[發明專利]一種細菌檢測方法及裝置

無效

• 申請號: 201010622397.X
• 申請日: 2010-12-31
• 公開（公告）號: CN102140491A
• 公開（公告）日: 2011-08-03
• 發明（設計）人: 項光宏
• 申請（專利權）人: 聚光科技(杭州)股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及待測樣本中細菌的檢測，特別涉及一種細菌檢測方法以及應用該方法的裝置。

背景技術

地表水、地下水，甚至雨水中含有多種細菌。尤其是當水體受到人畜糞便、生活污水或某些工農業廢水污染時，水體中的細菌會大量增加。因此，對水的細菌學檢驗，特別是腸道細菌的檢驗，在衛生學上具有重要的意義。其中總大腸菌群、耐熱大腸菌群和大腸埃希氏菌已被廣泛用作水體安全評估的重要常規微生物檢測指標，通過它們及其它細菌的檢測，可以判斷水體衛生學質量，確保人們飲水安全。

在現有的水體細菌檢測方法中，普遍采用液體培養或膜過濾后固體平板培養的細菌擴增模式，在細菌濃度達到較高水平時進行人工計數或者顯色觀察，該類方法往往需要繁瑣的手工操作，包括樣品稀釋、人工接種、觀察計數和驗證實驗等，導致檢測耗時很長，通?？蛇_24-72小時甚至更久。因此，上述傳統方法不僅費時、費力，而且在繁瑣的操作過程中有可能發生二次污染。

此外，對江河、湖庫、泳池、景觀場所的水體利用傳統實驗室手段進行細菌檢測時，往往需要大體積采樣，并要保證水樣運輸時間常溫下不超過2小時，或者10攝氏度冷藏保存不超過6小時，這給細菌日常監測帶來了極大不便，更無法滿足人們對水環境安全日益提高的檢測需求。

目前，快速、便捷而又穩定的基于特異指示酶的生化分析法(又稱特異酶底物法)憑借其易于觀察識別和實現自動化等特點，已經成為水中細菌檢測方法的主要發展趨勢，得到人們的極大關注，并且有人采用該方法進行水質細菌在線監測研究，而且已經有用于水質細菌檢測的在線儀器問世，比如挪威ColifastAS公司的colifast和法國賽環的Colilert3000水質大腸菌在線監測儀。與傳統細菌檢測方法相比，基于特異酶底物的細菌在線檢測方法能夠將檢測時間縮短至4-18小時，其具體時間由初始細菌數量決定，菌量越大，用時越短。

不過，上述水質細菌在線監測儀均從水體直接取樣進行培養檢測，缺乏有效的細菌全自動富集手段，無法滿足更快的檢測需求。并且檢測結果容易受到水體背景干擾，無法實現環境水體的準確定量。因此，發展具有大腸菌全自動過濾裝置的檢測裝置與方法，提高水體初始菌量，從而最大程度地縮短檢測時間就顯得尤為重要。

發明內容

為了解決現有技術中存在的上述不足，本發明提供了一種使用壽命長、操作簡單、易于實現自動化的細菌檢測方法及裝置。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種細菌檢測方法，包括以下步驟：

a、累積步驟

待測樣本在驅動下沿著正方向穿過濾單元，待測樣本中的細菌留在過濾單元的一側并累積；

b、洗脫步驟

反沖流體在驅動下沿著反方向穿過過濾單元，將累積的細菌帶離過濾單元；

c、檢測步驟

檢測從過濾單元上脫離的累積細菌，從而獲得待測樣本中細菌的含量。

根據上述檢測方法，還包括步驟d：消毒和沖洗步驟：

消毒液沿著反方向穿過過濾單元，進入檢測單元，之后排出；

清洗液沿著反方向穿過過濾單元，進入檢測單元，之后排出，返回到步驟a。

根據上述檢測方法，消毒液在過濾單元、檢測單元內停留，當停留時間不小于消毒要求的時間后，排出消毒液。

根據上述檢測方法，所述待測樣本是待測水樣或液態食品。

根據上述檢測方法，通過流路切換，使得分時間地進行如下程序：待測樣本沿著正方向流向過濾單元、反沖流體攜帶著累積的細菌沿著反方向流向檢測單元。

根據上述檢測方法，通過流路切換，使得分時間地進行如下程序：過濾后的待測樣本沿著正方向排出、反沖流體沿著反方向流向過濾單元。

根據上述檢測方法，所述過濾單元采用膜式過濾器。

為了實現上述方法，本發明還提出了這樣一種細菌檢測裝置，包括待測樣本提供單元、過濾單元、檢測單元；還包括反沖流體提供單元；

待測樣本沿著正方向穿過過濾單元，之后排走，待測樣本中的細菌截留在過濾單元的一側；反沖流體沿著反方向穿過過濾單元，之后過濾單元一側的細菌帶走，并流向檢測單元。

根據上述檢測裝置，還包括第一切換單元，用于間隔地使待測樣本沿著正方向穿過過濾單元、流出過濾單元的反沖流體攜帶著細菌流向檢測單元。

根據上述檢測裝置，還包括第二切換單元，用于間隔地使穿過過濾單元后的待測樣本排出、反沖流體沿著反方向穿過過濾單元。

根據上述檢測裝置，在雙向泵的驅動下，待測樣本和反沖流體間隔地流向過濾單元。

根據上述檢測裝置，所述過濾單元采用膜式過濾器。