[發(fā)明專利]啟動子BGIosP515及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010614978.9
• 申請日: 2010-12-30
• 公開（公告）號: CN102146393A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊爽;孫紅正;李寧;倪雪梅
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳華大基因科技有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/11;C12N15/10;A01H4/00;A01H5/00;C12R1/19;C12R1/01
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所 11038
• 代理人: 程泳

1.一種啟動子，所述啟動子含有選自以下任意一組并具有啟動子功能的核苷酸序列：

a、Seq?ID?NO：1所示的核苷酸序列；

b、與Seq?ID?NO：1互補的核苷酸序列；

c、在高等嚴緊條件下能夠與上述a或b的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；

d、對上述a或b所示核苷酸序列進行一個或多個堿基的取代、缺失、添加修飾的核苷酸序列；

e、與上述a或b所示核苷酸序列具有至少90％同一性的核苷酸序列。

2.一種核酸構(gòu)建體，其包含權(quán)利要求1的啟動子，與啟動子可操作連接的基因序列，其中所述啟動子與所述基因序列來源相同或者不同。

3.一種載體，其特征在于：所述載體含有權(quán)利要求1的啟動子或權(quán)利要求2的核酸構(gòu)建體；具體地，所述載體為權(quán)利要求1的啟動子或權(quán)利要求2的核酸構(gòu)建體與pMD18-T或p8質(zhì)粒經(jīng)重組得到的重組載體。

4.一種重組細胞，其特征在于：所述細胞含有權(quán)利要求1的啟動子或權(quán)利要求2的核酸構(gòu)建體或權(quán)利要求3的載體；具體地，所述重組細胞為重組大腸桿菌細胞或重組農(nóng)桿菌細胞。

5.一種含有權(quán)利要求1的啟動子或權(quán)利要求2的核酸構(gòu)建體或權(quán)利要求3的載體或權(quán)利要求4的重組細胞的植物愈傷組織或植物外植體或植物；具體地，所述植物為單子葉植物或雙子葉植物；再具體地，所述植物為稻屬或煙草屬；更具體地，所述植物為水稻或煙草；進一步具體地，所述植物為水稻日本晴或煙草NC89。

6.一組引物對，所述引物對用于擴增得到權(quán)利要求1所述的啟動子，其特征在于：所述引物對的兩條引物分別含有Seq?ID?NO：2和SeqID?NO：3所示的序列；優(yōu)選的，所述引物對的兩條引物在5’端還分別連接有限制性酶切位點和/或保護堿基；具體地，所述引物對的兩條引物分別具有Seq?ID?NO：4和Seq?ID?NO：5所示的序列。

7.制備SEQ?ID?NO：1所示的啟動子的方法，包括

以水稻日本晴基因組DNA為模板，使用一對擴增引物進行擴增，所述擴增引物根據(jù)SEQ?ID?NO：1在水稻日本晴gDNA中的序列分別針對首尾進行設(shè)計，例如為權(quán)利要求6所述的引物對。

8.一種調(diào)控植物中基因表達的方法，所述方法包括，將權(quán)利要求1的啟動子或權(quán)利要求2的核酸構(gòu)建體或權(quán)利要求3的載體或權(quán)利要求4的重組細胞導入植物，例如導入植物愈傷組織；

具體地，所述植物為單子葉植物或雙子葉植物；

再具體地，所述植物為稻屬或煙草屬；

更具體地，所述植物為水稻或煙草；

進一步具體地，所述植物為水稻日本晴或煙草NC89。

9.一種制備轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括在有效產(chǎn)生植物的條件下培養(yǎng)權(quán)利要求4的重組細胞或權(quán)利要求5的植物愈傷組織或植物外植體。

10.權(quán)利要求1的啟動子或權(quán)利要求2的核酸構(gòu)建體或者權(quán)利要求3的載體或權(quán)利要求4的重組細胞在調(diào)控植物中目的基因表達或植物育種中的用途；具體地，植物為單子葉植物或雙子葉植物；再具體地為稻屬或煙草屬；更具體地為水稻或煙草；更進一步具體地為水稻日本晴或煙草NC89。