[發(fā)明專利]一種從香茶菜中提取純化香茶菜甲素的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010603877.1
• 申請日: 2010-12-24
• 公開（公告）號: CN102557906A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李法慶;劉東鋒
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07C49/513
• 分類號: C07C49/513;C07C45/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及藥物學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及一種應(yīng)用硅膠柱層析法和高速逆流色譜法從香茶菜中提取純化香茶菜甲素的方法。

背景技術(shù)：

香茶菜甲素是一種從分布于我國西南部特有的唇形科香茶菜屬植物大葉香茶菜Rabdosia?macrophylla(Migo)C.Y.Wu?et?H.W.Li、毛葉香茶菜R.japonica(Burm.f.)Hara、香茶菜R.amethystoides(Bemth.)Hara或藍萼香茶菜R.glaucocalyx(Maxim.)Hara的干燥全草中制備出的貝殼杉烷類化合物。具清熱解毒、活血破瘀、抗菌消炎、抗腫瘤和治療各種肝炎等功效。

周重陽等報道了香茶菜甲素的體外抗菌研究結(jié)果，表明香茶菜甲素對革蘭氏陰性菌和部分陽性菌都有抑制作用，而對福氏痢疾桿菌的作用又優(yōu)于黃連素。姚素華等從香茶萊中提取的香茶菜甲素的初步藥理研究結(jié)果表明，香茶菜甲素能明顯降低CCl₄引起的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶增高，而對正常動物SGPT活性無明顯影響，說明該藥對受損肝臟有較好保護作用，并非是由于對酶活性的直接抑制。

中國專利申請?zhí)?00910095183.9，采用HSCCC法從毛萼香茶菜粗提物中制備高純度的藥物化合物毛萼乙素，毛萼香茶菜粗提物的制備較簡單，雜質(zhì)多，這樣的粗提物直接進行高速逆流色譜分離，很難得到純度高的產(chǎn)品。

中國專利申請?zhí)?00710123274.X，公開了一種香茶菜的有效成分的制備方法，該明公開的工藝步驟是：用乙酸乙酯和乙醇混合溶液進行回流提取，提取液用硅膠柱層析，再用制備液相色譜繼續(xù)分離得到產(chǎn)品，該工藝方法溶劑使用量大。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點，采用硅膠柱層析法和高速逆流色譜法從香茶菜中提取純化香茶菜甲素的方法。該方法得到的香茶菜甲素含量高達98％。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種從香茶菜中提取純化香茶菜甲素的方法，其特征在于包括以下步驟：將香茶菜干燥藥材粉碎成粗粉，加入15-20倍量的70％丙酮-水溶液，加熱浸提，重復(fù)3-4次，合并浸提液，濃縮至原體積的1/20-1/5，加入適量硅膠拌勻，揮干溶劑，干法上硅膠柱，用乙酸乙酯-甲醇混合溶液洗脫，洗脫液濃縮至浸膏，用上相和下相的混合溶液溶解，進行高速逆流色譜分離，收集有效成分濃縮蒸干即得香茶菜甲素。

所述的熱浸提溫度選擇在45-70℃。

所述的拌樣硅膠使用量為藥材重量的3-8％。

所述的硅膠柱解析所用乙酸乙酯-甲醇混合溶液體積比為8-10∶1。

所述的高速逆流色譜法中的兩相溶劑系統(tǒng)為己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為4-5∶2-3∶3-4∶1-2，上相為固定相，下相為流動相，色譜儀轉(zhuǎn)速為700-1000r/min，流動相的流速為1.5-3.5ml/min。

相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明采用70％丙酮提取的方法，在濃縮的過程中，大量的色素變成沉淀，可過濾除去，使后續(xù)分離易于進行；采用熱浸提取可使藥材中有效成分提取完全，而且縮短提取周期，有利于提高生產(chǎn)效率；硅膠柱層析所用硅膠可反復(fù)使用多次，降低了成本；高速逆流色譜法無需載體，有效成分損失量小，高效，快速。

具體實施方式：

為了進一步說明本發(fā)明，下面給出本發(fā)明的具體實施例，但并不以此來限定本發(fā)明。

實施例1：

將香茶菜干燥藥材粉碎，取1kg，加入15L的70％丙酮-水溶液，加熱至5℃浸提4h，重復(fù)3次，合并浸提液，濃縮至原體積的1/5，加入30g硅膠拌勻，揮干溶劑，干法上硅膠柱，用5L乙酸乙酯-甲醇(10∶1)混合溶液洗脫，洗脫液濃縮至浸膏，按體積比4∶2∶3∶1取己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，超聲波振蕩混合，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，靜置分層，分出上下相，以上相為固定相，下相為流動相，上述浸膏用350ml上相和下相(1∶1)混合溶液溶解，將上相用泵以10ml/min的流量灌滿色譜柱，將柱的首端與進樣閥相接，開啟速度控制器，使螺旋管柱順時針方向旋轉(zhuǎn)，當色譜儀轉(zhuǎn)速為700r/min時，以流速為1.5ml/min泵入流動相，并通過進樣閥進樣，每次進樣量為150mg，收集流出液，減壓蒸干即得香茶菜甲素產(chǎn)品2.3g，99.3％。

實施例2：