[發(fā)明專利]EV71疫苗制備方法及通過該方法制備的疫苗

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010607576.6
• 申請日: 2010-12-23
• 公開（公告）號: CN102559615A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設計）人: 沈瓊;傅文彬;雷建強;張高峽
• 申請（專利權）人: 上海澤潤生物科技有限公司
• 主分類號: C12N7/04
• 分類號: C12N7/04;C12N15/41;C12N15/57;C12N15/81;C12N1/19;A61K39/125;A61P31/14;C12R1/84
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種制備EV71重組病毒樣顆粒的方法，該方法包括將EV71病毒P1前體蛋白編碼基因與3CD蛋白酶編碼基因克隆至畢赤酵母表達載體中，雙表達后得到形態(tài)均一穩(wěn)定且具有免疫原性的病毒樣顆粒。

2.權利要求1的方法，其中所述P1前體蛋白編碼基因的序列為SEQ?ID?NO：5，3CD蛋白酶編碼基因的序列為SEQ?ID?NO：6。

3.權利要求1或2的方法，其中所述P1前體蛋白編碼基因與3CD蛋白酶編碼基因通過不同表達載體克隆至畢赤酵母表達載體中。

4.權利要求3的方法，其中所述不同表達載體包含不同強度的啟動子。

5.權利要求4的方法，其中所述P1前體蛋白編碼基因的表達載體為在pPICZαB載體的BstBI/KpnI位點插入SEQ?ID?NO：5所構成的重組載體，所述3CD蛋白酶編碼基因的表達載體為在pPICZαB載體的BstBI/KpnI位點插入SEQ?ID?NO：6并將pAOX1啟動子替換為pYPT1啟動子所構成的重組載體。

6.通過前述權利要求任一項的方法制備的EV71重組病毒樣顆粒。

7.一種疫苗，其包含權利要求6的EV71重組病毒樣顆粒。

8.權利要求7的疫苗，還包含氫氧化鋁佐劑。

9.權利要求6的EV71重組病毒樣顆粒作為疫苗的用途。

10.一種DNA分子，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO：5或SEQ?IDNO：6。

11.一種重組載體，為包含權利要求10的核苷酸序列的pPICZαB載體。

12.權利要求11的重組載體，其中pAOX1啟動子被替換為pYPT1啟動子。

13.包含權利要求11或12的重組載體的畢赤酵母細胞。