǔ)液瓶上設(shè)有2個(gè)管道，一個(gè)位于頂部，為排氣管，一個(gè)位于底部，為排液管，排氣管和排液管上均設(shè)有控制開(kāi)關(guān)；供給瓶通過(guò)硅膠管與臨時(shí)儲(chǔ)液瓶連通，硅膠管上設(shè)有控制開(kāi)關(guān)；金屬桿下端插至培養(yǎng)室底部，上端高出培養(yǎng)室頂端開(kāi)口；細(xì)胞培養(yǎng)床位于培養(yǎng)室內(nèi)，固定在金屬桿上。

所述臨時(shí)儲(chǔ)液瓶與培養(yǎng)室之間通過(guò)磨砂口裝置連接，以保證密封性良好。

所述磨砂口裝置實(shí)際上相當(dāng)于培養(yǎng)室的上蓋，取下此上蓋后，可以向培養(yǎng)室內(nèi)放置金屬桿及細(xì)胞培養(yǎng)床，蓋上此上蓋后，由于為磨砂設(shè)計(jì)，可以保證培養(yǎng)室密封性良好，與臨時(shí)儲(chǔ)液瓶連接處也為磨砂設(shè)計(jì)，保證連接后密封性良好。

所述細(xì)胞培養(yǎng)床為疏密均一的纖維結(jié)構(gòu)，比如聚苯乙烯纖維，該疏松的纖維結(jié)構(gòu)圍繞培養(yǎng)室內(nèi)金屬桿固定(金屬桿為輕質(zhì)材料制成)，金屬桿上端高出培養(yǎng)室頂端開(kāi)口，這樣，細(xì)胞培養(yǎng)床可以隨金屬桿的上下移動(dòng)而活動(dòng)。

所述疏松的纖維結(jié)構(gòu)要求稍有彈性，纖維直徑可以控制于10～100微米。

所述疏松的纖維結(jié)構(gòu)表面接枝氨基，易于細(xì)胞吸附。

所述排氣管和排液管均鏈接硅膠管。

所述收集瓶和供給瓶均設(shè)計(jì)有過(guò)濾除菌空氣交流結(jié)構(gòu)，以保障液體供給和收集的暢通、交流的空氣保持無(wú)菌。同時(shí)設(shè)有硅膠管的空氣交流管道，以通氣消毒使用。

上述裝置設(shè)計(jì)在局部無(wú)菌層流條件下使用，局部無(wú)菌層流條件符合《國(guó)家醫(yī)藥管理局醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》(主編部門：國(guó)家醫(yī)藥管理局上海醫(yī)藥設(shè)計(jì)院；批準(zhǔn)部門：國(guó)家醫(yī)藥管理局；施行日期：1997年1月1日)表2.2.1中提到的百級(jí)潔凈度環(huán)境，或符合《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》(編號(hào)為GB?50073-2001，自2002年1月1日起施行)中表3.0.1潔凈室及潔凈區(qū)空氣中懸浮粒子潔凈度第3等。

注：《國(guó)家醫(yī)藥管理局醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》(主編部門：國(guó)家醫(yī)藥管理局上海醫(yī)藥設(shè)計(jì)院；批準(zhǔn)部門：國(guó)家醫(yī)藥管理局；施行日期：1997年1月1日)表2.2.1中提到的百級(jí)潔凈度環(huán)境內(nèi)容是：≥0.5μ塵粒≤3,500個(gè)/m3；≥5μ塵粒0個(gè)/m3；Φcm碟0.5h沉降菌≤1個(gè)；浮游菌≤5個(gè)/m3)；《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》(編號(hào)為GB50073-2001，自2002年1月1日起施行)中表3.0.1潔凈室及潔凈區(qū)空氣中懸浮粒子潔凈度第3等級(jí)(大于或等于0.1μ粒徑的最大濃度限度小于1000個(gè)，大于或等于0.2μ粒徑的最大濃度限度小于24個(gè)，大于或等于0.5μ粒徑的最大濃度限度小于4個(gè))。

上述層流設(shè)計(jì)均為行業(yè)內(nèi)常規(guī)設(shè)計(jì)，在此不再贅述。

使用時(shí)：先自供給瓶的空氣交流管道輸入臭氧進(jìn)行全裝置滅菌，然后關(guān)閉供給瓶的空氣交流管道和收集瓶的空氣交流管道，向培養(yǎng)室內(nèi)預(yù)加部分細(xì)胞培養(yǎng)液，然后通過(guò)臨時(shí)儲(chǔ)液瓶將細(xì)胞懸液緩慢加入培養(yǎng)室內(nèi)，這樣，細(xì)胞主要聚集于培養(yǎng)室的上端，并附著于聚苯乙烯材料制作的彈性纖維培養(yǎng)床上。然后打開(kāi)連接供給瓶與臨時(shí)儲(chǔ)液瓶的硅膠管上的控制開(kāi)關(guān)，供給瓶開(kāi)始供給培養(yǎng)液；臨時(shí)儲(chǔ)液瓶中氣體通過(guò)排氣管排出。同時(shí)打開(kāi)培養(yǎng)室下端的控制開(kāi)關(guān)并控制流速，使培養(yǎng)液以適宜的速度流出，收集培養(yǎng)液到收集瓶中，即獲得培養(yǎng)物。