[發明專利]解淀粉芽孢桿菌LC03漆酶及其應用

無效

• 申請號: 201010599756.4
• 申請日: 2010-12-22
• 公開（公告）號: CN102154151A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 趙敏;盧磊;潘俊波;李明洋;栗君;王天女
• 申請（專利權）人: 東北林業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/02;C12N15/53;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.解淀粉芽孢桿菌LC03，在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏編號為CGMCC?No.4259。

2.一種芽孢漆酶，該漆酶由權利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌LC03(Bacillus?amyloliquefaciens)產生的。

3.根據權利要求2所述的芽孢漆酶，可在pH?2.2-10.0發揮作用，在30℃時催化底物ABTS的最適pH值為4.0，催化底物丁香醛連氮的最適pH值為6.6，催化底物2，6-二甲氧基苯酚的最適pH值為7.6。

4.根據權利要求2至3所述的芽孢漆酶，可在20-100℃發揮功能，在pH?6.6以丁香醛連氮為底物時最適反應溫度為70℃。

5.根據權利要求2至4所述的芽孢漆酶，10mmol/L的金屬陽離子對所述漆酶的活性有較大的影響，Na⁺、K⁺、Li⁺、Mg²⁺、Ca²和Al³⁺對其活性有激活作用，而Ag⁺、Mn²⁺和Hg²⁺對酶活有抑制作用，其中Ag⁺可使本發明所述的芽孢漆酶完全失活。

6.根據權利要求2至5所述的芽孢漆酶，0.01mol/L以下的NaCl對所述芽孢漆酶的活性有促進作用，在濃度為1mol/L的NaCl存在時仍可保持原始活性的47.61％。

7.根據權利要求2至6所述的芽孢漆酶，可對不同結構的合成染料包括RBBR(Remazol?Brilliant?Blue?R，CAS?No：2580-78-1)，活性黑KN-B(CAS?No：17095-24-8)，結晶紫(CAS?No：548-62-9)和靛紅(CAS?No：860-22-0)進行脫色，脫色條件為：40℃，pH?6.6或9.0，芽孢漆酶懸液的終濃度是1mg/ml，染料終濃度分別為RBBR?100mg/L，活性黑KN-B?40mg/L，靛紅25mg/L，結晶紫5mg/L，加入終濃度是0.1mmol/L的漆酶介體乙酰丁香酮。

8.解淀粉芽孢桿菌具有漆酶活性的基因，是下列核苷酸序列之一：

1)序列表中SEQ?ID?No：1的DNA序列；

2)編碼序列表中SEQ?ID?No：2蛋白質序列的多核苷酸；

3)與序列表SEQ?ID?No：1限定的DNA序列具有90％以上的同源性，且編碼相同功能蛋白質的DNA序列。

9.根據權利要求8所述的基因，其特征在于：所述解淀粉芽孢桿菌(Bacillus?amyloliquefaciens)漆酶基因是序列表中SEQ?ID?No：1。

10.解淀粉芽孢桿菌(Bacillus?amyloliquefaciens)漆酶，是具有序列表中SEQ?ID?No：2氨基酸殘基序列的蛋白質。