[發(fā)明專利]一株能防治馬鈴薯青枯病的拮抗菌及其微生物有機(jī)肥料

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010608565.X
• 申請(qǐng)日: 2010-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102174428A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-09-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈其榮;丁傳雨;陳巍;楊興明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué);江蘇新天地生物肥料工程中心有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C05G3/02;C05F17/00;C12R1/125
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株能防治馬鈴薯青枯病的拮抗菌及其微生物有機(jī)肥料，屬于農(nóng)業(yè)集約化生產(chǎn)技術(shù)，專用于防治馬鈴薯青枯病問(wèn)題。

二、背景技術(shù)

馬鈴薯青枯病是由茄科勞爾氏菌(Ralstonia?solanacearum)?侵染所致，是一種細(xì)菌性土傳病害，在高溫、高濕、多雨的條件下容易發(fā)生，主要分布于熱帶、亞熱帶和溫帶地區(qū)，一旦發(fā)生就難以控制，往往造成作物大面積死亡甚至絕收，是許多作物生產(chǎn)的主要限制因素。馬鈴薯在世界各地均有栽培，馬鈴薯青枯病已成為影響馬鈴薯高產(chǎn)的主要障礙。在印度，青枯病可使馬鈴薯產(chǎn)量損失24%～83%;在越南的河內(nèi)，馬鈴薯因青枯病造成的產(chǎn)量損失可達(dá)15%～20%。馬鈴薯青枯病也是我國(guó)福建、云南等南方馬鈴薯產(chǎn)區(qū)的主要細(xì)菌性病害，每年因此造成的產(chǎn)量損失大約在10%～15%?，發(fā)病嚴(yán)重的地塊產(chǎn)量損失可達(dá)80%乃至絕收。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其防治方法多種多樣，但由于這種病原體在環(huán)境中變異較多，加之該菌傳播途徑多，寄主范圍廣，尚沒(méi)有一種比較好的防治方法。

另一方面，水稻、小麥、玉米、油菜等作物秸稈就地焚燒、規(guī)模化養(yǎng)殖后的畜禽糞便隨地棄置等，使大量的養(yǎng)分資源流失于土壤-植物系統(tǒng)之外，不僅嚴(yán)重污染了環(huán)境，也極大地浪費(fèi)了能作為有機(jī)肥和生物有機(jī)肥生產(chǎn)原料的有機(jī)物資源，不利于我國(guó)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。如何將從土壤中因作物收獲而取走的營(yíng)養(yǎng)元素最大限度地歸還到土壤中去，唯一的途徑就是將這些固體有機(jī)廢棄物制成商品有機(jī)肥料再施入土壤。將這些固體有機(jī)廢棄物經(jīng)過(guò)高溫發(fā)酵合成高品位的有機(jī)堆肥，再用作功能菌的載體，制成功能明確的微生物有機(jī)肥料，具有廣闊的應(yīng)用前景。

三、發(fā)明內(nèi)容

1.?技術(shù)問(wèn)題

本發(fā)明的目的在于研制一種能防治馬鈴薯青枯病的微生物有機(jī)肥料，有效防治馬鈴薯青枯病，使大量的馬鈴薯連作障礙土壤得到生物修復(fù)，確保集約化農(nóng)業(yè)的順利發(fā)展。

技術(shù)方案

一株能克服或消除連作馬鈴薯青枯病的拮抗菌I-23，屬于枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）。保藏日期?2010年9月14日，保藏號(hào)為CGMCC?NO.4159?；地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（CGMCC）。

I-23的主要生物學(xué)特性為：革蘭氏染色陽(yáng)性G⁺，細(xì)胞為桿狀，芽孢中生，過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性，淀粉水解陽(yáng)性，V.P反應(yīng)陽(yáng)性，甲基紅試驗(yàn)陰性，纖維素分解陰性，明膠水解陽(yáng)性，硝酸鹽還原陽(yáng)性，吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性，不能利用檸檬酸鹽，能產(chǎn)氨，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，發(fā)酵木糖、L-阿拉伯糖、甘露糖只產(chǎn)酸。

用上述能防治馬鈴薯青枯病的I-23所生產(chǎn)的微生物有機(jī)肥料中拮抗菌含量達(dá)1×10⁸?cfu·g^-1以上，全氮含量為4~5%（90%以上為有機(jī)氮），總氮磷鉀養(yǎng)分為6~10%、有機(jī)質(zhì)含量為30~35%。其生產(chǎn)方法包括：

1）將拮抗菌I-23分別接種到改良牛肉膏液體培養(yǎng)基，進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)，發(fā)酵生產(chǎn)的條件為：培養(yǎng)溫度范圍30~35℃，攪拌速度為180~300?rpm，發(fā)酵中后期形成芽孢，使發(fā)酵液中含菌或芽孢量≥1×10¹⁰?cfu·ml^-1。所用改良牛肉膏培養(yǎng)液配制方法為：牛肉膏2g、玉米粉5g、麩皮5g、土豆淀粉5g、NaCl?5g，定容至1000?ml，pH值調(diào)至7.2-7.4，121℃滅菌20?min。

2）將拮抗菌I-23與腐熟后的豬糞堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物進(jìn)行固體發(fā)酵，每噸固體有機(jī)物料中加入拮抗菌液50L，固體發(fā)酵過(guò)程中每天翻堆1次，使固體發(fā)酵溫度不超過(guò)50℃，一般發(fā)酵5天后結(jié)束，使拮抗菌含量達(dá)到1×10⁸?cfu·g^-1以上，獲得拮抗菌I-23的微生物有機(jī)肥。該種微生物有機(jī)肥在溫度不超過(guò)60℃的條件下干燥至含水量低于30%，包裝出廠即為防治馬鈴薯青枯病的微生物有機(jī)肥料。其中：

腐熟后的豬糞堆肥：發(fā)芽指數(shù)為98%以上,有機(jī)質(zhì)質(zhì)量比含量≥35%，有機(jī)氮質(zhì)量比含量為1.2-2%，含水量質(zhì)量比25-30%。