[發(fā)明專(zhuān)利]法倔唑在誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途仓械膽?yīng)用及其誘導(dǎo)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010609414.6
• 申請(qǐng)日: 2010-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102068429B
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王德壽;黃寶鋒;孫運(yùn)侶;劉智皓;楊世杰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 西南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A61K31/437
• 分類(lèi)號(hào): A61K31/437;A61P5/32;A01K61/00
• 代理公司: 北京同恒源知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于魚(yú)類(lèi)遺傳育種技術(shù)領(lǐng)域，涉及芳香化酶抑制劑法倔唑（Fadrozole）在誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途仓械膽?yīng)用，以及利用法倔唑誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途驳姆椒ā?

背景技術(shù)

羅非魚(yú)又稱(chēng)非洲鯽魚(yú)，具有食性雜、生長(zhǎng)快、繁殖強(qiáng)、味道鮮美且肌間刺少等優(yōu)良特征，現(xiàn)已成為世界性主要養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)之一，主要養(yǎng)殖品種有莫桑比克羅非魚(yú)、尼羅羅非魚(yú)、奧利亞羅非魚(yú)和吉富羅非魚(yú)等。近年來(lái)，全球羅非魚(yú)養(yǎng)殖產(chǎn)量逐年遞增，我國(guó)羅非魚(yú)產(chǎn)量已由1987年的不足3.5萬(wàn)噸增長(zhǎng)到2007年的113萬(wàn)噸，占世界產(chǎn)量的43.5%，2010年還有望達(dá)到120萬(wàn)噸。目前，我國(guó)已成為全球最大的羅非魚(yú)生產(chǎn)國(guó)和出口國(guó)。

在羅非魚(yú)的養(yǎng)殖過(guò)程中，由于雌魚(yú)3個(gè)月性腺已明顯分化為卵巢，8個(gè)月左右達(dá)到性成熟，每15-20天就要繁殖一次，將會(huì)在池塘里產(chǎn)生大量小羅非魚(yú)，而小羅非魚(yú)會(huì)競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、溶氧及空間，且在年終不能長(zhǎng)成商品規(guī)格，從而會(huì)大大影響羅非魚(yú)養(yǎng)殖的產(chǎn)量和效益。因此，如果能夠在養(yǎng)殖過(guò)程中人工控制羅非魚(yú)的性別，對(duì)雌性羅非魚(yú)進(jìn)行性逆轉(zhuǎn)，將大大提高羅非魚(yú)的養(yǎng)殖產(chǎn)量，降低養(yǎng)殖成本，提高經(jīng)濟(jì)效益。

目前，對(duì)羅非魚(yú)進(jìn)行性逆轉(zhuǎn)大多數(shù)是在羅非魚(yú)性別決定與分化的敏感期進(jìn)行激素處理，以誘導(dǎo)完全的性逆轉(zhuǎn)。但由于羅非魚(yú)性別決定與分化的敏感期非常短（通常僅孵化后3-5天），不容易把握，且此時(shí)魚(yú)體較小，抵抗力弱，激素處理會(huì)對(duì)魚(yú)體產(chǎn)生一定損害甚至導(dǎo)致魚(yú)體死亡，從而使性逆轉(zhuǎn)魚(yú)的獲得率大大降低。而如何通過(guò)人為因素在雌性羅非魚(yú)性腺已明顯分化為卵巢后，再誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途玻形匆?jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。

芳香化酶是類(lèi)固醇激素合成的末端限速酶，直接參與調(diào)控雌激素的合成。有文獻(xiàn)報(bào)道，在魚(yú)類(lèi)性腺分化前，注射芳香化酶抑制劑能夠阻斷魚(yú)體內(nèi)雌激素合成，將遺傳性別為雌性的個(gè)體逆轉(zhuǎn)為表型性別為雄性的個(gè)體，使性腺發(fā)育為功能性精巢。但在雌魚(yú)性腺已分化為卵巢后，芳香化酶抑制劑還能否誘導(dǎo)其已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途玻駷橹箛?guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于考察芳香化酶抑制劑是否能夠誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途玻瑥亩⒁环N誘導(dǎo)羅非魚(yú)由雌性個(gè)體向雄性個(gè)體性逆轉(zhuǎn)的新方法，為研究羅非魚(yú)性別決定與分化的分子機(jī)制提供可靠的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停瑫r(shí)為羅非魚(yú)性別控制和單性育種研究開(kāi)辟新的技術(shù)途徑。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明考察了芳香化酶抑制劑法倔唑（Fadrozole）對(duì)誘導(dǎo)尼羅羅非魚(yú)（Oreochromis?niloticus）已分化卵巢向功能型精巢轉(zhuǎn)化的影響，結(jié)果顯示，向性腺已明顯分化為卵巢的3月齡雌性尼羅羅非魚(yú)投喂含有法倔唑的餌料，法倔唑含量為400μg/g，連續(xù)投喂90天，可以誘導(dǎo)尼羅羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途病Ｓ纱耍景l(fā)明提供如下技術(shù)方案：

1、法倔唑在誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途仓械膽?yīng)用。

進(jìn)一步，所述羅非魚(yú)為尼羅羅非魚(yú)。

2、利用法倔唑誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途驳姆椒ǎ窍蛐韵僖逊只癁槁殉驳拇菩粤_非魚(yú)連續(xù)投喂含有法倔唑的餌料，直至卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途病?

當(dāng)所述羅非魚(yú)為尼羅羅非魚(yú)時(shí)，上述方法可以具體為：向3月齡的雌性尼羅羅非魚(yú)投喂含有法倔唑的餌料，法倔唑含量為400μg/g，連續(xù)投喂90天。

3、用于誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄途驳酿D料，其中含有法倔唑。

當(dāng)所述羅非魚(yú)為尼羅羅非魚(yú)時(shí)，上述餌料中法倔唑的含量為400μg/g。

本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明利用芳香化酶抑制劑法倔唑誘導(dǎo)羅非魚(yú)已分化卵巢轉(zhuǎn)變?yōu)楣δ苄跃玻@是在整個(gè)脊椎動(dòng)物除了天然性逆轉(zhuǎn)種類(lèi)外，首次通過(guò)人為因素實(shí)現(xiàn)已分化卵巢再分化為功能型精巢，建立了誘導(dǎo)羅非魚(yú)由雌性個(gè)體向雄性個(gè)體性逆轉(zhuǎn)的新方法，不僅為研究羅非魚(yú)性別決定與分化的分子機(jī)制提供了可靠的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停覟榱_非魚(yú)性別控制和單性育種開(kāi)辟了新的技術(shù)途徑，適宜在羅非魚(yú)以及其他養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)上推廣應(yīng)用，對(duì)養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)性別控制和單性育種具有重要意義和應(yīng)用價(jià)值。

附圖說(shuō)明

圖1為投喂含有法倔唑的餌料誘導(dǎo)3月齡雌性尼羅羅非魚(yú)性逆轉(zhuǎn)過(guò)程中不同階段的性腺組織學(xué)觀察（H.E染色），其中圖A為3月齡正常雌魚(yú)卵巢結(jié)構(gòu)；圖B為3月齡正常雄魚(yú)精巢結(jié)構(gòu)；圖C為3月齡正常雌魚(yú)經(jīng)法倔唑誘導(dǎo)70天后的性腺結(jié)構(gòu)；圖D為3月齡正常雌魚(yú)經(jīng)法倔唑誘導(dǎo)90天后的性腺結(jié)構(gòu)；圖A和圖B的標(biāo)尺為20μm，圖C和圖D的標(biāo)尺為10μm。

具體實(shí)施方式