[發明專利]一種腫瘤化療藥物的蛋白增敏劑

有效

• 申請號: 201010608978.8
• 申請日: 2010-12-28
• 公開（公告）號: CN102366627A
• 公開（公告）日: 2012-03-07
• 發明（設計）人: 馬興元;許玉馨;鄭文云;朱玲
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61K47/48;A61P35/00;A61K31/337;A61K31/704
• 代理公司: 上海翼勝專利商標事務所(普通合伙) 31218
• 代理人: 翟羽

技術領域

本發明涉及生物藥物學領域，更具體地講，本發明涉及一種針對腫瘤化學治療的新型增效物質。

背景技術

多年來經過對腫瘤不懈努力的研究，人們發現腫瘤細胞產生的耐藥性是治療腫瘤的主要絆腳石。統計表明，腫瘤年死亡率中，約90%以上的腫瘤患者死因都與耐藥有關?；瘜W藥物在殺死腫瘤細胞的同時，也存在細胞毒性，損害正常組織器官，降低機體免疫功能等毒副反應，影響化療效果，甚至被迫放棄化療。

目前，為了改善化療和放療效果，研究主要集中在逆轉藥物或增敏藥物上，希望通過耐藥的發生機制，尋找可能應用于臨床的腫瘤多藥耐藥逆轉藥物，以期對腫瘤的有效治療取得重大突破?，F在，人們已經從基因分子水平研究了若干耐藥的產生機制，盡管目前發現的癌癥治療的潛在靶標不少，但是我們只知道部分在癌癥異常表達的一些分子及其維持癌癥的復雜的途徑交叉，例如：生存素（Survivin）就是目前腫瘤治療靶標的典型代表，在各種癌癥中特異性高表達，而在成人終末分化組織中一般不表達或低表達。Survivin參與細胞凋亡的抑制、細胞周期的調控、血管的再生，同時還參與多個途徑中的調節、轉錄和修飾基因直接或間接相互作用，參與腫瘤細胞的耐藥機制，是一個重要的節點蛋白。

生物類藥物由于其特異性、低毒、以其對腫瘤耐藥機制的有效干擾，而成為有效解決腫瘤多藥耐藥性的新的希望。

公開號CN?1710080A利用質粒構建并重組腺病毒，蛋白質序列53位氨基酸D突變為A，證明該發明可以在多個細胞中強烈誘導細胞凋亡；公開號CN?1869042A利用靶向survivin基因的siRNA阻斷腫瘤細胞內正常survivin的表達，產生對腫瘤細胞促凋亡能力。以上專利均屬于核酸水平抑制survivin正常功能，在機體內穩定性低，容易被降解，分子水平有可能產生非特異性沉默及脫靶現象，因此我們需要轉染率高、易生產、穩定性高、風險性低，治療效果強的基因重組藥物克服目前腫瘤治療過程中的瓶頸。

作為本發明的前期研究，中國專利：200510026847.8（授權公告號：CN?100424096C）公開了生存素Survivin突變體及其制備方法和初步功能，揭示Survivin突變體融合蛋白TmSm對癌細胞有明顯的促凋亡作用，但并沒有涉及其與腫瘤化療藥物聯合使用時的效果。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠有效促進腫瘤化療藥物對腫瘤細胞的殺傷作用、降低化學藥物使用劑量，因此具有化療增敏效果的基因工程蛋白增敏劑。

本發明的第二個目的是提供腫瘤化療藥物的蛋白增敏劑在促進腫瘤化療藥物對腫瘤細胞的殺傷作用中的應用。

為實現以上目的，本發明公開以下技術方案：一種腫瘤化療藥物的蛋白增敏劑，所述蛋白增敏劑包括Survivin突變體蛋白（本發明中簡稱TmSm），所述Survivin突變體蛋白通過基因工程制備，與survivin具有90%的同源性，所述Survivin突變體蛋白包括20位、34位、84位、117位位點單點突變、多點突變、組合突變，以及以上位點同時突變。?

所述Survivin突變體蛋白優選第34位突變，本發明中第34位突變體代號為TATm-Survivin(T34A)。

所述蛋白增敏劑包括藥學允許的載體系統，所述載體系統指TATm、TAT33m或者碳納米管。TATm、TAT33m都是指轉導蛋白TAT的不同突變形式，他們分別具有與天然TAT有5倍和33倍的轉導效果,?碳納米管是目前用于轉導藥物的一種常用碳納米材料。

所述腫瘤化療藥物的蛋白增敏劑在促進腫瘤化療藥物對腫瘤細胞的殺傷作用中的應用。所述蛋白增敏劑聯合腫瘤化療藥物使用，所述腫瘤化療藥物是指阿霉素、表阿霉素、柔紅霉素或者紫杉醇中的一種或幾種；所述腫瘤是指乳腺癌、肝癌、肺癌、上皮細胞癌或者白血病。

本發明所述Survivin突變體蛋白的制備方法及其基因序列參照中國專利ZL?200510026847.8。?

本發明的優點在于：重組蛋白TmSm在本實驗室前期研究中發現其對癌細胞具有快速、顯著的抑生長和促凋亡活性，而不影響正常細胞生長。本發明中根據survivin蛋白在細胞信號通路中的特殊作用以及其對多藥耐藥逆轉的影響，將化療藥物（也稱化學藥物）與TmSm聯合使用，發現TmSm能有效促進化學藥物的殺傷作用，有效降低化學藥物的使用量，增加化學藥物對細胞的殺傷作用，是一種有效的腫瘤化療的增敏劑。