[發(fā)明專利]腦脊液多次采集手術(shù)模型的構(gòu)建方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010610122.4
• 申請日: 2010-12-28
• 公開（公告）號: CN102038560A
• 公開（公告）日: 2011-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 辛艷飛;宣堯仙;張升;顧利強;陳國燦;周國亮;徐潘生;溫磊;盧祺炯;張城達
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省醫(yī)學科學院
• 主分類號: A61D1/00
• 分類號: A61D1/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及腦脊液采集方法領(lǐng)域，具體涉及一種腦脊液多次采集手術(shù)模型的構(gòu)建方法。

背景技術(shù)

腦脊液(Cerebrospinal?fluid，CSF)是充滿在各腦室、蛛網(wǎng)膜下腔和脊髓中央管內(nèi)的無色透明的液體，性質(zhì)與血漿和淋巴液的性質(zhì)相似，略帶粘性，用于供應腦細胞一定的營養(yǎng)、運走腦組織的代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的酸堿平衡并緩沖腦和脊髓的壓力，對腦和脊髓具有保護和支持作用。因此研究藥物是否能有效的通過血腦屏障可以通過檢測藥物在腦脊液中的含量來探索。

腦脊液的采集為臨床試驗與非臨床研究共同的手術(shù)難題，腦是哺乳動物生命中樞和許多重要中樞聚集的場所，所以即使顱內(nèi)富含著腦脊液，為保證生命安全，在臨床試驗中腦脊液的采集方法往往選擇穿刺脊椎法。目前腦脊液的采集多為一次性采集，且動物模型以大、小鼠為主。在非臨床研究中，大多數(shù)實驗選擇用穿刺針從實驗動物頸部刺入，到達延髓池采集。

在做藥物在機體內(nèi)的代謝動力學研究時，多采用分批采集不同個體動物的方法滿足多時間點的藥物數(shù)據(jù)。這種代替方法限制了藥動學/藥效學(PK/PD)試驗的科學性。因此利用犬或其他動物建立新的類非嚙齒動物腦脊液多次采集手術(shù)模型對生物醫(yī)藥研究顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種腦脊液多次采集手術(shù)模型的構(gòu)建方法，該方法操作簡單，易于控制，實現(xiàn)了對腦脊液的多次采集。

一種腦脊液多次采集手術(shù)模型的構(gòu)建方法，包括以下步驟：

將動物麻醉后，在動物顱骨平面結(jié)構(gòu)上定位手術(shù)鉆孔，在所述的鉆孔中經(jīng)外套管穿刺針穿刺、埋入引流管并固定引流管，通過引流管多次采集腦脊液。

所述的鉆孔的直徑不宜太大，以避免造成過大的創(chuàng)面，優(yōu)選為2mm～5mm。

為保證穿刺針順利通過顱骨，并準確到達小腦窩，所述的鉆孔對準生理狹縫，鉆孔的方向應與穿刺方向一致。

所述的鉆孔優(yōu)選位于顱骨平面中心。

所述的外套管穿刺針穿刺前在針內(nèi)填充鈍頭內(nèi)針，針頭放至已鉆好的孔內(nèi)，穿刺時穿刺針沿生理狹縫向下方30°～45°刺入到達小腦窩，深入約3～5cm。

所述的穿刺針針頭到達小腦窩后拔出內(nèi)針，將引流管插入針孔內(nèi)，固定引流管將穿刺針緩緩拔出，用醫(yī)用生物膠固定引流管顱骨外端部分，露出數(shù)厘米引流管以備采集腦脊液，縫合肌肉和頭皮，保證引流管固定牢固，內(nèi)部通暢。犬術(shù)后恢復12小時以上。

所述的引流管可選用引流聚乙烯塑料(PE)管。

所述的動物為非嚙齒類動物，優(yōu)選為犬。

所述的采集腦脊液的時間為動物恢復12小時以上，采集腦脊液所用的裝置可為注射器等抽取式裝置。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點：

本發(fā)明方法實現(xiàn)了在小腦窩處采集腦脊液，因為小腦窩是顱內(nèi)一個較大的空腔，其儲存腦脊液能力相對較高；并且小腦窩為顱骨最下端的低洼空腔，手術(shù)鉆孔在顱骨上方，因此無論動物清醒狀態(tài)或是麻醉狀態(tài)腦脊液都不會因手術(shù)缺口而流失。

本發(fā)明方法為毒代、藥代等藥理試驗提供了更加有效合理的腦脊液采集新模型，實現(xiàn)了對腦脊液的多次采集。該方法中動物的手術(shù)存活率可達80％，模型成功率可達60％，說明該模型構(gòu)建方法設(shè)計合理，有利于腦脊液的多次采集。

附圖說明

圖1為犬頭部骨骼的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2為犬頭部骨骼的側(cè)面結(jié)構(gòu)示意圖；

其中，1為額骨；2為顴骨顳突；3為眼窩；4為頂間骨；5為頂骨；6為鉆孔處；7為顳骨顴突；8為咬肌窩；9為部分小腦窩；10為剩余小腦窩。

具體實施方式

現(xiàn)將本發(fā)明的具體實施例進一步敘述于后。

實施例1

如圖1和圖2所示，犬頭部骨骼的結(jié)構(gòu)包括：額骨1；顴骨顳突2；眼窩3；頂間骨4；頂骨5；鉆孔處6；顳骨顴突7；咬肌窩8；小腦窩9和10。

Beagle犬靜脈注射3％的戊巴比妥鈉溶液(1ml/kg)麻醉后，俯臥固定于手術(shù)臺上。喉嚨處用軟枕墊起使枕骨朝上，固定Beagle犬頭部。以Beagle犬枕骨為中心，將犬枕骨左后側(cè)毛剃去。用手術(shù)刀在離枕骨2～3cm處剃毛區(qū)域劃開一條2cm左右的橫向切口。用手術(shù)分離器械鈍性分離犬顱骨平面上方筋膜暴露顱骨上方肌肉群。順著肌肉紋路垂直顱骨平面向下分離肌肉直至顱骨暴露。確定顱骨平面中心即鉆孔處6，用顱骨鉆在中心鉆出2～5mm的孔，孔周圍為直徑2cm左右的顱骨平面。為保證穿刺針順利通過顱骨，并準確到達小腦窩9或10，鉆孔方向應與穿刺方向一致，鉆孔對準生理狹縫，犬腦組織中小腦與大腦鏈接處為生理狹縫。