[發明專利]一種納豆芽孢桿菌固態微生態制劑的制備方法

無效

• 申請號: 201010602927.4
• 申請日: 2010-12-13
• 公開（公告）號: CN102524531A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 徐權漢;張浩;李超;樊瑞峰
• 申請（專利權）人: 青島中仁藥業有限公司
• 主分類號: A23K1/16
• 分類號: A23K1/16;C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 青島高曉專利事務所 37104
• 代理人: 張世功

1.一種納豆芽孢桿菌固態微生態制劑的制備方法，其特征在于具體工藝步驟包括：

(1)菌種平板培養：納豆保存菌種劃線接種至平板培養基，其培養基配料為蛋白胨5g，牛肉膏3g，NaCl?5g，MnSO₄·H₂O?5mg，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，PH值為7，121℃滅菌，32℃培養30h；

(2)試管接種菌液：取發育健壯、菌落典型的菌株接種10ml，其培養基配料為蛋白胨5g，牛肉膏3g，NaCl?5g，MnSO₄·H₂O?5mg，蒸餾水1000ml，PH值為7，121℃滅菌，35℃培養24h；

(3)三角瓶接種100ml，其培養基同步驟(2)，121℃滅菌，35℃培養24h；

(4)三角瓶接種1000ml，其培養基同步驟(3)；

(5)10L種子發酵罐，培養液7L，培養基同步驟(3)，PH值為7，121℃滅菌30分鐘，培養溫度為37℃，時間為24h，轉速150r/min，通氣量2vvm，指每分鐘通入單位發酵體積m3的空氣體積m3；

(6)100L種子發酵罐，培養液100L，培養基按豆粕粉1g，魚粉1g，120目玉米粉0.5g，葡萄糖2g，NaCl0.2g，NaH₂PO₄0.3g，增效劑0.1g，水1000ml的比例配制，按步驟(5)方法培養，所選增效劑包括MgSO4、ZnSO4、FeSO4和CuSO4按等量配比而成；

(7)1000L發酵罐，培養基以步驟(6)中100L種子發酵罐的配比乘以七倍，發酵方法同步驟(5)，培養24h，培養制得液體菌液；

(8)固體基質的配制：花生殼或棉籽殼500kg，玉米粉150kg，豆粕粉200kg，麩皮100kg，葡萄糖5kg，攪拌混勻后加200kg水潤濕后蒸煮滅菌，待冷卻至35℃時，加入步驟(7)中的發酵液或液體菌液700kg，固體基質重量與液體菌液重量比為1∶1，攪拌均勻后裝盤，入無菌培養室，恒溫40℃，通風，淺盤發酵36小時，可見淺盤表面和內層均長滿白色菌體，提高溫度至60℃，加大風量，干燥，粉碎分裝，即得產品。