[發明專利]一種抗腫瘤組合物及其制備方法

有效

• 申請號: 201010601600.5
• 申請日: 2010-12-23
• 公開（公告）號: CN102078602A
• 公開（公告）日: 2011-06-01
• 發明（設計）人: 王正華
• 申請（專利權）人: 浙江千年春生物技術有限公司
• 主分類號: A61K38/51
• 分類號: A61K38/51;A61K35/64;A61P35/00;A61K38/43
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明涉及腫瘤治療領域，尤其涉及一種抗腫瘤組合物及其制備方法。

背景技術

大頭金蠅(Chrysomyia?megacephala)，別名紅頭蒼蠅，是節肢動物門有顎亞門昆蟲綱有翅亞綱雙翅目麗蠅科金蠅亞科昆蟲的一種。它食物轉化率高，生長速度快，繁殖力高，產卵期長，其蟲體的蛋白質含量高，飼養條件和養殖設備相對簡單，有利于大規模生產。

大頭金蠅是一種完全變態的昆蟲，生活史包括：卵→幼蟲→蛹→成蠅4個階段。大頭金蠅卵為淡黃色，呈香蕉型，長度約一毫米，一克卵大約有7000粒。幼蟲呈錐形，前端尖，后端鈍圓，有明顯的體節，體長為13～16毫米，一克幼蟲約有15條，在適宜的溫度環境下，成熟幼蟲1～2天就可以成蛹，蛹經過5天左右，即可羽化出成蟲。成蟲體長8～11毫米，金屬綠色，身被灰色，復眼紅色。

CN101032525A公開了一種從蠅蛆提取分離具有體外抗腫瘤作用的有效組分，該組份從外源物質誘導的蠅蛆中提取、分離獲得，具有抑制人原髓細胞白血病HL-60和人肺腺癌A549細胞增殖生長的作用，當受試物濃度為250MG/ML時，外源物質誘導的蠅蛆干粉及其不飽和脂肪酸體外抑制人原髓細胞白血病HL-60增殖生長的效果分別為25.5％與96.2％，抑制人肺腺癌A549細胞增殖生長的效果分別為26.8％與97.0％。該組合物制備方法復雜，療效欠佳。

發明內容

本發明提供了一種抗腫瘤組合物，該組合物對種腫瘤細胞均有抑制活性。

一種抗腫瘤組合物，由氨基酸序在NCBI數據庫中登錄號分別為Gi2148169、Gi?114236、Gi?2148173、Gi?8101742、Gi?2148175、Gi?157674463、Gi?4533081的蛋白a、蛋白b、蛋白c、蛋白d、蛋白e、蛋白f、蛋白g組成。

優選的，所述的抗腫瘤組合物重量百分組成為：蛋白a?25～30％、蛋白b?35～40％、蛋白c?5～10％、蛋白d?1～5％、蛋白e?25～30％、蛋白f1～5％、蛋白g?1～5％。

更優選的，所述的抗腫瘤組合物重量百分組成為：蛋白a?25～28％、蛋白b?35～38％、蛋白c?5～8％、蛋白d?1～3％、蛋白e?25～27％、蛋白f1～2％、蛋白g?1～3％。

最優選的，所述的抗腫瘤組合物重量百分組成為：蛋白a?26.84％、蛋白b?36.22％、蛋白c?5.25％、蛋白d?2.85％、蛋白e?25.77％、蛋白f1.97％、蛋白g?1.1％。

本發明還提供了一種上述抗腫瘤組合物的制備方法，包括：

(1)將大頭金蠅消毒后馴化2代以上，得到種蠅；

(2)培養基置于培養箱內發酵3～5小時后將種蠅放入培養箱內產卵，控制培養箱內氨氣濃度為50～200ppm，卵孵化后，控制培養箱內溫度為26～35℃，氨氣濃度為500～1000ppm，繼續培養24～120小時；

(3)將幼蟲清洗干凈后，冷凍干燥、粉碎，將粉碎物浸入1～15℃的水中30～40小時，10000轉/分下離心10分鐘，取上清液并進行超濾，去除分子量小于8000KD的組分，即為成品。

優選的，卵孵化前，培養箱內一氧化碳濃度小于30ppm，氧氣濃度20～50ppm，二氧化碳濃度3000～6000ppm。卵孵化后，培養箱內一氧化碳濃度小于10ppm，讓幼蠅生長更好。

所述的培養基為青蛙肉、家禽肉、家畜肉、家畜內臟和淡水魚肉中的一種或多種，這些基料易獲得，成本低廉。

所述培養基可以選用以下幾種配方：

(1)10～60％的淡水魚肉、20～70％豬內臟和10～50％的青蛙肉；

(2)30～70％的豬內臟和30～70％的青蛙肉；

(3)10～50％的豬肉和10～50％淡水魚肉及10～50％雞肉；

(4)20～60％的牛肉和30～70％青蛙肉；

(5)30～70％的羊肉、10～50％淡水魚肉及20～60％豬內臟。

本發明組合物對多種癌細胞均有抑制作用，制備方法簡單，具有較好的市場化前景。

具體實施方式

實施例1馴化野生大頭金蠅

取自然界的大頭金蠅，為避免野生種類的帶菌傳病之嫌，經過高猛酸鉀消毒處理后，進行2～3代隔離飼養，然后在接近自然的養蠅房內養殖馴化，經過四代后，種蠅馴化完成，得到種蠅。