[發(fā)明專利]一種提取分離桿菌肽的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010606585.3
• 申請日: 2010-12-27
• 公開（公告）號: CN102153633A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊宏;李軍;孫立文;陳軍
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇九陽生物制藥有限公司
• 主分類號: C07K14/32
• 分類號: C07K14/32;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22
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• 代理人: 暫無信息

1.一種提取分離桿菌肽的方法。其特征步驟如下：

(1)超濾提取分離桿菌肽濃縮液：桿菌肽發(fā)酵液經(jīng)過經(jīng)過酸化，如鹽酸、硫酸、草酸，震動篩過濾或離心去除菌體后，超濾去除菌體和大分子雜質(zhì)、樹脂吸附脫除無機鹽、真空蒸發(fā)濃縮得到桿菌肽濃縮液；

(2)桿菌肽濃縮液制備桿菌肽結(jié)晶體：桿菌肽濃縮液經(jīng)過溶劑萃取、脫色、納濾、結(jié)晶分離、干燥、粉碎、篩分、檢驗、成品包裝等生產(chǎn)步驟得到合格的桿菌肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取分離桿菌肽的方法，其特征在于所述的超濾去除雜質(zhì)是將桿菌肽發(fā)酵液直接用超濾膜過濾去除殘余的菌絲體、蛋白質(zhì)、糖、色素等生物大分子物質(zhì)，并用1～5倍的水洗滌菌渣中殘留的桿菌肽，再進行超濾，合并桿菌肽發(fā)酵液和殘余菌渣洗水兩部分超濾液，超濾所用的膜組件為無機膜組件，主要由1根、3根、7根、19根、37根無機膜組成的多通道、管式、平板式、蜂窩體等膜元件組成，膜材料為截留分子量5000～200000的陶瓷膜、沸石膜、玻璃膜。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取分離桿菌肽的方法，其特征在于所述的樹脂吸附所用的樹脂為弱酸陽離子大孔吸附樹脂，將桿菌肽超濾液用陽離子交換樹脂靜態(tài)吸附，樹脂選用Amberlite?IRC-50、Duolite?C-20、LewatitCNP80、D113、D152，樹脂洗脫劑選用親水性的低級醇類，如甲醇、乙醇；洗脫劑濃度為5％～45％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取分離桿菌肽的方法，其特征在于所述的真空蒸發(fā)濃縮是在10～40Kpa、30～60℃條件下減壓蒸發(fā)去除洗脫劑及部分水，得到桿菌肽含量大于3000u/ml桿菌肽濃縮液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取分離桿菌肽的方法，其特征在于所述的溶劑萃取所選擇的溶劑為低級脂肪酸酯類或低級脂肪醇類，如甲酸乙酯、乙酸乙酯、正丁醇，向桿菌肽濃縮液中加入1～4倍的萃取劑，并向有機相中加入1～3W/V％的活性炭脫色，調(diào)節(jié)pH至3.5～6.5，攪拌，過濾，得到桿菌肽脫色液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取分離桿菌肽的方法，其特征在于所述的桿菌肽脫色液納慮濃縮脫鹽，是將桿菌肽脫色液濃縮至效價大于5000u/ml，電導(dǎo)小于2000μs/cm。除菌過濾，噴霧干燥，得到效價大于65U/mg的桿菌肽。