[發(fā)明專利]一種全人工培養(yǎng)冬蟲夏草的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010604460.7
• 申請(qǐng)日: 2010-12-24
• 公開（公告）號(hào): CN102106235A
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王梅平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王梅平
• 主分類號(hào): A01G1/04
• 分類號(hào): A01G1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及冬蟲夏草的全人工培養(yǎng)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

冬蟲夏草是一種名貴的菌類中藥材，是中國被毛孢侵染只生長(zhǎng)在3500-5000公尺高寒灌叢草甸的蝙蝠蛾幼蟲產(chǎn)生的有性型。冬蟲夏草主要分布于我國西南、西北3500公尺以上的高原，主要產(chǎn)區(qū)是四川、青海、西藏及云貴高原。夏初子座出土、孢子未散發(fā)時(shí)挖取，除去包裹在蟲體外的菌絲體干燥。由于產(chǎn)區(qū)局限、產(chǎn)量稀少，國內(nèi)外的需求量日益增大，刺激亂采濫挖，生態(tài)破壞嚴(yán)重，致使冬蟲夏草產(chǎn)量急劇下降，價(jià)格直線上升，供求矛盾突出。

全人工培育冬蟲夏草是解決上述問題的方法之一。目前報(bào)道的全人工培養(yǎng)冬蟲夏草的文獻(xiàn)有：申請(qǐng)?zhí)枺?00410021927.X，授權(quán)公告號(hào)：CN1312271C，發(fā)明名稱：冬蟲夏草的全人工培養(yǎng)方法，申請(qǐng)日：2005年1月5日的發(fā)明專利中公開了一種冬蟲夏草的全人工冬蟲夏草的方法，其步驟為：

a，取樣：取冬蟲夏草樣本(Cordyceps?sinensis(Berk.)Sacc.)；

b，菌種分離：分別取冬蟲夏草的菌核部分、子座部分及子囊孢子進(jìn)行分離、培養(yǎng)得中國被毛孢(Hiesutella?Sinensis?Liu，Guo，Yu?et?Zeng.)，保藏號(hào)CCTCC?No.M871010；菌種分離是將菌核、子座部分經(jīng)表面消毒、無菌水沖洗后，將菌核及子座切成小段或薄片，或挑取子囊孢子置有分離培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，在8℃～20℃進(jìn)行分離、培養(yǎng)；所述的分離培養(yǎng)基為：馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、蛋白胨、水或者馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、蠶蛹汁、水；

c，寄主昆蟲采集、繁殖和飼養(yǎng)：寄主蝠蛾Hepialus?Spp.幼蟲首次采自海拔3500～5000公尺的高寒灌叢草甸，在人工條件下經(jīng)過化蛹、羽化為成蟲、交尾、產(chǎn)卵，孵化、幼蟲飼養(yǎng)循環(huán)進(jìn)行；

具體步驟為：

①寄主昆蟲的采集：寄主蝠蛾幼蟲首次采自海拔3500～5000公尺的高寒灌叢草甸；

②化蛹：化蛹期溫度為：10℃～18℃，濕度：45％～60％，蛹的歷期：20～50天；

③羽化：蛹的羽化溫度10℃～18℃，羽化的空氣相對(duì)濕度為80％～100％；

④成蟲、交尾：羽化后的成蟲即可交尾，通過人為幫助提高交尾率；

⑤產(chǎn)卵：交尾后的雌成蟲即行產(chǎn)卵，收集卵粒置容器養(yǎng)護(hù)；

⑥孵化：在10～18℃，相對(duì)濕度60～90％的條件下，經(jīng)20～55天即孵化；

⑦幼蟲飼養(yǎng)：幼蟲飼養(yǎng)溫度：8～18℃，濕度：40～50％；

d，侵染：將b步驟所得的菌絲體、分生孢子制成混懸液，侵染c步驟繁殖的蝠蛾幼蟲；

e，繼續(xù)飼養(yǎng)：將d步驟經(jīng)侵染后的幼蟲繼續(xù)飼養(yǎng)至呆滯狀態(tài)，經(jīng)低溫4～8℃，光照處理，至長(zhǎng)出子實(shí)體，即得人工培養(yǎng)的冬蟲夏草。

該方法可以實(shí)現(xiàn)冬蟲夏草的全人工培育，但是，使用該培育方法仍有許多不足之處：蝠蛾蛹不當(dāng)死亡率高、羽化率低；用于侵染的混懸液孢子含量低，不利于侵染；侵染方法機(jī)械化操作程度有待提高，侵染率較低，侵染后至幼蟲僵化的時(shí)間較長(zhǎng)，僵化幼蟲長(zhǎng)原基的時(shí)間參差不齊，工業(yè)化效率有待進(jìn)一步提高。

由于平原人工飼養(yǎng)寄主蝠蛾幼蟲難度較大、中國被毛孢遺傳育種和侵染方法等原因使得冬蟲夏草不能產(chǎn)業(yè)化，不能滿足市場(chǎng)對(duì)冬蟲夏草的需求。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決人工培育冬蟲夏草產(chǎn)量低的問題，本發(fā)明提供了一種新的全人工培育冬蟲夏草的技術(shù)方案。

本發(fā)明提供的新的全人工培育冬蟲夏草的技術(shù)方案為：一種冬蟲夏草的全人工培養(yǎng)方法，包括下列步驟：

a、中國被毛孢混懸液的制備：取保藏號(hào)為CCTCC?No.M87101的中國被毛孢Hirsutella?Sinensis?Liu，Guo，Yu?et?Zeng.，制備菌體和孢子的混懸液；

b、寄主昆蟲的采集、繁殖和飼養(yǎng)：首次采集不同產(chǎn)地的冬蟲夏草寄主蝠蛾蛹；在人工條件下，對(duì)寄主蝠蛾進(jìn)行蛹的養(yǎng)護(hù)、羽化、交尾、產(chǎn)卵、卵的養(yǎng)護(hù)、孵化、幼蟲飼養(yǎng)，且循環(huán)進(jìn)行；

c、侵染：取步驟b所述的蝠蛾幼蟲，用一端直徑小于0.2mm的針狀器具沾取步驟a的混懸液刺中蝠蛾幼蟲完成侵染；

d、繼續(xù)飼養(yǎng)：將步驟c經(jīng)侵染后的幼蟲繼續(xù)飼養(yǎng)至僵化，經(jīng)低溫4～8℃，光照處理，長(zhǎng)出子實(shí)體，直至子實(shí)體抽生到3～5厘米長(zhǎng)度，收獲，干燥處理，即得冬蟲夏草。

步驟a所述的制備菌體、孢子的混懸液的方法，包括下列步驟：