[發明專利]一種格列苯脲、格列齊特和格列吡嗪三聯檢測卡及其檢測方法

有效

• 申請號: 201010606475.7
• 申請日: 2010-12-27
• 公開（公告）號: CN102012427A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 周堅;吳文曄;熊曉芳
• 申請（專利權）人: 無錫安迪生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N1/28
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一種格列苯脲、格列齊特和格列吡嗪三聯檢測卡，其特征在于：在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼（1）中設置測試條（2），檢測卡外殼表面有檢測窗孔（3）和加樣孔（4），測試條（2）是由支承背板（5）上通過不干膠在其上依次粘貼樣品墊（8）、膠體金膜（7）、（14）、（15）、硝酸纖維素膜（6）、和吸水膜（9）所組成；支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜（6），支承背板一端疊置粘貼吸水膜（9），另一端疊置粘貼樣品墊（8），吸水膜內端與樣品墊內端各自分別與硝酸纖維素膜搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼數段膠體金膜（7）、（14）、（15）；膠體金膜（7）、（14）、（15）依次是含抗格列苯脲抗體、抗格列齊特抗體、抗格列吡嗪抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有三條檢測帶和一條質控帶，依次是：含格列苯脲蛋白質偶聯物檢測帶（10），含格列齊特蛋白質偶聯物檢測帶（11），含格列吡嗪蛋白質偶聯物檢測帶（12），含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶（13）；測試條置入檢測卡外殼內，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。

2.權利要求1所述格列苯脲、格列齊特和格列吡嗪三聯檢測卡的檢測方法，其特征在于應用免疫學的方法直接檢測樣品中格列苯脲、格列齊特和格列吡嗪的含量，檢測樣品為膠囊、片劑或藥丸降糖中藥樣品，處理方法如下：

（1）隨機采集一定量的待測樣本，粉碎均勻；

（2）稱取5g粉碎后的樣品，加入10mL樣品抽提液，充分攪拌混合5min以上，震蕩反應30min；

抽提液配置如下：在70mL甲醇中加入30mL蒸餾水；

（3）將步驟（2）所得溶液移入10mL離心管，4000r/min離心10min，取離心后的上清液；上清液澄清，按上清液︰樣品稀釋液為1︰3的比例稀釋，即取上清液100μL加入300μL樣品稀釋液，混合均勻后測定；上清液渾濁，則用濾紙過濾，取過濾后的上清液，按上清液100μL加入300μL樣品稀釋液進行稀釋，混合均勻后測定；

樣品稀釋液為pH7.6、10mmol?PBST溶液；

檢測帶10、11、12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，表示檢測結果為陰性，說明被檢測樣品中格列苯脲、格列齊特和格列吡嗪含量沒有超過允許值；

??檢測帶10、11、12不顯示顏色，只有質控帶13顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲、格列齊特和格列吡嗪含量同時超過允許值；

??檢測帶10、11不顯示顏色，檢測帶12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲和格列齊特含量超過允許值，而格列吡嗪含量沒有超過允許值；

?檢測帶10、12不顯示顏色，檢測帶11和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲和格列吡嗪含量超過允許值，而格列齊特含量沒有超過允許值；

?檢測帶11、12不顯示顏色，檢測帶10和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列齊特和格列吡嗪含量超過允許值，而格列苯脲含量沒有超過允許值；

檢測帶10不顯示顏色，檢測帶11、12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲含量超過允許值，而格列齊特、格列吡嗪含量沒有超過允許值；

檢測帶11不顯示顏色，檢測帶10、12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列齊特含量超過允許值，而格列苯脲、格列吡嗪含量沒有超過允許值；

檢測帶12不顯示顏色，檢測帶10、11和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列吡嗪含量超過允許值，而格列苯脲、格列齊特含量沒有超過允許值；

檢測帶10、11、12和質控帶13均不顯色，則表明測試條失效。