[發明專利]一種啟動子BgIosP526及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201010623187.2
• 申請日: 2010-12-30
• 公開（公告）號: CN102146410A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發明（設計）人: 張耕耘;孫紅正;李寧;倪雪梅
• 申請（專利權）人: 深圳華大基因科技有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/11;C12N15/10;A01H4/00;A01H5/00;C12R1/19;C12R1/01
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種啟動子，所述啟動子含有選自以下任意一組并具有啟動子功能的核苷酸序列：

a、SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列；

b、與SEQ?ID?NO：1互補的核苷酸序列；

c、在高等嚴緊條件下能夠與上述a或b的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；

d、對上述a或b所示核苷酸序列進行一個或多個堿基的置換、缺失、添加修飾的核苷酸序列；

e、與上述a或b所示核苷酸序列具有至少90％同一性的核苷酸序列。

2.一種核酸構建體，包含權利要求1所述的啟動子，以及與啟動子可操作連接的基因序列，其中所述啟動子與所述基因序列來源相同或者不同。

3.一種載體，含有權利要求1的啟動子或權利要求2的核酸構建體，例如含有權利要求1的啟動子或權利要求2的核酸構建體的pMD18-T質粒或p8質粒。

4.一種重組細胞，含有權利要求1的啟動子、權利要求2的核酸構建體或權利要求3的載體，所述重組細胞例如為重組大腸桿菌細胞或重組農桿菌細胞。

5.一種含有權利要求1的啟動子、權利要求2的核酸構建體、權利要求3的載體或權利要求4的重組細胞的植物愈傷組織、植物外植體或植物，所述植物可以為單子葉植物或雙子葉植物，優選稻屬或煙草屬，更優選水稻或煙草，最優選水稻日本晴或煙草NC89。

6.一組引物對，所述引物對用于擴增得到權利要求1所述的啟動子，其特征在于：所述引物對的兩條引物分別含有SEQ?ID?NO：2和SEQ?ID?NO：3所示的序列，優選地，所述引物對的兩條引物在5’端還分別連接有限制性酶切位點和/或保護堿基，更優選地，所述引物對的兩條引物分別具有SEQ?ID?NO：4和SEQ?ID?NO：5所示的序列。

7.制備SEQ?ID?NO：1所示的啟動子的方法，包括：以水稻日本晴基因組DNA為模板，使用一對擴增引物進行擴增，所述擴增引物根據SEQ?ID?NO：1在水稻日本晴gDNA中的序列分別針對首尾進行設計，優選是權利要求6所述的引物對。

8.一種調控基因表達方法，所述方法包括步驟：

將權利要求1的啟動子、權利要求2的核酸構建體、權利要求3的載體或權利要求4的重組細胞轉化至植物(優選植物愈傷組織或植物外植體)，使所述核苷酸序列位于所述基因的5’端，所述植物可以是單子葉植物或雙子葉植物，優選稻屬或煙草屬，更優選水稻或煙草，最優選水稻日本晴或煙草NC89。

9.一種制備轉基因植物的方法，包括在有效產生植物的條件下培養權利要求4的重組細胞或權利要求5的植物愈傷組織、植物外植體或植物。所述植物可以為單子葉植物或雙子葉植物，優選稻屬或煙草屬，更優選水稻或煙草，最優選水稻日本晴或煙草NC89。

10.權利要求1的啟動子、權利要求2的核酸構建體、權利要求3的載體、權利要求4的重組細胞或者權利要求5的植物愈傷組織、植物外植體或植物者用于調控植物目的基因表達和植物育種的用途，所述植物可以為單子葉植物或雙子葉植物，優選稻屬或煙草屬，更優選水稻或煙草，最優選水稻日本晴或煙草NC89。