[發(fā)明專(zhuān)利]快速獲取大量根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)雌蟲(chóng)的簡(jiǎn)易方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010615616.1
• 申請(qǐng)日: 2010-12-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102175495A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-09-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳海燕;周勛波;畢建杰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 吳海燕
• 主分類(lèi)號(hào): G01N1/28
• 分類(lèi)號(hào): G01N1/28
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種獲得大量雌性根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的簡(jiǎn)易方法。適用于植物病理學(xué)、植物線(xiàn)蟲(chóng)學(xué)的研究、植物病理學(xué)和植物線(xiàn)蟲(chóng)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)課程以及在根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)分類(lèi)學(xué)等方面有極其重要的利用價(jià)值。

背景技術(shù)

會(huì)陰花紋是根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)種類(lèi)鑒定的重要的形態(tài)這依據(jù)，制備會(huì)陰花紋的玻片及實(shí)驗(yàn)教學(xué)中需要大量的雌蟲(chóng)，而雌性根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)均埋生在寄主根組織內(nèi)部，獲得雌蟲(chóng)必須在解剖鏡下解剖根結(jié)，取出內(nèi)部的雌蟲(chóng)，在操作過(guò)程中，看不清楚內(nèi)部的雌蟲(chóng)，因此，在解剖時(shí)經(jīng)常弄破雌蟲(chóng)，以致花費(fèi)大量的時(shí)間獲得少量的雌蟲(chóng)，事倍功半。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種短時(shí)間內(nèi)可以獲得大量完整雌性根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的簡(jiǎn)易方法，以克服現(xiàn)有獲取雌性根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)技術(shù)費(fèi)時(shí)費(fèi)力和蟲(chóng)體易破的不足。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采取技術(shù)方案是：

第一步：利用細(xì)菌在25℃-30℃溫度下，分解腐敗植物根部的表皮和皮層組織；

第二步：將分解后的腐敗植物根的表皮和皮層脫落，釋放內(nèi)部的雌蟲(chóng)，然后通過(guò)20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在15×解剖鏡下觀(guān)察到大量的白色梨形雌蟲(chóng)。

第三步：在體視解剖鏡下或在光線(xiàn)充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)白色雌蟲(chóng)。

本發(fā)明更詳細(xì)的步驟為：

第一步：取新鮮的、表現(xiàn)根結(jié)癥狀的植物病根，用自來(lái)水沖去表面的泥土，剪成段狀置于相應(yīng)大小的燒杯中，加入自來(lái)水，浸沒(méi)根組織，然后將燒杯置于恒溫箱中直至植物病根部的表皮和皮層組織分解。

上述恒溫箱的溫度一般控制在25℃-30℃。

第二步：將處理后的病根移入組織搗碎機(jī)組織攪拌，使腐敗的表皮和皮層脫落，釋放內(nèi)部的雌蟲(chóng)，再通過(guò)20目和80目的標(biāo)準(zhǔn)篩，收集80目的殘留物到小皿中，解剖鏡下可看到大量白色的梨形的根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)雌蟲(chóng)。

上述組織攪拌時(shí)間一般為30秒鐘，

第三步：在體視解剖鏡下或在光線(xiàn)充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)白色雌蟲(chóng)。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：

1、避免在解剖鏡下逐一解剖根結(jié)，且取出雌蟲(chóng)時(shí)易被弄破。

2、在短時(shí)間內(nèi)，獲得雌蟲(chóng)量大，完整性好。

3、方法簡(jiǎn)單，不需要特殊的儀器設(shè)備

為了驗(yàn)證本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)，在同等條件下利用本發(fā)明方法和常規(guī)方法進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果表明，利用本方法30分鐘可獲得50-60個(gè)或更多完整的雌蟲(chóng)，而用常規(guī)方法在體視鏡直接解剖，如果獲得同樣數(shù)量的雌蟲(chóng)需要2-3個(gè)小時(shí)，且需要一直在鏡下操作，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。

上述試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明本發(fā)明方法在短時(shí)間內(nèi)可獲得大量的雌性根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)，操作簡(jiǎn)單，不需要特殊儀器設(shè)備，彌補(bǔ)了常規(guī)技術(shù)費(fèi)時(shí)費(fèi)力和蟲(chóng)體易破的不足。

附圖說(shuō)明

圖1是利用本發(fā)明方法30分鐘獲得的部分南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)雌蟲(chóng)的顯微鏡放大圖，其中bar＝1000μm；

圖2是利用本發(fā)明方法30分鐘獲得的部分南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)雌蟲(chóng)的顯微鏡放大圖，其中bar＝500μm。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案。

1.準(zhǔn)備具有明顯根結(jié)癥狀的病根，500ml燒杯，組織搗碎機(jī)，20目和80目的標(biāo)準(zhǔn)篩，體視解剖鏡，恒溫培養(yǎng)箱。

2.將病根剪成2cm長(zhǎng)放入500ml燒杯中，加自來(lái)水浸末根組織，置于30℃恒溫箱過(guò)夜，待燒杯內(nèi)水混濁，將根取出移入組織搗碎機(jī)，工作30秒鐘。然后通過(guò)20目和80目的套篩，收集80目篩子上的殘留物，在解剖鏡下觀(guān)察到大量的白色雌蟲(chóng)，如圖1中A(bar＝1000μm)圖片和B(bar＝500μm)圖片。

3.在體視解剖鏡下或在光線(xiàn)充足處用細(xì)毛筆直接挑取根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)白色雌蟲(chóng)。