[發明專利]一種交替假單胞菌及其產右旋糖苷酶的方法與產品

無效

• 申請號: 201010609348.2
• 申請日: 2010-12-28
• 公開（公告）號: CN102154158A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 呂明生;王淑軍;房耀維;劉姝;焦豫良;李瑛;曹茜
• 申請（專利權）人: 淮海工學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/26;C12N9/44
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 劉喜蓮

技術領域

本發明涉及一種微生物，特別是一種分離自中國江蘇省連云港海域的交替假單胞菌LP602（Pseudoalteromonassp.?LP602）CGMCC?N0.4319（已于2010年11月10日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏編號為CGMCC?N0.4319）；本發明還涉及該菌株產右旋糖苷酶的方法及其產品。

背景技術

右旋糖苷（Dextean）主要是α-1,6-糖苷鍵連接的葡萄糖。右旋糖苷酶（Dextranase,α-D-1,6-Glucan-6-D-Glucanohydrolase,?EC3.2.1.11），又叫α-葡聚糖酶，是專一切割右旋糖苷中α-1,6糖苷鍵的水解酶。

目前國內外報道的產生右旋糖苷酶微生物主要為青霉（Penicilliumsp.）、斯達油脂酵母（Lipomyces?starkeyi）、對角毛殼菌（Chaetomium?gracile）、曲霉（Aspergillus?ustus）、芽孢桿菌（Bacillus?sp.）、鏈球菌（Streptococcus?sp.）均能產生右旋糖苷酶。

右旋糖苷酶有很重要的應用價值，右旋糖苷酶在制糖工業中降解多糖聚合物，降低多糖的相對分子質量，從而降低糖的黏性。右旋糖苷酶還可以用于口腔醫用制品和代血漿右旋糖苷的酶法生產。

右旋糖苷酶在口腔醫用制品中的應用?？谇恢械募毦l酵食物中的蔗糖，生成右旋糖苷（α-D-glucan）。右旋糖苷在牙齒面形成牙菌斑，它是導致細菌在牙齒表面積累的決定因素。菌斑中微生物則在網狀結構保護下大量繁殖，其酸性代謝物破壞牙釉質，從而導致齲齒，造成無法再生的牙齒損傷，同時也給患者帶來巨大痛苦。牙菌斑是齲齒和牙周病重要的致病因素之一。因此為了預防和控制齲齒和牙周病，抑制牙菌斑的發生和發展是至關重要的。

右旋糖苷由α-1,4、α-1,3、以及α-1,6糖苷鍵構成，其中α-1,6糖苷鍵形成的側鏈決定其粘附性，而這種粘附性是形成菌斑和齲齒的重要物化因素。右旋糖苷通過其粘附性相互交聯，形成保護性網狀結構，使得其中微生物，特別是具有齲齒形成能力的鏈球菌非常容易滋生。

由于右旋糖苷在牙齒表面或縫隙中形成堅固的并具有一定韌性的菌斑結構，這種保護性結構使得具有齲齒形成能力的微生物很難根除，因此傳統的牙刷、牙線等物理治療方法難以杜絕齲齒損害。普通的化學口腔護理劑中通常含有硼酸、甲硝唑、西吡氯銨、氯己定、碘酒、乙醇等化合物，通常情況下以及口腔粘膜破損的情況下，這些物質可能會引起副反應，增加病人的痛苦。

右旋糖苷酶可以降解口腔中的右旋糖苷。右旋糖苷酶是一種生物制劑，使用和保存簡便易行。無毒性，無耐藥性，不影響口腔內的生物生態平衡，對不會刷牙的嬰幼兒和不具備洗漱條件的情況下，是一種良好的預防牙齲齒斑的制劑。而每個人飯后，尤其是食糖后應用添加有此酶的漱口劑，是一項很好的抑制菌斑形成，預防齲齒和牙周病的有效措施。近幾年各國在這一領域已作了深入研究，將具有降解菌齒斑能力的右旋糖苷酶添加到牙膏、漱口水和口香糖中，取得了良好的防治齲齒的效果。

右旋糖苷酶在代血漿右旋糖苷的酶法生產中的應用。右旋糖苷主要用作血漿增量劑，即代血漿。目前醫藥上用的右旋糖苷有中分子量和低分子量兩種，中分子量限于70000左右，低分子量的為40000。目前，藥用右旋糖苷的生產主要是采用酸水解法，條件激烈，得率低，要求生產設備條件苛刻，如能采用酶法生產，可提高產率，降低成本。

國外對這兩個領域的研究與應用均有報道，但國內目前相關研究較少，經查新尚無海洋來源右旋糖苷酶應用于醫學制品的相關專利。而且國外的右旋糖苷酶制品的生產菌株多為陸源的真菌，例如Lipomyces?starkeyi等，其酶活性參數不甚理想。這是由于陸源的右旋糖苷酶最適溫度較高，并且在比較溫和的酸堿條件下發揮作用，不耐有機溶劑。而海洋來源的右旋糖苷酶可以在極端條件下發揮作用，例如低溫、極端pH、高鹽、有機溶劑，這為開發出更多新型海洋生物醫用材料提供了最佳的條件。當今國內外對海洋微生物產右旋糖苷酶用于生物醫學制品的開發研究尚未見報道。

雖然我國酶制劑市場增長較快，但是海洋來源酶制劑研究不足。我國酶制劑研究多集中在食品、工業、農業中，但是對于醫藥用酶研究不足。我國對于海洋來源的右旋糖苷酶的酶學性質研究以及工業化應用研究，尤其是在生物醫學上的應用研究起步較晚。

發明內容