[發明專利]一種測定抗SmD1抗體IgG的方法及試劑裝置

有效

• 申請號: 201010619683.0
• 申請日: 2010-12-31
• 公開（公告）號: CN102147408A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發明（設計）人: 何林;潘蕎;肖燦;伍堅
• 申請（專利權）人: 深圳市亞輝龍生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 胡堅

1.一種測定抗SmD1抗體IgG的方法，其特征在于：所述方法是通過酶聯免疫檢測的分析試劑裝置和配套試劑組成的試劑盒來實現的，這種分析試劑裝置包括設有8個孔位的基體和位于基體一端的手柄，它通過專用特定分析儀器對試劑裝置各孔之間的各種特定試劑溶液進行加注和吸棄，使樣品與試劑發生反應，然后測量發生反應后溶液色澤的數值，最終通過對測量的數值進行處理而獲得檢測結果。

2.根據權利要求1所述的測定抗SmD1抗體IgG的方法，其特征在于：所述的方法是將待測樣品中的待測抗SmD1抗體IgG與高度純化的SmD1抗原進行反應而形成第一免疫絡合物，該第一免疫絡合物與酶標記的第二抗體進行反應形成第二免疫絡合物，將反應形成的第二絡合物與顯色底物進行顯色對比分析，從而獲得待測抗SmD1抗體IgG的含量。

3.根據權利要求2所述的測定抗SmD1抗體IgG的方法，其特征在于：所述的第二抗體為辣根過氧化物酶標記的抗人IgG抗體。

4.一種用于測定抗SmD1抗體IgG的試劑裝置，其特征在于：所述的試劑裝置設有8個孔位的基體、位于基體一端的手柄，以及用于酶聯免疫法檢測抗SmD1抗體IgG的分析試劑裝置以及相應數量的配套試劑校準品、質控物和緩沖洗滌液的組份。

5.根據權利要求4所述的用于測定抗SmD1抗體IgG的試劑裝置，其特征在于：所述基體一端的手柄上粘貼有檢測試劑條形碼的標帖，所述條形碼的數值包含每項檢測所對應的檢測項目代碼、檢測試劑生產批號、試劑有效期、定性校正值/定量測定標準曲線參數、酶聯免疫反應類型、試劑及分析裝置的序列號的信息。

6.根據權利要求4所述的用于測定抗SmD1抗體IgG的試劑裝置，其特征在于：所述孔位包括一個反應孔、一個樣品孔、一個稀釋孔和五個試劑孔，其中，

1)樣品孔盛容待測溶液；

2)稀釋孔用于樣品的稀釋；

3)反應孔為平底并具有很高的光源/光路通透性，當盛裝無色/空白試劑溶液時對可見光/紫外光/熒光的吸光度值趨近于零，孔內包被有檢測抗SmD1抗體IgG所需的高度純化的SmD1抗原，該孔用于盛容檢測樣品和檢測試劑，并與這些樣品和試劑發生酶聯免疫反應，是酶聯免疫反應和色澤顯示及檢測的容器；

4)每一個試劑孔盛裝有酶聯免疫法檢測抗SmD1抗體IgG所需的一種試劑，加注試劑后用薄膜將微孔的開放口緣進行封閉。

7.根據權利要求6所述的用于測定抗SmD1抗體IgG的試劑裝置，其特征在于：所述試劑孔內所盛裝酶聯免疫檢測所需的試劑包括檢測抗SmD1抗體IgG之酶聯免疫反應所需的免疫反應抑制劑/中和劑/阻斷劑/吸附劑、酶結合物溶液、顯色底物溶液、顯色終止液、反應增強劑/促進劑、樣品稀釋溶液。

8.根據權利要求6所述的用于測定抗SmD1抗體IgG的試劑裝置，其特征在于：所述樣品孔、反應孔、稀釋孔和試劑孔剖面形狀包括平型、V型或U型，抑或是平型、V型和U型之間的任意組合。

9.根據權利要求1所述的測定抗SmD1抗體IgG的方法，其特征在于：所述的方法包括如下的步驟：

1)開機：打開儀器開關后，儀器會自動地進行一系列檢查，從而為儀器的正常運行做準備；

2)檢查程序的準備：按要求配置好相應的溶液，包括：緩沖洗滌液、清洗液、消毒液和蒸餾水或去離子水，配制完畢裝入相應的液體罐中；

3)沖洗檢查：

4)預熱：在開機后，儀器會啟動加熱程序，將溫度調至待檢溫度；

5)與主機連機：儀器通過RS232串口可以和主機相連，從而將儀器正常工作所得結果交由集中式系統處理；

6)抗SmD1抗體IgG的檢測：所述的檢測又包括如下的步驟：

i.從有密封口的一邊打開包裝袋，取用所需數量的分析裝置，排除空氣后將袋口封緊；

ii.檢查分析裝置試劑孔中的底物，應為無色澤改變，否則應棄掉；

iii.分別在每個分析裝置的樣品孔中加50～100μL未稀釋的樣品，每更換一個批號的試劑，應取其中一個分析裝置及校準品進行儀器校準；

iv.放置分析裝置到儀器中相應的分析裝置托盤中，按照使用說明書進行校準和檢測；

v.按照所需檢測的數量在分析裝置托盤中放入相對應數量的分析裝置，并在檢測位置之前放入含有校準品和質控物的分析裝置，儀器可自動地識別分析裝置條碼、質控物條碼和校準品條碼，選擇行可定位于“樣品”欄或“檢測”欄；

vi.點擊開始，運行項目表，掃描各個分析裝置條碼，對質控物，校準品以及檢測樣品進行編號；

vii.運行檢測表，儀器根據條碼信息自動運行，根據條碼，儀器會選擇相應設置好的標準曲線，程序首先檢測校準品，以此來校準儀器內預設的曲線；其次對質控物進行檢測，如果其檢測結果在標示的范圍內，則表示內置曲線合格，可用于樣品的檢測，最后開始樣品的檢測程序；

viii.稀釋：加注針會從樣品孔自動吸取樣品，刺破孔位密封薄膜自動吸取稀釋液在稀釋孔進行樣品稀釋，動作完成后，被稀釋的樣品會被加注針移至試劑孔反應一段程序設定的時間，之后移除液體；

ix.洗滌：加注針會從相應的液罐中吸取一定量的洗滌液對試劑孔進行三到五次洗滌后移除液體；

x.加注針刺破試劑孔密封薄膜吸取一定量的辣根過氧化物酶標記的抗人IgG抗體至試劑孔進行反應，反應一段程序設定的時間后移除液體；

xi.重復步驟ix洗滌；

xii.加注針刺破試劑孔密封薄膜吸取一定量的酶反應底物至試劑孔進行一段程序設定的時間反應；

xiii.加注針刺破試劑孔密封薄膜吸取一定量的終止液加注至試劑孔，在10分鐘內于450nm讀取0D值，如果選擇雙波長法測定，參考波長為620nm～690nm；

7)檢測結果：當檢測程序運行完畢，點擊與主機的數據傳輸，儀器會自動將正常工作所得結果發送到主機交由外接數據處理軟件分析，最后生成報告單以便查閱；

8)關機：檢測結束后，在儀器關機前，必須啟動洗滌循環，這樣可以避免來自溶液中的殘留鹽份在液路中結晶，避免損壞儀器或導致檢測結果無效，洗滌完成后，儀器電源自動關閉。