[發明專利]能防治茄子青枯病的拮抗菌及其微生物有機肥料

有效

• 申請號: 201010608576.8
• 申請日: 2010-12-28
• 公開（公告）號: CN102168046A
• 公開（公告）日: 2011-08-31
• 發明（設計）人: 沈其榮;喬煥英;丁傳雨;陳巍;冉煒;楊興明
• 申請（專利權）人: 南京農業大學;江蘇新天地生物肥料工程中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C05F17/00;C12R1/125
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

一、技術領域

本發明涉及能防治茄子青枯病的拮抗菌及其微生物有機肥料，屬于農業集約化生產技術，專用于防治茄子青枯病問題。

二、背景技術

茄子青枯病是由茄科勞爾氏菌(Ralstonia?solanacearum)?侵染所致，是一種細菌性土傳疾病。茄子在世界各地均有栽培，茄子青枯病已成為影響茄子高產的主要障礙，在我國，主要是長江流域普遍受其為害，一般可減產20?%~30?%，嚴重時損失50?%~60?%。特別是近年來隨著蔬菜生產集約化程度的提高，該病已成為茄子的主要病害，而且很難根除，迄今為止還沒有發現有效的殺菌劑。

另一方面，水稻、小麥、玉米、油菜等作物秸稈就地焚燒、規模化養殖后的畜禽糞便隨地棄置等，使大量的養分資源流失于土壤-植物系統之外，不僅嚴重污染了環境，也極大地浪費了能作為有機肥和生物有機肥生產原料的有機物資源，不利于我國農業的可持續發展。如何將從土壤中因作物收獲而取走的營養元素最大限度地歸還到土壤中去，唯一的途徑就是將這些固體有機廢棄物制成商品有機肥料再施入土壤。將這些固體有機廢棄物經過高溫發酵合成高品位的有機堆肥，再用作功能菌的載體，制成功能明確的微生物有機肥料，具有廣闊的應用前景。

三、發明內容

1.?技術問題??

本發明的目的在于研制一種能防治茄子青枯病的微生物有機肥料，對茄子青枯病的防治效率達到80%以上，使大量的茄子連作障礙土壤得到生物修復，確保集約化農業的順利發展。

技術方案

一株能克服或消除連作茄子青枯病的拮抗菌菌株II-36，屬于枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）。保藏日期?2010年9月14日，保藏號分別為CGMCC?NO.4158?；地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC）。

菌株II-36的主要生物學特性為：革蘭氏染色陽性G⁺，細胞為桿狀，過氧化氫酶陽性，淀粉水解陽性，V.P.反應陽性，甲基紅試驗陰性，纖維素分解陰性，明膠水解陽性，硝酸鹽還原陽性，吲哚試驗陽性，能利用檸檬酸鹽，能產氨，發酵葡萄糖產酸產氣，發酵L-阿拉伯糖、甘露糖只產酸。

用上述能防治茄子青枯病的拮抗菌菌株II-36所生產的微生物有機肥料中拮抗菌含量達1×10⁸?cfu·g^-1以上，全氮含量為4~5%（90%以上為有機氮），總氮磷鉀養分為6~10%、有機質含量為30~35%。其生產方法包括：

1）將拮抗菌II-36接種到改良牛肉膏液體培養基，分別進行發酵生產，發酵生產的條件為：培養溫度范圍30~35℃，攪拌速度為180~300?rpm，發酵中后期形成芽孢，使發酵液中含菌或芽孢量≥1×10¹⁰?cfu·ml^-1。所用改良牛肉膏培養液配制方法為：玉米粉5g，牛肉膏2g，氯化鈉5g，麩皮5g，土豆淀粉5g，定容至1000?ml，pH值調至7.2-7.4，121℃滅菌20?min。

2）將拮抗菌菌株II-36與腐熟后的豬糞堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物進行固體發酵，每噸固體有機物料中加入拮抗菌液50L，固體發酵過程中每天翻堆1次，使固體發酵溫度不超過50℃，一般發酵5天后結束，使拮抗菌含量達到1×10⁸?cfu·g^-1以上，獲得豬糞堆肥和菜粕微生物酶解混合物的拮抗菌II-36微生物有機肥料。其中：

腐熟后的豬糞堆肥：發芽指數為98%以上,有機質質量比含量≥35%，有機氮質量比含量為1.2-2%，含水量質量比25-30%。

菜粕的微生物酶解物制備方法為，將保藏號為CGMCC?NO.1543的嗜麥芽寡養單胞菌（Stenotrophomonas?maltophilia）菌株37-1發酵液加入到菜粕原料中，調節含水量55-65%和pH?6.0-7.5，進行開放式固體發酵，待發酵溫度上升至50℃時立即開始翻堆，以后每天翻堆，使堆溫始終維持在35-50℃共5天，固體發酵開始后，堆物的pH會不斷上升，每次翻堆時用含酸液體調節含水量和pH，使它們分別維持在55-65%和6.0-7.0，發酵終止時再用含酸液體進行噴灑，直至堆物pH調整為5.0，再進行低溫干燥或自然涼干，即為菜粕的微生物酶解物；