[發明專利]鹽酸哌替啶檢測試劑盒及其制備方法

無效

• 申請號: 201010606643.2
• 申請日: 2010-12-27
• 公開（公告）號: CN102539764A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 楊利;李峰;陳立柱
• 申請（專利權）人: 北京庫爾科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種鹽酸哌替啶檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于由樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜、吸樣墊和PVC支撐板組成；所述樣品墊為玻璃纖維；所述膠體金墊為膠體金標記的鹽酸哌替啶單克隆抗體聚酯膜；所述硝酸纖維素膜上依次包被了鹽酸哌替啶-牛血清白蛋白偶聯抗原作為檢測線(T線)，羊抗鼠IgG多克隆抗體作為質控線(C線)；所述吸樣墊為吸水紙。

2.一種權利要求1所述的鹽酸哌替啶檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的鹽酸哌替啶單克隆抗體由鹽酸哌替啶-牛血清蛋白偶聯抗原作為免疫原免疫BALB/C小鼠獲得。

3.一種權利要求1所述的鹽酸哌替啶檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金是由氯金酸(HAuCl₄)在還原劑枸櫞酸三鈉作用下制成大小為20-40nm的膠體金顆粒。

4.一種權利要求1所述的鹽酸哌替啶檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金墊的制備方法為：取顆粒大小為20-40nm的膠體金溶液，用0.1mol/L?K₂CO₃將膠體金溶液的pH值調至7.0-8.5，室溫放置30分鐘；在上述溶液中加入鹽酸哌替啶單克隆抗體，使鹽酸哌替啶單克隆抗體的濃度為10-50μg/ml膠體金，混合均勻后，室溫放置30分鐘；加入10％的牛血清蛋白(BSA)溶液使其濃度為10-50μl/ml，混合均勻，室溫放置30分鐘；12000轉離心30分鐘，仔細吸取上清液，棄去，剩余的沉淀用初始膠體金體積的膠體金復溶液溶解；12000轉離心30分鐘，仔細吸取上清液，棄去，剩余的沉淀用30％-100％初始膠體金體積的膠體金復溶液溶解，得到鹽酸哌替啶單克隆抗體-膠體金標記物；將鹽酸哌替啶單克隆抗體-膠體金標記物按1mL鋪40-70cm²聚酯膜的比例均勻鋪在聚酯膜上，再置干燥間，在溫度38℃，濕度小于30％的條件下干燥24±2小時，制成膠體金墊。

5.一種權利要求1及權利要求5所述的鹽酸哌替啶檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金復溶液為含0.01-0.1％的Tris，1.0-3.0％的蔗糖、0.1-1.0％的BSA的0.02M?pH7.0-8.5的磷酸鹽緩沖溶液。

6.一種權利要求1所述的鹽酸哌替啶檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的硝酸纖維素膜上的兩條線的包被方法為：設定劃膜儀涂覆參數1μL/cm，分別用微量進樣器取濃度為0.5-4.0mg/ml的鹽酸哌替啶-牛血清蛋白偶聯抗原、取濃度為0.5-5.0mg/ml羊抗鼠IgG多克隆抗體，按順序接到劃膜儀的A、B管道接口。將貼有硝酸纖維素膜的PVC板置于劃膜儀的往復運動平臺上，開啟劃膜儀，在硝酸纖維素膜上涂覆鹽酸哌替啶-牛血清蛋白偶聯抗原(T線)、羊抗鼠IgG多克隆抗體(C線)。劃線后于溫度38℃的烘箱中干燥24±2小時，保存，備用。