[發明專利]一種啟動子BgIosP569、制備方法及應用

有效

• 申請號: 201010614893.0
• 申請日: 2010-12-30
• 公開（公告）號: CN102146388A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發明（設計）人: 楊爽;孫紅正;李寧;倪雪梅
• 申請（專利權）人: 深圳華大基因科技有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/11;C12N15/10;A01H4/00;A01H5/00;C12R1/19;C12R1/01
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1.一種啟動子，所述啟動子含有選自以下任意一組并具有啟動子功能的核苷酸序列：

a、Seq?ID?No.1所示的核苷酸序列；

b、與Seq?ID?No.1互補的核苷酸序列；

c、在高等嚴緊條件下能夠與上述a或b的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；

d、對上述a或b所示核苷酸序列進行一個或多個堿基的取代、缺失、添加修飾的核苷酸序列；

e、與上述a或b所示核苷酸序列具有至少90％同一性的核苷酸序列。

2.一種核酸構建體，包含權利要求1所述的啟動子，與啟動子可操作連接的基因序列，其中所述啟動子與所述基因序列來源相同或者不同。

3.一種載體，其特征在于：所述載體含有權利要求1所述的啟動子或權利要求2所述的核酸構建體，優選的，所述載體為權利要求1所述的啟動子或權利要求2所述的核酸構建體與pMD18-T或p8質粒經重組得到的重組載體。

4.一種重組細胞，其特征在于：所述細胞含有權利要求1所述的啟動子或權利要求2所述的核酸構建體或權利要求3所述的載體，優選的，所述重組細胞為重組大腸桿菌細胞或重組農桿菌細胞。

5.一種含有權利要求1的啟動子或權利要求2的核酸構建體或權利要求3的載體或權利要求4的重組細胞的植物愈傷組織或植物外植體或植物，優選的，所述植物為單子葉植物或雙子葉植物，再優選的，所述植物為稻屬或煙草屬，更優選的，所述植物為水稻或煙草，進一步優選的，所述植物為水稻日本晴或煙草NC89。

6.一組引物對，所述引物對用于擴增得到權利要求1所述的啟動子，其特征在于：所述引物對的兩條引物分別含有Seq?ID?No：2和Seq?ID?No：3所示的序列，優選的，所述引物對的兩條引物在5’端還分別連接有限制性酶切位點和/或保護堿基，更優選的，所述引物對的兩條引物分別具有Seq?ID?No：4和Seq?ID?No：5所示的序列。

7.制備SEQ?ID?NO：1所示的啟動子的方法，包括

以水稻日本晴基因組DNA為模板，使用一對擴增引物進行擴增，所述擴增引物根據SEQ?ID?NO：1在水稻日本晴gDNA中的序列分別針對首尾進行設計，優選是權利要求6所述的引物對。

8.一種調控植物中基因表達的方法，所述方法包括，將權利要求1所述的啟動子或權利要求2的核酸構建體或權利要求3的載體或權利要求4的重組細胞導入植物，優選導入植物愈傷組織，

優選的，所述植物為單子葉植物或雙子葉植物，

再優選的，所述植物為稻屬或煙草屬，

更優選的，所述植物為水稻或煙草，

進一步優選的，所述植物為水稻日本晴或煙草NC89。

9.一種制備轉基因植物的方法，包括在有效產生植物的條件下培養權利要求4的重組細胞或權利要求5的植物愈傷組織或植物外植體或植物。

10.權利要求1所述的啟動子或權利要求2的核酸構建體或者權利要求3的載體或權利要求4的重組細胞或權利要求5的植物愈傷組織或植物外植體或植物在調控植物中目的基因表達或植物育種中的用途，植物優選是單子葉植物或雙子葉植物，再優選為稻屬或煙草屬，更優選為水稻或煙草，更進一步優選為水稻日本晴或煙草NC89。